胎盘间充质干细胞与免疫抑制药物体外联合应用对单向淋巴细胞混合反应的作用

目的提取并鉴定胎盘间充质干细胞,检测胎盘间充质干细胞对单向淋巴细胞混合反应的免疫调节作用,并将胎盘间充质干细胞与免疫抑制药物(环孢素A或霉酚酸)联合应用,检测二者联合后对单向淋巴细胞混合反应的作用。方法组织块培养法提取胎盘间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标志,II型胶原免疫组化染色及甲苯氨蓝染色检测胎盘间充质干细胞向软骨细胞分化的能力。MTT检测单独应用胎盘间充质干细胞或与环孢素A或霉酚酸联合应用后,单向淋巴细胞反应中T细胞的增殖情况。结果成功提取胎盘间充质干细胞,其表面阳性表达CD29和CD44。II型胶原及甲苯氨蓝染色均呈阳性。单独应用胎盘间充质干细胞可抑制单向淋巴细胞混合反应中T细胞的增殖。与环孢素A联合后该作用减弱,与霉酚酸联合后该作用增强。结论组织块培养法可成功提取胎盘间充质干细胞。该细胞对单向淋巴细胞混合反应有负向免疫调节作用。胎盘间充质干细胞与不同的免疫抑制药物联合对单向淋巴细胞混合反应产生的作用是有差异的。

去牛血清清蛋白化对复方壳多糖组织工程皮肤单向混合淋巴细胞反应的影响

目的探索复方壳多糖组织工程皮肤去牛血清清蛋白化的洗涤方法及对其单向混合淋巴细胞反应的影响。方法从头制备复方壳多糖组织工程皮肤,ELISA法检测不同洗涤条件下外渗液中牛血清清蛋白的浓度,然后检测在最优洗涤条件下组织工程皮肤单向混合淋巴细胞反应的强度。结果当洗涤间隔时间为3h,洗涤次数为2次时能使外渗液中牛血清清蛋白的浓度降到50ng/mL以下;按该方法洗涤后,组织工程皮肤的单向混合淋巴细胞反应强度显著降低。结论复方壳多糖组织工程皮肤以3h×2次洗涤,能够显著降低其外渗液中牛血清清蛋白的浓度及其单向混合淋巴细胞反应的强度。

单向聚合酶链式反应扩增法研究

:c DNA的末端快速扩增 (RACE)是获得全长 c DNA的有效手段之一。本文论述了 RACE技术的原理、方法和改进 ,并介绍了新型 RACE技术。

研究生英语口语测试研究

以Hymes、Canale、Swain和Bachman的交际能力理论为基础 ,以Bachman的测试方法层面模式为框架 ,可以改进非英语专业研究生英语口语测试方法 ,促进研究生口语交际能力的培养和研究生英语教学水平的提高。

妊娠期肝内胆汁淤积症母-胎间免疫耐受的探讨

目的初步探讨ICP发病机制中的母—胎间的免疫耐受现象。方法采用单向混合淋巴细胞反应法对照研究20例ICP患者(研究组)及正常孕妇(对照组)的母体淋巴细胞对已灭活的胎儿单个核细胞(PBMC)反应的增殖情况。结果母体淋巴细胞与已灭活的胎儿脐血中的单个核细胞单向混合淋巴反应中,ICP患者组的母体淋巴细胞的增殖程度显著高于正常组。结论(1)在ICP患者中母-胎间的免疫抑制较正常孕妇是减弱的。(2)ICP患者母-胎间免疫耐受失衡可能是ICP发病的重要机制之一。

猪同种异体肾移植术前组织配型方法探讨

同种异体器官移植及建立器官移植模型术前进行严格组织配型有利于减少免疫学因素的影响,使受体和移植物长期存活。由于目前没有成熟的猪组织配型方法及试剂,我们模拟人器官移植方法选择供受体建立猪同种异体肾移植模型。从23头四川白猪中选择ABO血型相同、ABO血交叉配血反应阴性、微量淋巴细胞毒反应(CDC)、阴性单向混合淋巴反应(MLR)相对较低的同胞猪共6对(1例只作供体)为供受体行单肾原位移植,另一侧肾切除。5例组织相容性较低(MLR在2175～3560之间,CDC计分在1～4分之间),其中2例于术后第2d死于手术打击,2例术后第4d分别死于急性肾小管坏死和加速性排斥反应,1例术后1周死于急性肾小管坏死。6例组织相容性较高(MLR在982～1916之间,CDC计分在2～4分),其中1例死于手术麻醉,3例分别于术后2周死于加速排斥和急性排斥,1例术后肾功能良好,另1例术后发生轻微排斥反应,而后肾功能恢复正常。提示模拟人组织配型方法选择供受体可以建立猪同种异体肾移植模型。通过ABO血型、交叉配血、CDC及MLR实验筛选成功地避免了超急性排斥反应的发生。但从本实验数据中很难分析该配型方案在避免加速型排斥反应、急性排斥反应和慢性排斥的作用,进一步的实验仍在研究之中。

小鼠诱导性共刺激分子-Ig在小鼠树突状细胞中的表达及其效应研究

目的 获得mICoS-Ig基因修饰的小鼠DC,分析表达产物mICOS-Ig对T细胞活化的影响。方法 采用电转染方法将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,通过ELISA法检测转染小鼠DC 60和96 h以及稳定表达的培养上清;观察mICOS-Ig对同种混合细胞培养反应的影响。结果 ELISA法检测证明将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,获得瞬时表达及稳定表达,mICOS-Ig可抑制单向混合淋巴细胞反应,抑制率达40％,其效应呈剂量依赖性。结论 获得了稳定表达mICOS-Ig融合蛋白的小鼠DC,mICOS-Ig表达产物对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用。

反复自然流产的免疫流行病学研究(摘要)

分析反复自然流产（ＲＳＡ）的免疫病因组成。方法用间接血凝法检测ＡＢＯ血型抗体，用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法检测透明带抗体，用ＥＬＩＳＡ法检测磷脂抗体，以单向混合淋巴细胞反应封闭试验检测封闭效率，通过补体依赖性细胞毒试验测定细胞毒指数，通过单向混合淋巴细胞反应封闭抑制试验分析封闭抗体的抗独特型抗体，利用流式细胞仪分析封闭抗体对ＣＤ抗原的作用。以正常生育组为对照，回顾性分析了１２９例原发性ＲＳＡ及１６例继发性ＲＳＡ的免疫病因构成。结果在ＲＳＡ病因组成中，封闭抗体缺乏占３１．７％，透明带自身抗体占２０．４％，磷脂抗体占１２．５％，ＡＢＯ血型抗体占１１．５％；在原发性流产病因组成中，封闭抗体缺乏占３１．４％，透明带自身抗体占２０．４％，磷脂抗体占８．５％，ＡＢＯ血型抗体占８．４％；在继发性流产中，封闭抗体独特型－抗独型网络失调占３９．４％，磷脂抗体占３１．４％，ＡＢＯ血型抗体占２２．４％。结论根据ＲＳＡ免疫流行病学分析，ＲＳＡ的病因可以分类为：母－胎免疫识别低下型、母－胎免疫识别过度型及母－胎免疫识别紊乱型。

用医学序贯试验方法评价降糖口服液的疗效

糖尿病是一种常见的内分泌代谢紊乱性疾病,目前国内外致力于对糖尿病疗效食品的研究。本研究报告的是,以数种天然食物为原料,取其营养及降血糖有效成份,依据正交试验确定各原料量配比,科学配制而成的一种甜味饮品即降糖口服液(简称降糖液),用医学序贯试验方法评价该降糖液对四氧嘧啶糖尿病兔的降糖效果。一、试验材料正常家兔(大耳白),共12只,雄7只,雌5只,平均体重2.25Kg,饲养2周后供试验用。二、试验方法开放型单向质反应序贯试验。

未成熟树突状细胞诱导大鼠免疫低反应性

目的观察供者来源的未成熟树突状细胞(imDCs)联合骨髓移植(BMT)对大鼠移植肾的保护作用,并探讨其机制。方法DA(RT1a)大鼠为供者,Lewis(RT1l)大鼠为受者,Wistar大鼠为无关第三品系。将实验动物随机分为5组,每组8只,进行不同的预处理后进行肾移植。(1)阴性对照组:受者不接受任何预处理;(2)imDCs诱导组:受者术前7d经尾静脉注射经60Co照射(30 Gy)灭活的、供者来源的未成熟树突状细胞2×107/只;(3)BMT诱导组:受者术前4 d经尾静脉注射供者来源的新鲜骨髓细胞2×108/只;(4)imDCs+BMT联合诱导组:受者术前7 d经尾静脉注射经60Co照射(30 Gy)灭活的、供者来源的未成熟树突状细胞2×107/只,术前4 d经尾静脉注射供者来源的新鲜骨髓细胞2×108/只;(5)第三品系组:预处理与imDCs+BMT联合诱导组相同,但供者肾脏来自Wistar大鼠。术后进行单向混合淋巴细胞反应(MLR);白细胞介素2(IL-2)逆转实验;体内细胞转移实验(DTH);流式细胞仪检测RT1a阳性细胞百分率。结果各组大鼠肾移植后平均存活时间分别为:阴性对照组(7.12±1.25)d;imDCs诱导组(24.38±3.20)d;BMT诱导组(7.87±2.10)d;第三品系组(6.63±1.06)d;而imDCs+BMT联合诱导组延长到(80.75±16.88)d;后者与上述4组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。免疫耐受的大鼠脾细胞增殖?

人嗅鞘细胞的免疫学特性研究

目的探讨人嗅鞘细胞的免疫学特征。方法应用流式细胞仪分析人嗅鞘细胞的相应标记抗原的阳性表达率,用单向混合淋巴细胞反应测定人嗅鞘细胞的组织相容性和免疫耐受性,并与骨髓间充质干细胞对比。结果人嗅鞘细胞与骨髓间充质干细胞表面与移植免疫排斥发生密切相关的标志:HLADR、B71(CD80)、B72(CD86)、CD40和CD40L均为阴性。单向混合淋巴细胞反应显示人嗅鞘细胞、骨髓间充质干细胞均对混合淋巴细胞反应无明显的刺激作用。结论人嗅鞘细胞可能是一种免疫缺陷细胞,在体外有诱导细胞移植免疫耐受性的作用。

母—胎免疫识别低下型反复自然流产供者及配偶白细胞免疫治疗

据《中华妇产科杂志》1998年10月33卷第10期报道 上海医科大学妇产科研究所生殖免疫室李大金等,为比较供者及配偶白细胞免疫疗法治疗母—胎免疫识别低下型反复自然流产(RSA)的临床疗效,将40例封闭抗体缺乏的RSA患者随机分成两组,分别采用供者白细胞与配偶白细胞进行免疫治疗。