结直肠癌患者测定血脂和单克隆抗体肿瘤标志物水平进行诊断的临床研究

目的探讨结直肠癌患者测定血浆血脂和单克隆抗体肿瘤标志物水平进行诊断的临床意义。方法96例结直肠癌患者（包括Ⅰ～Ⅱ期62例和Ⅲ～Ⅳ期34例）和30例良性结直肠瘤患者血脂和单克隆抗体肿瘤标志物CA199、CA724、CA153水平分别由生化法和电化学发光免疫分析法进行测定，并进行了对比性研究。结果Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌患者血清TC、HDL．C和HDL-C／TC比值水平较之良性结直肠瘤患者无明显差异（P均〉0．05）；而Ⅲ～Ⅳ期结直肠癌患者较之良性结直肠瘤患者血清TC水平明显增高（P〈0．01），血清HDL-C和HDL-C／TC比值水平明显降低（P均〈0．01）。Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期结直肠癌患者血清CA199、CA724和CA153水平较之良性结直肠癌患者均明显增高（P〈0．01）。单克隆抗体肿瘤标记物的阳性率显示：良性结直肠瘤患者的阳性率为3．33％～13．33％，结直肠癌患者血清CA199、CA724和CA153的阳性率为39．58％、37．50％、35．40％，CA199＋CA724的阳性率为58．33％。CA724＋CA153的阳性率为62．50％，CA199＋CA724＋CA153的阳性率为84．44％。结论结直肠癌患者血清TC水平增高和HDL-C、HDL．C／TC比值水平的降低是诊断中、晚期癌症的良好指标，单克隆抗体肿瘤标志物CA199、CA724和CA153水平的联合测定是提高结直肠癌患者阳性率的重要措施。

测定血浆血脂和单克隆抗体肿瘤标志物水平对诊断结直肠癌的临床意义

探讨测定血浆血脂和单克隆抗体肿瘤标志物水平对诊断结直肠癌的临床意义。方法 此次研究对象为我院近年来收治的100例结直肠癌患者与35例良性结直肠瘤患者,对于患者的血浆血脂采用生化法加以测定,对于单克隆抗体肿瘤标志物采用电化学光免疫分析法加以测定,且加以比较分析。结果 通过实验观察,同良性结直肠瘤患者相比较,在TC、HDL-C、HDL-C/TC几个方面,Ⅰ-Ⅱ期结直肠癌患者无显著差异(P>0.05),而Ⅲ-Ⅳ期结直肠癌患者差异显著(P<0.05)。在单克隆抗体肿瘤标记物阳性检出率方面,良性结直肠瘤患者是2.86%-14.29%,结直肠癌患者的单项检出率为35.00%-40.00%,三者联合检出率最高为84.00%。结论 对于结直肠癌患者而言,血清TC水平的升高与HDL-C、HDL-C/TC的下降是中期和晚期结直肠癌患者诊断的重要指标,CA199、CA724与CA153几者的联合检测是提升结直肠癌阳性检出率的主要诊断措施。

分析测定血浆血脂和单克隆抗体肿瘤标志物水平对诊断结直肠癌的临床意义

分析测量血脂水平与单克隆抗体肿瘤标志物的结果对于结直肠癌临床诊断的应用意义。方法:选择医院在2020年5月-2021年5月收治的结直肠癌患者36例,将这部分患者列为分析组,Ⅰ-Ⅱ期24例,Ⅲ-Ⅳ期12例;同时选择同一时间医院接待的进行健康体检的群众36例作为对照组。所有患者都抽取空腹静脉血进行检查,测定血脂指标TG、TC、HDL-C、 LDL-C以及单克隆抗体血清肿瘤标志物CA199、CA125、CEA水平。对比两组之间的区别,并分析肿瘤标志物检测结果对于疾病确诊的价值。结果:两组在HDL-C、LDL-C水平之间对比存在显著差异(P<0.05),而在TC、TG之间的水平无较大差异,对比P>0.05,其中,分析组的HDL-C水平相比对照组显著较低,而Ⅲ-Ⅳ期相比Ⅰ-Ⅱ期要高,对比P<0.05;在LDL-C水平方面,对照组与Ⅰ-Ⅱ期相比差异不大(P>0.05),但Ⅲ-Ⅳ期要比Ⅰ-Ⅱ期高,对比P<0.05;分析组的CA199、CA125以及CEA水平相比对照组明显较高(P<0.05),同时,Ⅲ-Ⅳ期要比Ⅰ-Ⅱ期高,对比P<0.05;应用单克隆抗体肿瘤标志物诊断结直肠癌的阳性率,联合检测效力中的各指标均高于单独指标检测,对比P<0.05。结论:结直肠癌患者的血脂水平表现出显著降低趋势,与其病情预后有密切关系。同时联合单克隆抗体肿瘤标志物CEA、CA199、CA125的检测结果,用于诊断结直肠癌,可以提高诊断准确率,并有良好的灵敏度和特异度,对于结直肠癌的临床诊断与治疗有较高的指导价值。

新型肿瘤标志物人PF4重组表达、活性鉴定及单克隆抗体制备

目的 构建重组表达质粒pET28a-PF4,诱导表达重组人PF4 （rhPF4）,制备rhPF4的单克隆抗体.方法 将pUC-57-PF4质粒中的PF4基因克隆到原核表达质粒pET28a上,在BL21菌株中诱导表达,对表达的蛋白进行亲和层析纯化和SDS-PAGE及western blotting鉴定;MTT法检测rhPF4对对数生长期EA.hy926细胞的生长抑制作用;以rhPF4为免疫原,通过细胞融合技术制备抗rhPF4的单克隆抗体.结果 重组质粒在BL21菌株中高效表达,rhPF4占总蛋白的19％,表达蛋白分子量约14 KDa,与商品化人PF4单抗呈阳性反应;rhPF4可抑制内皮细胞EA.hy926的生长繁殖;建立的杂交瘤细胞株能稳定产生抗rhPF4单克隆抗体.结论 建立的BL21菌株可高效表达可溶性的rhPF4,该rhPF4能抑制EA.hy926的生长繁殖,制备的抗rhPF4单克隆抗体可用于新型肿瘤标志物PF4的检测试剂的开发.

单克隆抗体与平阳霉素偶联物对肿瘤的区域性导向实验治疗

以小鼠Ｈ２２肝癌腹腔内移植和胸腔内移植肿瘤为模型，观察３Ａ５ＰＹＭ偶联物对腔内肿瘤的治疗作用，并以裸鼠移植结肠癌为模型，观察局部注射的治疗作用。结果表明，于小鼠肝癌Ｈ２２皮下肿瘤局部给药，３Ａ５ＰＹＭ在肿瘤的浓度较游离ＰＹＭ高，滞留时间也较长。对小鼠腹腔内或胸腔内移植的肿瘤，腔内注射３Ａ５ＰＹＭ比游离ＰＹＭ具有更显著的延长动物生存期的作用。裸鼠皮下移植ＨＴ２９人结肠癌，在肿瘤周围注射３Ａ５ＰＹＭ比ｉｖ或ｉｐ给予３Ａ５ＰＹＭ显示更高的抑瘤率。提示单抗与平阳霉素偶联物在肿瘤的区域性导向治疗中有较好的疗效。

抗癌抗生素C1027与单克隆抗体偶联物的抗肿瘤作用

抗癌抗生素C1027对癌细胞有强烈杀伤作用,比阿霉素强10000倍以上,C1027与癌细胞接触10min即显示对DNA合成的强烈抑制作用,C1027分子由发色团与蛋白质两部分构成;发色团是烯二炔新化合物,是C1027分子的主要活性部分.C1027分子可拆分与重建,重建的C1027同样有高度抗肿瘤活性.通过新的交联方法可制备C1027与单抗的强化偶联物.体外、体内试验表明.C1027单抗偶联物对肿瘤靶细胞有很强的特异性杀伤作用;对移植于探鼠的人体肝癌、胃癌有显著疗效,在可耐受剂量,肿瘤抑制率达85%(P<0.01).研究结果显示,C1027作为高效“弹头”药物,可用于研制新的小型化高效抗肿瘤导向药物.

平阳霉素与单克隆抗体Fab′片段偶联物的抗肿瘤作用

目的 研制一种以单抗Fab′片段为基础的抗肿瘤导向药物。方法 制备单抗 3A5Fab′片段及其与平阳霉素 (PYM )偶联物Fab′ PYM后 ,测定Fab′ PYM与肿瘤细胞的免疫反应性、偶联物中PYM的抑菌活性、对肿瘤细胞的杀伤作用和体内抑瘤作用。结果 Fab′及Fab′ PYM保持了与靶细胞C2 6的免疫反应性 ;偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的 15 % ;Fab′ PYM对C2 6细胞的杀伤作用强于PYM ;对非靶细胞KB的杀伤作用与PYM相似 ;ip和iv给药 ,Fab′ PYM对小鼠皮下接种的肠癌 2 6生长抑制作用均强于 3A5 PYM和PYM。结论 Fab′ PYM具有比PYM及 3A5

日本血吸虫感染者尿液诊断标志物的电泳筛选及其单克隆抗体的制备和初步应用

目的 筛选日本血吸虫感染者尿液检测探针。方法 采用电泳方法从日本血吸虫感染者尿液筛选诊断标志物，以此为抗原制备ＭｃＡｂ，并用ＥＬＩＳＡ对尿样进行了初步检测。结果 ＰＡＧＥ电泳法筛选到一条分子量约３０ｋＤａ 的糖蛋白带；以此糖蛋白为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体，获得２ 株ＭｃＡｂ － ＮＰ５６ 和ＮＰ５４；用ＮＰ５６ 以间接ＥＬＩＳＡ法检测１０ 份日本血吸虫感染者尿液（ＥＰＧ中位数为６９），浓缩５０ 倍尿液和原尿分别有９ 份和５ 份呈阳性。结论 本研究制备的ＭｃＡｂ－ ＮＰ５６ 有望作为日本血吸虫慢性病人和轻度感染者尿液的检测探针应用于现场。

力达霉素构建的小型化单克隆抗体免疫偶联物的抗肿瘤作用

目的研制一种具有高效、小型化特点的抗肿瘤单克隆抗体(单抗)免疫偶联物。方法以化学偶联法制备抗肿瘤抗生素力达霉素(LDM)与单抗Fab'片段的偶联物Fab'-LDM。以非还原型SDS-PAGE法确定偶联物的相对分子质量;ELISA法、四氮唑蓝(MTT)法、克隆形成法及小鼠移植性结肠癌26(C26)模型观察Fab'-LDM偶联物的抗肿瘤作用。结果Fab'-LDM偶联物的相对分子质量(Mr)约为65000,Fab'与LDM的偶联分子比为1∶1;偶联物与BEL-7402及C26细胞均呈免疫学阳性反应,但与KB细胞无反应;Fab'-LDM对靶细胞BEL-7402的杀伤作用比游离LDM强13倍,对C26细胞的杀伤作用比LDM强5.5倍,但对非靶细胞KB的作用与LDM相当。动物试验结果表明,0.05mg/kg、0.1mg/kg和0.2mg/kg剂量Fab'-LDM偶联物对小鼠移植性结肠癌26的抑瘤率分别达80%、92%和94%,而0.1mg/kg剂量游离LDM的抑瘤率为77%;同时偶联物治疗组动物生存时间较对照组延长。偶联物的抑瘤作用强于等剂量游离LDM(P<0.01)。结论以高效抗肿瘤抗生素LDM为“弹头”药物,可与单抗活性片段构建成具有良好抗肿瘤作用的小型化单抗导向药物。

治疗性单克隆抗体的研究进展及其免疫偶联物的抗肿瘤应用

目前正在研究的生物技术药物有1/4是单克隆抗体类药物,治疗性抗体已成为生物制药业发展最快的领域之一,它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等。在发展初期,鼠源单克隆抗体为人类疾病的研究起到了重大的推动作用,但其存在着严重的不足,单克隆抗体人源化已逐渐成为当前研究的热点。另外,将放射性物质、化疗药物以及生物毒素等与单克隆抗体偶联得到免疫偶联物,这些偶联物被单克隆抗体特异性地导向表达相应抗原细胞的表面,并发挥抗肿瘤效应,同时也降低了药物对正常组织的损伤。文中就有关单克隆抗体人源化的研究进展和抗肿瘤应用进行综述。

烯二炔类抗肿瘤抗生素单克隆抗体导向药物研究进展

单克隆抗体对相应的抗原有高度特异性。因此,利用单抗作为特异性载体制成导向药物(免疫偶联物),对于治疗肿瘤有巨大潜力和引人瞩目的前景。文章对烯二炔类抗肿瘤抗生素.特别对新制癌菌素、力达霉素和calicheamicins及其单克隆抗体免疫偶联物的研究进展作了概述。

单克隆抗体耦联物治疗肿瘤的研究与进展

单克隆抗体药物是目前肿瘤治疗领域的研究热点之一。现对近年来抗体耦联物(如放射免疫耦联物、化学免疫耦联物、免疫毒素、抗体-细胞因子融合蛋白、抗体导向酶-前体药物疗法、微型双特异性抗体等)在肿瘤治疗方面的重要进展作一简要综述。

抗肿瘤抗生素和单克隆抗体药物的研究进展

微生物产物是发现与研制新药的丰富资源。近年来 ,报道了作用于各种不同靶点的抗肿瘤抗生素。单克隆抗体 (单抗 )对相应的抗原具有高度特异性 ,可以针对特定的分子靶点 ,制备与之特异性结合的单抗 ,在肿瘤治疗中有巨大的潜力。 Mylotarg是由单抗和抗肿瘤抗生素 calicheamicin连接的偶联物 ,它的研制成功表明 ,抗肿瘤抗生素与单抗药物研究出现了新的结合点。利用特定的抗肿瘤抗生素作为“弹头”物质 ,分别与不同的单抗进行连接 ,将可构建一系列的、针对各种癌症的抗肿瘤单抗药物。

肺癌血清标志物CK19单克隆抗体制备及初步应用

同肺癌相关的血清标志物CK19,其存在或量变不仅可以指示肿瘤性质,还可以指导肿瘤的诊断、分类、预后以及治疗。本次研究使用BALB/C小鼠进行免疫(使用CK19的重组抗原),血清滴度进入平台期后将骨髓瘤细胞与前期经过免疫的小鼠脾细胞融合,进一步将细胞克隆化,共得到6株杂交瘤细胞株(能持续稳定分泌抗CK19抗体)。对6株抗CK19的单抗株进行腹水诱导和扩大培养,并将诱导得到的腹水进行纯化,采用亲和层析法。为获得一个最灵敏的双抗体夹心单抗配对,将纯化后的单抗株做正交配对的筛选并制备酶标抗体。最终获得了最优配对:11E6+16A5-HRP。灵敏度分析的检测结果显示,该配对对CK19重组抗原的检测灵敏度为15.6ng/ml。

肺癌自身抗体联合肿瘤标志物检测诊断早期肺癌的价值

目的 探讨肺癌自身抗体联合肿瘤标志物检测诊断早期肺癌的价值。方法 选取2020年10月—2022年10月于福建省肿瘤医院就诊的存在肺部病灶的712例患者,经过病理诊断后分组为早期肺癌组524例患者、肺部良性病变组188例患者,选择同期150名健康体检者作为对照组。检测肿瘤标志物[癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA21-1)及神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)]及肺癌自身抗体[7种肿瘤相关自身抗体(7-TAAbs):CAGE、p53、SOX2、PGP9.5、GAGE7、MAGE A1、GBU4-5]水平。结果 3组CEA、CYFRA21-1及NSE、CAGE、p53、SOX2、PGP9.5、GAGE7、MAGE A1、GBU4-5水平相比,差异有统计学意义(P<0.05);肺癌自身抗体与肿瘤标志物联合检测的灵敏度显著高于单一肺癌自身抗体检测及单一肿瘤标志物检测(P<0.05)。结论 早期肺癌患者、肺部良性病变患者及健康者的肺癌自身抗体和肿瘤标志物水平差异显著。肺癌自身抗体联合肿瘤标志物检测可提高早期肺癌诊断灵敏度,为患者早期治疗提供参考。

单克隆抗体导向的间接和小型化偶联物的体内抗肿瘤作用及机制初探

目的:观察抗人成骨肉瘤单克隆抗体导向的间接OSMcAb-HSA-MTX和小型化偶联物F(ab′)2-MTX的体内抗肿瘤作用及对其作用机制作初步探讨。方法:应用流式细胞仪观察小型化偶联物F(ab′)2-MTX、间接偶联物OSMcAb-HSA-MTX、直接偶联物OSMcAb-MTX对细胞周期时相的影响;在裸鼠移植性人成骨肉瘤的模型上观察上述偶联物的体内抗肿瘤作用。结果:各处理组细胞周期中G0/G1期细胞数明显增加,S期细胞数明显减少,均可见明显的凋亡峰,F(ab′)2-MTX、OSMcAb-HSA-MTX、McAb-MTX、MTX处理组的S期细胞百分数(SPP)分别为(22.9±2.4)%、(26.4±2.2)%、(27.3±2.3)%、(30.6±4.5)%,F(ab′)2-MTX作用最强(P<0.05),McAb-HSA-MTX、McAb-MTX次之。F(ab′)2-MTX偶联物静脉注射和腹腔注射给药抑瘤率分别为91.17%和88.33%,均有较游离药物更高的疗效,同时也优于Mcab-MTX、Mcab-HSA-MTX偶联物(P<0.05)。结论:单克隆抗体导向的间接和小型化偶联物通过抑制细胞的S期,诱导细胞的凋亡而发挥抗肿瘤作用;F(ab′)2-MTX、OSMcAb-HSA-MTX具有良好的体内抗肿瘤作用,F(ab′)2-MTX作用更强。

新型抗肿瘤抗生素与单克隆抗体免疫偶联物的研究

(一)抗肿瘤抗生素的研究与开发 1.抗肿瘤抗生素是微生物产生的抗肿瘤活性物质,自然界微生物种类繁多,其代谢产物极为复杂多样,是寻找新药的宝库。中国医学科学院建院41年来,我们长期从事抗肿瘤抗生素的筛选研究,近10年来得到国家自然科学基金重大项目、国家新药项目和国家“九五”攻关项目基金资助,对全国各地以及南极土壤样本分离获得的微生物进行研究。累计筛选样品超过100,000个。 2.

自身抗体作为肿瘤生物标志物的研究进展

患者自身免疫系统对内源性物质反应产生的自身抗体正在成为一种备受关注的癌症早期监测生物标志物。尽管在极少量的相应抗原刺激下,这些血清免疫生物标志物仍会大量产生,因此它们是一类新的稳定和微创的肿瘤生物标志物。在此,本文详细介绍了自身抗体作为癌症生物标志物的优点,以及在临床应用中包括帮助诊断肿瘤、帮助患者分层、作为治疗手段和监测预后的作用,同时介绍了自身抗体检测方法。

肿瘤标志物检测联合自身抗体对非小细胞肺癌早期诊断的临床价值

本次研究的目的是探究肿瘤标志物联合自身抗体检测对于非小细胞肺癌早期诊断的价值。选取来我院就诊的诊断为非小细胞肺癌的患者80例,所有患者均进行肿瘤标志物和自身抗体检测,结合检测结果分析联合检测能更准确地识别阳性样本,以提升检测的准确性,并为临床诊断提供更多依据。因此,联合检测自身抗体和肿瘤标志物在提高诊断准确性方面具有较强的优势,尤其是在提高阴性预测值方面表现突出。在非小细胞肺癌的诊断过程中,单独检测肿瘤标志物或自身抗体虽然各有其诊断价值,但它们在诊断敏感度和特异度上均无法达到联合检测时的水平。单独检测时,这两种方法可能无法适用于多有的病例,尤其是在早期肺癌患者的诊断中。肿瘤标志物的检测在特定情况下可能会出现假阴性结果,而自身抗体检测虽然能提高敏感性,但其特异度可能不足以确保诊断的准确性。肿瘤标志物与自身抗体联合检测时,不仅可以提高诊断的敏感度,还能增强特异度,从而提高对非小细胞肺癌的整体检出率。肿瘤标志物与自身抗体的联合检测在非小细胞肺癌的诊断中显得尤为重要,能够提供更加准确和全面的诊断信息。

去甲斑蝥素用于单克隆抗体为载体的肿瘤导向治疗实验研究

用单抗３Ａ５制备与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）的偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性，两者的ＩＣ５０分别为２．３ｍｇ／Ｌ和４．２ｍｇ／Ｌ。小鼠腹腔内移植Ｈ２２肝癌，腹膜内给药（ｉｐ），３Ａ５ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）的延长寿命值（ＩＬＳ）分别为１６８％和４２％。裸鼠移植人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞，静脉给药（ｉｖ），ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞０．０５），３Ａ５ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜０．０１）；瘤结周围给药（ｐｔ），ＮＣＴＤ的肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜０．０５），３Ａ５ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜０．０１）。结果表明，与ＮＣＴＤ相比，３Ａ５ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌和腹腔肿瘤具有更强的治疗作用。以上结果提示单抗与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。