单宁酸-氯化铁法媒染肺内微血管及细胞的组织学观察

目的 光镜下观察大鼠肺微血管及肺组织细胞。方法 应用单宁酸 氯化铁法 (TA Fe法 )灌流固定大鼠 ,取肺做冰冻切片 ,氯化铁显色 ,光镜下观察。结果 肺内小血管、微血管蜿蜒走行 ,被切成各种断面 ,管壁平滑肌细胞、内皮细胞显示清晰 ,有一定立体感 ;接近被膜的微动脉形成较粗的毛细血管 ,肺泡间毛细血管不易分辨 ,肺间质内有微血管和毛细血管分布 ,微血管周围的肺组织亦被媒染。结论 TA Fe法即可显示肺内微血管 ,又能保存组织细胞结构 ,肺内小动脉和微动脉管壁的平滑肌参与微循环的主动调节机制。

单宁酸-氯化铁法筛选长爪沙鼠脑底动脉环变异

长爪沙鼠缺少联系大脑后动脉和基底动脉的后交通动脉，双侧颈总动脉短暂性闭塞时，前脑缺乏来自于椎动脉的重要血液代偿，用简单的结扎单侧或双侧颈总动脉的方法即可获得比大鼠、小鼠更加典型的前脑缺血动物模型，因此在脑缺血损伤机制及药物评价方面被国内外广泛应用。但也有研究表明，长爪沙鼠可能存在联系基底动脉和颈内动脉的后交通动脉。本实验通过血管铸型法观察长爪沙鼠后交通动脉的存在情况；

应用单宁酸-氯化铁法筛选长爪沙鼠脑底动脉Willis环变异

背景:以往曾采用阳性体征来判断长爪沙鼠脑缺血的有无,但存在人为影响因素较大、指标不严谨等缺点。单宁酸-氯化铁法媒染微血管效果可靠,方法简捷易行,重复性好,有可能从血管角度筛选以克服上述缺点。目的:探索一种简便、可靠的筛选长爪沙鼠脑底Willis环变异的方法。方法:根据Kirino法制作长爪沙鼠前脑缺血模型,激光多普勒血流仪监测脑组织血流量,单宁酸-氯化铁法显示脑组织微血管。结果与结论:夹闭双侧颈总动脉后,多普勒监测到前脑仍存在血流量的长爪沙鼠,经单宁酸-氯化铁染色证实均存在Willis环变异。研究表明应用单宁酸-氯化铁法显示微血管,可简便、可靠地筛选出脑底Willis环变异的长爪沙鼠。

改进TA-Fe法显示大鼠肾血管和肾小管的研究

目的光镜下观察改进单宁酸-氯化铁法(TA-Fe法)媒染肾微血管和肾小管的效果。方法经TA-Fe法媒染的大鼠肾的两组冰冻切片,一组切片用TA-Fe法,湿片拍照;另一组切片用改进TA-Fe法经脱水、透明、封片,显微摄影。结果两种TA-Fe法均能显示肾微血管和肾小管。改进TA-Fe法使组织结构更清晰,肾血管球毛细血管分叶更明显。肾小囊上皮、毛细血管内皮细胞、足细胞以及球内系膜细胞核亦被良好显示。切片可较长时间保存,但立体感较改进前略差。结论改进后的TA-Fe法显示肾微血管和肾血管效果更好,适合做回顾性研究。

TA-Fe法媒染胶原纤维及其在临床病理诊断中的应用

近百年的实验研究证实，单宁酸与生物体中的多种物质具有亲和性，可增强糖蛋白、神经递质以及细胞膜结构的染色效果。近年来，孔祥玉等又用单宁酸-氯化铁法（TA-Fe法）成功地媒染出实验动物多种器官组织的微血管，创建了一种研究微血管构筑的新方法，这种方法在医学领域中有不断扩大应用的趋势。

黄芩茎叶总黄酮对脑缺血再灌注大脑皮质微血管和氧化应激的预防保护作用

目的探讨黄芩茎叶总黄酮(SSTF)对缺血再灌注大鼠大脑皮质微血管损伤和氧化应激的预防保护作用。方法随机将60只SD大鼠分为假手术对照组(sham组)、缺血再灌注模型组(IR组)、SSTF预处理组(SSTF组)和尼莫地平阳性对照组(NIM组)。术前1周SSTF组和NIM组分别灌胃给SSTF 100 mg/(kg·d)、尼莫地平10 mg/(kg·d),共7 d。线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型,术后进行神经行为学评分,单宁酸-氯化铁法观测缺血区大脑微血管密度(MVD)和微血管面积比(MVA),光镜观察大脑皮质病理变化,检测SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化。结果 IR组神经功能缺损评分显著增高,MVD、MVA减少,神经元缺失、肿胀,SOD、GSH-Px活性明显降低,MDA量增加;SSTF组、NIM组神经功能评分比IR组明显降低(P<0.001),MVD、MVA增加(P<0.001),神经元和胶质细胞损伤减轻,SOD、GSH-Px活性增高,MDA含量降低(P<0.001);SSTF组与NIM组的组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SSTF预处理可通过增加大脑皮质微血管再通和相关酶的活性,减轻脑水肿和神经元损伤,预防性保护大脑组织。

成年大鼠脊髓损伤后损伤区血管变化及其与星形胶质细胞的关系

目的研究成年大鼠脊髓损伤后损伤区内血管的变化及其与星形胶质细胞的关系。方法通过单宁酸一氯化铁灌注,结合形态学与免疫组织化学方法,观察正常大鼠脊髓以及挤压损伤后0 h、24 h、72 h、1周、2周、4周时的血管形态及其与星形胶质细胞的关系。结果正常脊髓血管形态清晰,可见胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫反应阳性细胞突起附着于血管壁上;脊髓损伤后0 h损伤区血管连续性中断,未见GFAP免疫反应阳性细胞;72 h时损伤区出现血管;1周时损伤区内血管数目较多,可见GFAP免疫反应阳性细胞:2周时损伤区空洞形成,周围可见少量GFAP免疫反应阳性细胞附着于血管;4周时损伤区内围绕空洞的血管交错排列,与GFAP免疫反应阳性细胞突起形成广泛关联。结论脊髓损伤后72 h内推测是治疗脊髓损伤后损伤区组织缺血的有效时间窗,损伤后星形胶质细胞参与了血管结构的恢复。