堆型艾美耳球虫单克隆抗体细胞株的鉴定

通过对杂交瘤细胞染色体分析、单克隆抗体的免疫组化和免疫荧光等指标的检测 ,对已建立的单克隆抗体细胞株5B4和5G7进行鉴定 ,结果表明 :两株单克隆抗体细胞株的染色体数目均接近两亲本的染色体数目之和 ;所建立的单克隆抗体细胞株所分泌的特异性抗体是针对子孢子的。

抗HIV-p24单克隆抗体细胞株的建立及初步应用

拟建立抗HIV-p24蛋白的单克隆抗体细胞株及双抗体夹心法,用于检测艾滋病病人血清中的p24抗原。用纯化的基因工程表达的HIV-p24蛋白免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,有限稀释法克隆细胞,ELISA筛选特异性抗体。结果克隆筛选出12株细胞,初步建立了检测HIV-p24抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验。本方法为监控艾滋病病毒感染的窗口期和艾滋病病人临床治疗效果提供了检测手段。

分泌抗急性非淋巴细胞白血病M_2型单克隆抗体细胞株的建立及其特异性

应用细胞杂交瘤技术建立了分泌抗急性非淋巴细胞白血病M_2型单克隆抗体1D_1、1C_2和1D_6细胞株,连续传代11个月,稳定地分泌单克隆抗体。用间接免疫荧光方法检测,这三株细胞分泌的单克隆抗体与急性非淋巴细胞白血病M_2型病人的白血病细胞呈阳性反应;与急性非淋巴细胞白血病M_1、M_3、M_4、M_5型病人白血病细胞呈阴性反应;与慢性粒细胞白血病、慢粒急变,急性淋巴细胞白血病病人白血病细胞呈阴性反应;与正常人白细胞也呈阴性反应,说明建立的细胞株分泌的单克隆抗体具有型的特异性。

甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株的建立及鉴定

目的探讨建立和鉴定甲型肝炎（HAV）病毒单克隆抗体（McAb）细胞株的方法,为临床提供抗体来源。方法通过McAb杂交瘤细胞培养方法进行甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株的培养后,选取实验培养的具有稳定性的McAb杂交瘤细胞后编号,对各细胞株进行特异性、效价的测定,并进行比对。结果 McAb杂交瘤细胞与甲肝病毒抗原的结合特异性效价在1（：10 000~80 000）间,提示McAb与甲肝病毒抗原的结合具有特异性;McAb细胞培养上清液效价在1（：2 048~16 824）间。结论通过McAb杂交瘤方法建立的甲型肝炎病毒单克隆抗体细胞株具有较好的稳定性和特异性,且其效价较高,对临床甲型肝炎的诊断和疫苗的培养接种具有十分重要的作用。

小鼠腺病毒单克隆抗体的研制及初步应用

应用杂交瘤技术获得４株分泌抗小鼠腺病毒（ＭｕｒｉｎｅＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＭＡｄ）单克隆抗体细胞株，并对其特性进行分析。经鉴定，它们所分泌的抗体类型均为ＩｇＭ，腹水效价为１０－３～１０－６。相对亲和力分别为０．１μｇ／ｍｌ（Ａ９）、０．６５μｇ／ｍｌ（Ｂｌ）、１２．５μｇ／ｍｌ（Ｇ４）和２３μｇ／ｍｌ（Ｄ４）。与其他１０种鼠源性病毒均无交叉反应，表明ＭｃＡｂ具有良好的特异性。单抗标记ＦＩＴＣ后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中ＭＡｄ检测，获得良好的实验结果。

抗SARS病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的 制备抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体并研究其初步应用。方法 用基因重组N蛋白免疫小鼠 ,取免疫后的鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,筛选分泌抗SARS病毒N蛋白单克隆抗体细胞株。将阳性细胞株接种小鼠腹腔制备单克隆抗体腹水并对抗体进行纯化 ,分析纯化抗体的相对亲和力。选择亲和力较高的抗体制备检测SARS病毒抗原的酶联免疫诊断试剂 ,并对其敏感性和特异性进行分析。结果 共获得 11株单克隆抗体细胞株 ,其中 3株单抗与N蛋白具有较高的亲和力 ,4株纯化单抗与N蛋白反应很弱 ,其余 4株单抗介于两者之间。用亲和力较高的单抗制备检测SARS病毒抗原的诊断试剂 ,其敏感性可达 31PFU ml,而且与其他呼吸道病毒无交叉反应。结论 该试剂特异性较好 ,可用于SARS病毒抗原的检测 ,其敏感性仍需用临床急性期样品进行评价。

Effects of monoclonal antibodies against human stathmin 1 combined paclitaxel on proliferation of human hepatocellular carcinoma cell lines

Objective： We investigated the effects of monoclonal antibodies against stathmin 1 combined paclitaxel on the proliferation of HCC cells. Methods： HepG2 cells were treated with monoclonal antibodies against stathmin 1, paclitaxel alone or their combination, with the untreated cells used as the control, 24, 48, 72, 96 h later, the cell growth condition was observed by invert microscope and inhabitation rate was studied by MTT assay; The apoptosis was analyzed by flow cytometry with Annexin V/PI. Results： The population decreased and shape, size changed after treating with different concentration of experimental groups. Monoclonal antibodies against stathmin 1 and paclitaxel used alone or in combination both inhibited the proliferation of HepG2 cells, the inhibition ratio of their combination was more higher （P 〈 0.05）, and a synergistic effect of the two agents was noted in their combined action （P 〈 0.05）. Combined treatment of the cells resulted in significantly higher apoptosis rate than that in the other groups （P 〈 0.05）. Conclusion： Monoclonal antibodies against stathmin 1 and paclitaxel used alone or in combination both can inhibit proliferation of HepG2 cells and induce apoptosis. A synergistic effect is obsewed between the monoclonal antibodies against stathmin 1 and paclitaxel in their inhibition of HepG2 cell proliferation.