重型肝炎单核细胞培养上清和血浆TNF α含量的检测

同时检测重肝单核细胞（Ｍｏ）培养上清和血将ＴＮＦα含量，并探讨与内毒素血症的关系，以期为重肝发病机理提供新的实验依据。

不同置换量血液滤过对脓毒症患者Toll样受体表达的影响

目的前瞻性的研究不同置换量血液滤过对严重脓毒症患者外周血单核细胞Toll样受体表达及其内在功能的影响。方法对2006年3月至2009年2月入住绍兴市人民医院ICU符合纳入标准的严重脓毒症患者30例，在脓毒症集束化治疗策略的基础上联合血液滤过治疗，并随机分为高通量血液滤过组（HVHF）（置换量4L／h，15例）与常规通量血液滤过组（置换量2L／h，15例）。①血液滤过治疗0h，6h，12h，24h，48h各时相点，分离外周血单核细胞，采用半定量RT-PCR法和流式细胞仪榆测单核细胞表面Toll样受体-4（TLR4）和Toll样受体-2（TLR4）mRNA和蛋白表达变化。②血液滤过治疗24h后分离患者外周血单核细胞于休外培养，以内毒素（LPS）刺激，在6h，12h，24h，48h各时相点检测单核细胞表面TLR4和TLR2受体mRNA和蛋白的变化，及ELISA法检测单核细胞培养液肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白介素-6（IL-6），白介素-8（IL-8）细胞因子水平。统计学方法：对计量资料采用均数±标准差描述，采用t检验或Oneway ANOVA分析。结果高通量血液滤过较常规通量可显著下调单核细胞TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达水平（P〈0．05）。不同置换量血滤治疗处理后孵育的单核细胞，其TNF-α，IL-6，IL-8分泌水平各时相点呈现：常规通量组〉高通量组〉正常对照，P〈0．05；TLR4和TLR2 mRNA各时相点表达上调水平。呈现：正常对照〉高通量组〉常规通量组，P〈0．05；其TLR2和TLR4蛋白表达亦呈现mRNA相同趋势，差异无统计学意义。结论高通量血液滤过能改善脓毒症患者单核细胞功能，使部分细胞免疫功能得到恢复，对重建机体免疫内稳状态起一定作用。