单克降抗体疗法的崛起

在20世纪70年代,当一位科学家决定探索一项叫做“单克隆抗体”技术的临床价值时,他抓紧了眼前稍纵即逝的机会,迎着周围的反对声托起了一种新的癌症疗法。有这样一个被写入医学史的人,他为如今非常受重视的单克隆抗体研究带来过灵感,但我们可能永远都无法得知他的名字,只能简单地用姓名首字母称呼他为“N.B.”。

用单克隆抗体作芜菁花叶病毒不同分离物外壳蛋白抗原结构的比较研究

用芜菁花叶病毒辽宁分离物（ＴｕＭＶ一ＬＮ）、山东分离物（ＴｕＭＶ一ＳＤ）和榨菜分离物（ＴｕＭＶ一ＺＣ）作抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经脾细胞与ＳＰ２／Ｏ一Ａｇ１４骨髓细胞融合，共获得７个单克隆抗体分泌细胞株。为研究３个分离物的抗原差异，用胰蛋白酶消化ＴｕＭＶ的外壳蛋白（ＣＰ），分别形成４、２和１条降解带，经ＳＤＳ一１５％ＰＡＧＥ后，转移至硝酸纤维薄膜上，用３个分离物的抗血清和７种单隆抗体分别做Ｗｅｓｔｅｍ一ｂｌｏｔ，结果表明：多抗均能与降解带呈现不同程度的反应；２个单抗反应极弱或不反应；２个单抗与所有降解带反应；３个单抗与不同的降解带呈现的反应。３个ＴｕＭＶ分离物的病毒颗粒与多抗及单抗分别做ＥＬＩＳＡ，结果显示：同源抗血清与抗原的反应都高于与异源抗血清的反应，不同分离物作抗原制备的单抗有交叉反应，但与同源分离物的反应强度远远大于异源分离物。这些结果为ＴｕＭＶ分离物之间的鉴别提供了重要的抗原组成与结构信息。

旋毛虫肌幼虫ES Ag单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的获得能够用于制备旋毛虫病快速检测试纸条的ES Ag的单克隆抗体。方法应用旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(ES Ag)免疫诱导Balb/c小鼠,使小鼠产生较强的免疫应答,将免疫小鼠的脾细胞与NS0瘤细胞融合,利用ES-45、ES-49抗原通过间接ELISA对大量杂交瘤细胞培养上清的筛选,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的4株杂交瘤细胞。结果ES-45和ES-49(分子质量分别为45ku,49ku)分别被Ts-2D4、Ts-4C5和Ts-4H6、Ts-2G8单克隆抗体识别,与猪肺丝虫(M etastrongylus pudendotectus.MP)、囊虫(Cysticercus cellulosae,CC)、细颈囊尾蚴(Cysticercus tenuicollis,CT)、蛔虫(Ascaris suum,AS)、弓形虫(Toxoplasma gondii,TG)、住肉孢子虫(Sarcocystism iescheriana,SM)抗原反应测试表明,4株单抗与参试抗原均无交叉反应,所有单抗上清ELISA平均效价为1∶1 120,腹水ELISA平均效价为1.1×106,亲和力常数的平均值为6.12×109L/mol。以金标免疫吸附试纸条原理为基础,利用制备的单抗成功研制了旋毛虫病快速检测试纸条,操作快速、无需设备及试剂,可以作为旋毛虫病的实时监测工具。结论ESAg单抗用于制备旋毛虫病快速诊断试纸条是理想的试剂。

用合成多肽免疫制备尿激酶原单克隆抗体

根据尿激酶原与尿激酶一级结构的区别并结合计算机分子模拟 ,设计合成了包括尿激酶原Thr15 2～Glu16 3肽段的 13肽 ,然后与载体蛋白KLH偶联作为免疫原 ,用B淋巴细胞融合技术获得了 3种尿激酶原特异性单克隆抗体。这 3种抗体仅与尿激酶原和合成多肽反应 ,而不与尿激酶及其结构类似物组织型纤溶酶原激活剂、凝血酶、纤维蛋白原反应。琼脂双向免疫扩散实验及酶活性抑制实验表明 ,3种抗体均为IgG类的IgG1亚类 ,所有 3种抗体均不抑制酶活力。探讨了这组抗体用于尿激酶原结构与功能及其定量。

磺胺甲噁唑单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重氮化方法将磺胺甲噁唑分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及酶联免疫吸附测定法(ELISA)试验,经筛选产生了特异性单克隆抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲噁唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。

抗乙型肝炎病毒X蛋白单克隆抗体导向治疗肝癌

抗乙型肝炎病毒Ｘ蛋白单克隆抗体导向治疗肝癌上海医科大学肝癌研究所为探讨抗乙型肝炎病毒Ｘ蛋白（抗ＨＢｘ蛋白）单克隆抗体（单抗）作为原发性肝癌（ＨＣＣ）导向治疗载体的可能性。方法用分子量为１７０００乙型肝炎病毒Ｘ蛋白免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，制备抗ＨＢｘ单克...

生物素-链霉亲和素技术一步法检测淋球菌抗原的研究

目的 :建立一种灵敏、快速诊断淋球菌感染的酶免疫测定法。方法 :检测淋球菌抗原的生物素 -链霉亲和素酶联免疫一步法。结果 :36例临床淋球菌标本中淋球菌抗原含量 1 0 8.47± 5 1 .39μg/ L ,阳性率 97.2 % ,显著高于非淋球菌标本的 4.71± 2 .1 3μg/ L ,阳性率 0 % (P均 <0 .0 1 ) ,本法检测灵敏度 0 .6 2 5 μg/ L,特异性 1 0 0 % ,敏感性 97.2 %。结论 :该法可作为灵敏、快速诊断淋球菌的新的辅助方法。

与海洛因有完全交叉反应的抗吗啡单抗的制备

目的制备吗啡的单克隆抗体(mAb)并鉴定抗体的特性。方法6-琥珀酰化吗啡与Bluecarrier(BC)载体蛋白交联制备6-琥珀酰化吗啡酯(M-6-S-BC),用其免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤,经筛选和3次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果获得4株杂交瘤细胞G1、G3、H4和B1,其分泌单抗的亚型均为IgG1型。经ELISA鉴定,该单克隆抗体可结合游离的吗啡、海洛因及可待因,而且对海洛因的结合优于吗啡,该单抗不与非阿片类药物结合。结论所制备的吗啡单克隆抗体可特异性结合吗啡等阿片类药,将为建立体外吗啡及海洛因的非同位素检测方法奠定基础。

Syndecan-1在神经干细胞的表达及其与AC133的关系

目的研究syndecan-1(CD138)在人的胚胎神经干细胞上的表达及其与AC133的关系。方法采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析,通过CD138、AC133直标单克隆抗体(mAb)观察神经干细胞细胞膜上CD138和AC133荧光标记阳性率;同时通过双重免疫荧光标记法,观察神经干细胞细胞膜上共表达CD138和AC133的百分比。结果神经干细胞上均表达CD138和AC133分子,同时,表达AC133分子的神经干细胞约有50%左右表达CD138分子。结论在神经干细胞的早期已有CD138分子的表达,其对神经干细胞的生长、分化等作用值得进一步研究。

抗hAR-N段McAb的制备及其在免疫组化检测中的应用

目的 :自行研制抗人雄激素受体 (androgenreceptor,AR)单克隆抗体 (McAb) ,以期达到可替代国外AR多克隆抗体。方法 :采用人雄激素受体合成肽 (hAR -N)交联钥孔戚血蓝素 (KLH)为抗原 ,免疫BALB/C小鼠 ,经用Kohler和Milstein杂交瘤技术成功地获得 4株能稳定分泌抗hAR单克隆抗体 (McAb)杂交瘤细胞株 5 5 ,141,2 0 7,2 5 7。结果 :对 45例前列腺癌组织石蜡切片进行了免疫组化 (IHC)检测 ,同时对自制抗hAR -NMcAb与进口抗AR多抗进行分析比较 ,阴阳总符合率为 91%。结论 :自制抗ARMcAb特异性强 ,灵敏度高 ,结果与Zymed公司产品相同 ,操作简便 ,适于临床应用。

戊型肝炎病毒第Ⅳ基因型特异性抗原表位的鉴定与定位

目的研究戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型巾国株开放阅读框架(ORF)2编码蛋白p166Chn的抗原表位特征。方法制备HEV ORF2重组衣壳蛋白p166Chn的特异性单克隆抗体(McAb)．进行中和活性鉴定,并利用7种HEV不同基因型p166重组蛋白以及22种N端或C端逐步截短的p166Chn进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,确定McAb所识别抗原表位的性质和位置。结果获得1株稳定分泌HEV McAb的杂交瘤细胞株,命名为B_4。该McAb不与其他基因型p166重组蛋白反应,不能中和HEV对培养细胞的感染性,也不能竞争抑制已知中和性McAb与抗原p166Chn的结合,表明McAb B_4所针对的抗原表位是HEV第Ⅳ基因型特异的非中和性抗原表位。此外,McAb B_4能与截短蛋白pN452、pN460、pN462、pN463、pN464、pN465、pN466、pN468、pN470和pN472发生阳性反应,而与pN482、pN492、pC587、pC597、pC599、pC600、pC601、pC603、pC605、pC607、pN465- C601和pN460-C605均不反应。表明其可识别的抗原表位位于472～617位氨基酸,而且N端第472～482位氨基酸以及C端第607～617位氨基酸的1个或多个氨基酸对构成该抗原表位起着重要作用。结论所发现的HEV第Ⅳ基因型特异性抗原表位是1个非中和性的构象依赖性表位,可定位于pORF2的第472～617位氨基酸。

抗血管内皮生长因子单克隆抗体Bevacizumab玻璃体腔注射后眼内炎一例

患者女，67岁。因右眼视力下降、视物变形就诊。否认糖尿病病史。经眼科常规检查和眼底检查后诊断为右眼老年性黄斑变性（AMD）。

免疫分子生物学(免疫化学)

0031639 静脉给予免疫球蛋白(IVIG)的体内试验:对 IL-1系统的下调作用/Aukrust P//Clin Exp Immunol.-1999,115(1).-136～143 医科情0031640 与 G 蛋白相关的蛋白 MIG 的5个同源性复制物共同操作对羊免疫球蛋白G的结合/Vasi J//Infect Immun.-1999,67(1).-413～416 医科情0031641 HLA-A24拘束性

阿达木单抗治疗复发性多形红斑1例

阿达木单抗为抗人肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor，TNF）的人源化单克降抗体。作者报告了1例对治疗抵抗而阿达水单抗治疗完令缓解的复发性多形红斑（erythemamultiforme，EM）患者。