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利用流式分选技术富集小鼠单倍体精子细胞
被引量:
1
1
作者
夏小雨
郭陈智
徐晨
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
2014年第2期106-110,共5页
目的:建立并完善流式分选单倍体精子细胞的方法。方法:制备小鼠睾丸单细胞悬液;活细胞DNA染料Hoechst 33342孵育细胞;利用流式细胞术分选富集单倍体圆形精子细胞或长型精子细胞;在分选富集得到的精子细胞中,通过RT-PCR方法检测多种组蛋...
目的:建立并完善流式分选单倍体精子细胞的方法。方法:制备小鼠睾丸单细胞悬液;活细胞DNA染料Hoechst 33342孵育细胞;利用流式细胞术分选富集单倍体圆形精子细胞或长型精子细胞;在分选富集得到的精子细胞中,通过RT-PCR方法检测多种组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达情况;检测组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素对上述基因表达的影响。结果:用Hoechst 33342染色结合流式分选方法可以高效地富集高纯度的精子细胞,还可以进一步纯化圆形精子细胞与长型精子细胞。RT-PCR结果表明,与睾丸整体组织相比,精子细胞中组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达具有特异性,并受姜黄素处理的影响。结论:该流式分选方法提高了富集单倍体精子细胞的效率和纯度,为阐明精子形成的机制提供了简便易学、适于推广的技术平台。
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关键词
流式分选
Hoechst
33342染色
单倍体精子细胞
小鼠
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职称材料
题名
利用流式分选技术富集小鼠单倍体精子细胞
被引量:
1
1
作者
夏小雨
郭陈智
徐晨
机构
上海交通大学医学院组织学与胚胎学教研室
上海市生殖医学重点实验室
上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系流式公共平台
出处
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
2014年第2期106-110,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2010CB945200)
高等学校博士学科点专项科研基金(20110073120083)
上海市科委重点实验室建设基金(上海市重点学科建设基金)(10DZ2270600)~~
文摘
目的:建立并完善流式分选单倍体精子细胞的方法。方法:制备小鼠睾丸单细胞悬液;活细胞DNA染料Hoechst 33342孵育细胞;利用流式细胞术分选富集单倍体圆形精子细胞或长型精子细胞;在分选富集得到的精子细胞中,通过RT-PCR方法检测多种组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达情况;检测组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素对上述基因表达的影响。结果:用Hoechst 33342染色结合流式分选方法可以高效地富集高纯度的精子细胞,还可以进一步纯化圆形精子细胞与长型精子细胞。RT-PCR结果表明,与睾丸整体组织相比,精子细胞中组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达具有特异性,并受姜黄素处理的影响。结论:该流式分选方法提高了富集单倍体精子细胞的效率和纯度,为阐明精子形成的机制提供了简便易学、适于推广的技术平台。
关键词
流式分选
Hoechst
33342染色
单倍体精子细胞
小鼠
Keywords
flow sorting
Hoechst 33342 staining
haploid spermatids
mouse
分类号
R321 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用流式分选技术富集小鼠单倍体精子细胞
夏小雨
郭陈智
徐晨
《中华男科学杂志》
CAS
CSCD
2014
1
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