微波—免疫单向扩散法快速测定免疫球蛋白

单向扩散平板法(简称常规法)于1965年由Mancini提出,至目前仍然是最常用、最简易的免疫球蛋白定量技术。由于常规方法需24—48小时才能回报结果,远不能满足如今高时效的要求。我们将微波技术与单向扩散法结合起来,确立了一种快速测定免疫球蛋白的方法(简称快速法)。 1 材料 1.1 质控血清制备:取20份体检正常人血清混匀后,3000转/分,离心5分钟,取上清1:4生理盐水稀释,常规法测定20次,取均值。 1.2 琼脂平板及标准曲线制备:实验室可以根据有关资料自制。

琼脂糖单向扩散法测定Cu(Ⅱ)

琼脂糖是一种半固体基质,加热到60℃以上成为流动态,冷却则变为固体凝胶。它能起支架作用,允许可溶性物质在其间自由扩散。

单向放射免疫扩散法测定流感灭活疫苗血凝素含量的研究

为改进流感灭活疫苗血凝素含量的测定方法 ,将待测样品经去污剂处理后 ,用WHO标准品作对照进行免疫扩散测定 10个流感灭活疫苗样品血凝素含量。在血凝效价相同的情况下 ,疫苗中三价 (A1,A3,B)血凝素含量存在不同程度的差异。可见 ,单向放射免疫扩散法较血球凝集法更适用于流感灭活疫苗血凝素含量的测定。

应用单向放射免疫扩散法测定流感疫苗血凝素含量的研究

分析了单向放射免疫扩散法快速、准确测定流感疫苗血凝素含量的可行性。利用在打孔器孔径一定的条件下抗原浓度只与扩散圈直径的平方成线性关系,而与打孔器无关,测定流感疫苗血凝素含量。结果可见,流感疫苗3个型别血凝素扩散圈直径的平方均与其浓度成线性,r均大于0.99,变异系数均小于1%,平均回收率99.7%。单向放射免疫扩散法方法简便、快速、准确,适用于流感疫苗血凝素含量的测定。

单向免疫扩散法测定人血清载脂蛋白B含量及临床应用

本文报道用自制低密度脂蛋白免疫家兔,制得载脂蛋白B(ApoB)抗血清,并采用单向免疫扩散法测定了83例正常人血清ApoB值为:59.2±17.9mg/dl;83例高脂血症病人ApoB值为:93.5±20.1mg/dl。两组比较有高度显著性差异(P<0.01)。本法具有标准曲线线性好,重复性强及操作简便的特点。

单向免疫扩散法测定纤维连接蛋白

纤维结合蛋白(Fibronectin,Fn)是一种高分子糖蛋白,广泛存在于细胞表面、细胞间质、血浆及其它体液,具有多种生物学功能。Fn 含量变化与多种疾病相关,测定Fn 含量对很多疾病的诊断、病程与疗效监测等具有重要意义。现在国内测定 Fn 含量的方法主要有火箭电泳法、酶联免疫法、红细胞凝集法等。

血浆载脂蛋白A-1的灵敏检测法——脱脂单向免疫扩散法

我们用脱脂单向免疫扩散、不脱脂单向免疫扩散、火箭电泳法、透射比浊法对60例正常人、79例非胰岛素依赖型糖尿病患者和39例冠心病患者同时进行了血浆载脂蛋白A-1水平的测定。脱脂单向免疫扩散所测正常人群载脂蛋白A-1水平152.58±18.51mg/dl非常显著高于其它三种方法,并且脱脂后载脂蛋白A-1水平在三组人群中的差别最为显著,结果表明,脱脂单向免疫扩散检测血浆载脂蛋白A-1水平在糖尿病、冠心病方面较优越。

妊娠特异性β1糖蛋白单向免疫扩散法测定的临床应用

妊娠特异性β1糖蛋白（SP1）是由胎盘合体细胞分泌的一种特异性蛋白质,测定 SP1,含量是检查胎盘功能及判定胎儿预后的一项指标。自1987年12月至1989年12月,我们应用单向免疫扩散法对198例孕妇进行了血清 Sp1测定,其结果报告如下。

单向免疫扩散法测Ig标准曲线制作方法新探

单向免疫扩散法测定 Ig 是临床常规项目之一,其标准曲线制作目前临床上多用 y=a+bx、y=a+bx2或 y=10a+bx运算作图,其中 y 为 Ig 含量,x 为沉淀环直径。然而经我们实践,上述三种函数关系并不最精确地反映 Ig 含量和沉淀环直径之间的关系。我们提出新的数学模型,为临床检验和科研提供更为精确的手段。1

单向免疫扩散法测定人血清Apo AⅡ水平

我们在国内初次建立了测定人血清载脂蛋白AⅡ的单向免疫扩散法,该法具有简便、精确、重复性好的优点。批内变异4.1%,批间变异6.7%。20~59岁正常血脂的男性Apo AⅡ水平为35.5±6.4mg/dl;20~49岁正常血脂的女性Apo AⅡ水平为34.2±4.6mg/dl。Apo AⅡ水平与HDL-ch,HDL-ch正相关,而与HDL-ch无相关。

琼脂单向免疫扩散法在洗涤剂污染血痕检材中的应用

在血痕种属检验中,通常采用较为灵敏和快速的环状沉锭法。当遇有被肥皂、洗衣粉等污染的血痕检材时则往往得不到正确结果。我们采用琼脂单向免疫扩散法对常见洗涤剂污染的血痕检材进行实验,取得了满意的结果。 1 器材与试剂 (1)人血样品(医院血库提供)。 (2)抗人血红蛋白血清(华西医科大学法医系提供,效价:1∶10000)。 (3)琼脂糖,1.5％和5％的肥皂液,1.5％和5％伪洗衣粉液,1.5％和5％的餐具洗洁精液(以上液体均用自来水配制而成)。 (4)加热磁性搅拌器、冰箱、培养皿。 2

溶菌酶抗血清的制备及其单向琼脂扩散检测方法的实验研究

溶菌酶(Lysozyme)是由129个氨基酸组成的15kD单链蛋白质,广泛存在于各种物种的组织、细胞及体液中,是机体抗感染免疫中的重要因素之一。故测定其含量或活性已被广泛地应用于了解机体的防御机能,用作相关疾病的诊断和鉴别诊断,空气、水质的污染指标,也用作流行病学的调查等方面。目前用于测定溶菌酶的方法有酶学方法和免疫学方法两大类。酶学方法主要有平皿法。

用扫描仪检测的单向免疫扩散法

成都生物制品研究所苗松等,对用扫描仪检测的单向免疫扩散法进行了试验。首先将琼脂凝胶置水浴中加热融化,在56℃～60℃条件下,加入适量羊抗人IgG血清轻轻摇均,倒板,凝固后打孔。

铝吸附流感疫苗中血凝素含量检测方法的建立

目的建立铝吸附流感疫苗中血凝素(HA)含量的检测方法。方法选用不同的解离液,在不同的条件下对铝吸附疫苗进行解离,以单向免疫扩散法(SRID)检测血凝素含量,比较回收效果,并对选取的解离方法进行初步验证。结果经解离液A处理后,测定HA的回收率为71%～80%,而解离液B的回收率在96%～110%之间。对不同温度、作用时间等考察,最终确定以解离液B在室温解离2h后进行检测。该方法试验内和试验间变异系数均小于20%。结论采用解吸附结合传统SRD方法测定铝吸附流感疫苗中HA含量,重复性好,准确度高,可代替动物接种法。

比浊免疫法测定血清C-反应蛋白的评价

目的:评价C-反应蛋白(CRP)比浊免疫法试剂盒的性能。方法:利用此方法对CRP试剂进行重复性、线性测试以及与单向免疫扩散法进行比较。结果:线性范围可达0.33～42mg/L;当样品中CRP超过42mg/L时,应该稀释后重新检测,批间CV<5%,与单向免疫扩散法比较γ=0.976。结论:该试剂具有方便、快速、准确、微量等特点,适用于自动化分析。

火箭免疫电泳法测定人血浆纤溶酶原含量及其临床应用

血浆纤溶酶原(Plg)是体内纤溶系统的基质,正确定量测定Plg含量,有助于判断体内的纤溶状态。目前国内外定量测定Plg含量的方法大都是放射免疫法、ELISA法、单向免疫扩散法等。本文采用火箭免疫电泳法测定Plg含量,效果满意,现报告如下。

四价流感病毒裂解疫苗B型血凝素含量的检测方法

目的：建立能准确测定四价流感病毒裂解疫苗中B型血凝素含量（单向免疫扩散法，SRD）的检测方法。方法采用双价抗原参考品SRD法对四价流感病毒裂解疫苗中两种B型血凝素含量进行测定。将B1与B2抗原参考品按质量浓度1∶1混合制备为双价抗原参考品，双价抗原和待检样品与10％裂解剂按9∶1比例裂解30min，分别加入到含有抗血清参考品的1．5％琼脂糖凝胶板上，每孔10μL，置20～25℃放置18～24h，经干燥、染色、脱色，测量结果。验证双价抗原SRD法的重复性和准确性。结果双价抗原SRD法测定的血凝素含量平均值比单价抗原SRD法更接近理论配制值，故双价抗原SRD法比单价抗原SRD法能更能准确检测QIV中两种B型血凝素含量，经验证双价抗原SRD法的重复性及准确性良好。结论双价抗原SRD法提高了四价流感病毒裂解疫苗B型血凝素含量检测的准确性，为精确测定四价流感病毒裂解疫苗中B型血凝素含量提供了有效的方法和数据支持。

应用Vitatron ISp-M半自动生化分析仪作IgG免疫比浊法测定

目前免疫球蛋白(IgG)的测定,普遍采用的是单向免疫扩散法或火箭免疫电泳,不仅操作费时、而且误差较大、准确性差。作者近来借鉴有关资料、应用Vitatron ISP-M半自动生化分析仪作免疫球蛋白IgG的免疫比浊法测定,且操作简易迅速、准确性好等优点、取得了较为满意的结果。现介绍如下。