NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素8的机制

目的:研究幽门螺杆菌NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌趋化因子单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的机制。方法:利用NapA蛋白处理巨噬细胞,然后使用ELISA法检测上清中MCP-1和IL-8的表达量。使用C29、ST2825、SB203580、SP600125以及PDTC和巨噬细胞预先共孵育1 h,分别抑制Toll样受体2(toll-like receptors 2,TLR2)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核糖核酸酶p蛋白亚基p38(ribonuclease p-protein subunit p38,p38)、应激活化蛋白激酶(c-Jun N-terminal kinase,c-Jun)和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的活性,然后再加入NapA蛋白孵育4 h,收集上清并检查其中MCP-1和IL-8的表达量。结果:NapA蛋白刺激巨噬细胞后,MCP-1和IL-8的表达量明显高于未处理组。利用抑制剂C29抑制TLR2的活性,NapA蛋白诱导的MCP-1和IL-8表达量降低。使用ST2825、PDTC以及SB203580分别抑制MyD88、NF-κB以及p38的活性,能够降低NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8的能力,但是抑制c-Jun不影响NapA蛋白诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。结论:幽门螺杆菌NapA蛋白通过TLR2/MyD88/NF-κB通路诱导巨噬细胞分泌MCP-1和IL-8。

C-C趋化因子受体2阳性外泌体抑制单核细胞浸润改善缺血再灌注后心肌损伤的实验研究

目的探讨C-C趋化因子受体2阳性(CCR2^(+))外泌体调控小鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的作用机制。方法将12只C57小鼠完全随机分为野生型(WT)假手术组、WT手术(IR模型)组、CCR2-外泌体手术组和CCR2^(+)外泌体手术组,其中后3组均构建了心肌IR损伤模型并给予相应处理。超声检测心脏结构及功能;Masson三色特殊染色法检测心脏组织内胶原沉积;转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡;免疫组织化学染色及实时荧光定量聚合酶链反应法检测单核细胞招募相关C-C趋化因子配体2(CCL2)表达以及单核细胞表面CCR2表达;流式细胞术检测心肌IR后梗死部位淋巴细胞抗原6复合体C(Ly6C)和CD_(43)单核细胞数量。结果心肌IR手术后7 d,CCR2^(+)外泌体手术组小鼠心脏纤维化面积小于IR模型组[(16.8±8.1)%比(45.7±3.8)%];射血分数明显低于WT假手术组,但高于IR模型组;小鼠心肌细胞凋亡数量小于IR模型组;小鼠心脏中CCR2蛋白相对表达量小于IR模型组;小鼠再灌注区域CCR2阳性细胞面积小于IR模型组;小鼠再灌注部位Ly6C+的单核细胞数明显低于IR模型组,CD_(43)^(+)的单核细胞数明显高于IR模型组;小鼠心脏中CCL2 mRNA和蛋白相对表达量小于IR模型组(均P<0.05)。结论CCR2^(+)外泌体表现出明显的抗心肌IR损伤的作用,其机制是CCL2表达减少抑制单核细胞浸润,从而减轻了心肌损伤和抑制心力衰竭。

冠心病心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂、不规则趋化因子、单核细胞趋化蛋白-1与心功能、心肌损伤指标相关性分析

目的:探讨冠心病(CHD)心绞痛患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、不规则趋化因子(Fractalkine)与心功能、心肌损伤指标的相关性。方法:选取150例CHD心绞痛患者作为观察组(不稳定型心绞痛患者64例为A组、稳定型心绞痛患者86例为B组),同期收治的164例非CHD患者为C组。比较三组血清Fractalkine、Vaspin、MCP-1水平、心功能指标及心肌损伤指标,相关性采用Pearson相关性分析。结果:A组血清Vaspin水平低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组血清Fractalkine、MCP-1水平高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(FS)低于B组、C组,且与C组比较,B组更低;A组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。A组各心肌损伤指标水平均高于B组、C组,且与C组比较,B组更高(均P<0.05)。Pearson相关性分析:CHD心绞痛患者血清Vaspins水平与LVEF、FS成正比;血清Vaspins水平与LVEDD、LVESD、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEF、FS成反比;血清Fractalkine、MCP-1与LVEDD、LVESD、CK、CK-MB、cTnI、H-FABP成正比(均P<0.05)。结论:随着CHD心绞痛患者病情加重,患者心功能及心肌损伤越严重,且患者血清Vaspins、Fractalkine、MCP-1与患者心功能及心肌损伤具有密切联系,临床可根据其水平变化评估病情进展情况。

前列腺癌相关成纤维细胞通过分泌趋化因子C-C基元配体15促进单核细胞迁移

目的:探究前列腺癌微环境中趋化因子C-C基元配体15(CCL15)的表达、来源以及对单核细胞迁移能力的影响。方法:对正常前列腺组织和前列腺癌组织进行CCL15免疫荧光染色,使用免疫组化和免疫荧光双染实验探究CCL15的主要来源细胞。从新鲜的正常前列腺组织和前列腺癌组织中分离成纤维细胞并进行原代培养,通过实时定量PCR、免疫印迹实验和ELISA实验检测成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、波形蛋白(Vimentin)和CCL15的表达情况。利用慢病毒转染敲低CCL15,探究敲低CCL15后成纤维细胞条件培养基对单核细胞迁移能力的影响。进行多色免疫荧光染色检测前列腺癌组织中CCL15与M2巨噬细胞的位置关系。结果:前列腺癌组织中CCL15的表达明显高于正常组织,且主要来源于表达α-SMA的成纤维细胞。与前列腺正常成纤维细胞(NF)相比,前列腺癌相关成纤维细胞(CAF)分泌CCL15的能力显著增强。敲低CCL15后,前列腺CAF分泌的CCL15明显减少,减弱了单核细胞的迁移能力。在前列腺癌组织中,CCL15高表达区域存在更多M2巨噬细胞。结论:前列腺CAF通过分泌CCL15促进单核细胞迁移,增加前列腺癌微环境中M2巨噬细胞的浸润。

血清核因子-κB、肿瘤坏死因子-α、单核细胞趋化因子-1与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病合并衰弱综合征的关系及预测模型构建

目的分析血清核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)合并衰弱综合征的关系并构建列线图预测模型。方法回顾性分析上海市第一人民医院嘉定分院2021年3月至2023年3月收治的50例老年CHD合并衰弱综合征患者的病例资料,将其设为观察组,采用埃德蒙顿衰弱等级量表(EFS)进行衰弱程度评估,分为轻度、中度、重度三组。另选取同期上海市第一人民医院嘉定分院收治的50例单纯老年CHD患者设为对照组,以及同期进行健康体检的50例老年人设为健康组。比较三组血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平及EFS评分,以及不同衰弱程度组血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平,Pearson法分析血清NF-κB、TNF-α、MCP-1与EFS评分的相关性。采用单因素及多因素logistic回归分析老年CHD合并衰弱综合征的危险因素,通过R软件构建列线图预测模型,以Bootstrap法进行内部验证,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验,受试者工作特征曲线(ROC)对预测模型进行评价。结果观察组患者血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平及EFS评分均高于对照组和健康组(P<0.05)。重度组患者血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平均高于中度组、轻度组(P<0.05)。血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平与EFS评分均呈正相关关系(r=0.409、0.392、0.411,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、抑郁症状、焦虑症状、营养不良、NYHA分级、身体活动量是老年CHD合并衰弱综合征的危险因素(P<0.05)。据此建立的列线图模型预测老年CHD合并衰弱综合征的区分能力较好(C-index=0.912),Hosmer-Lemeshow检验显示其拟合优度良好(χ^(2)=3.068,P=0.412);该预测模型预测老年CHD合并衰弱综合征的曲线下面积为0.915(95%CI 0.823~0.956)。结论老年CHD合并衰弱综合征患者血清NF-κB、TNF-α、MCP-1水平明显增高,且与衰弱严重程度密切相关,三者联合检测可提高对衰弱综合征的诊断效能。衰弱综合征的发生与多种因素有关,临床应针对相应的危险因素及早给予对症处理,以降低衰弱综合征发生风险。

血府逐瘀汤对动脉粥样硬化家兔主动脉组织单核细胞趋化因子-1表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对动脉粥样硬化家兔主动脉组织单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)表达的影响,并探讨血府逐瘀汤抗动脉粥样硬化的机制。方法将24只清洁级日本雄性大耳家兔,随机分为3组,每组8只:空白组给予普通饲料;模型组先给予高胆固醇高脂饲料100 g/d后给予普通饲料;血府逐瘀汤组在模型组喂养的基础上,灌胃给予血府逐瘀汤,每天1次。喂养8周后,采血测定家兔血脂全套(TG、TC、LDL);应用光学显微镜观察兔主动脉切片的病理改变,测定其主动脉粥样硬化斑块灰度及斑块面积;利用免疫组织化学方法测定主动脉MCP-1蛋白的表达。结果主动脉图像分析血府逐瘀汤组家兔胸主动脉斑块灰度及斑块面积分别低于模型组(P<0.01);与空白组及血府逐瘀汤组相比,模型组家兔血清TC,TG,LDL均明显升高(P<0.05)。血府逐瘀汤组家兔血清TC,LDL的水平却明显高于空白组(P<0.01)。模型组家兔动脉粥样硬化家兔主动脉MCP-1蛋白表达平均灰度值明显高于血府逐瘀汤组和空白组(P<0.01)。结论血府逐瘀汤可以降低动脉粥样硬化家兔主动脉的MCP-1蛋白表达水平;血府逐瘀汤抗动脉粥样硬化的机制可能与其降低MCP-1蛋白表达水平有关。

趋化因子CCL2与肺癌的因果关系:两样本孟德尔随机化研究

目的探究趋化因子CCL2(又称单核细胞趋化蛋白1,MCP-1)与肺癌(lung cancer)是否具有因果关系。方法从全基因组关联研究(GWAS)提取趋化因子CCL2和肺癌不同病理分型的遗传数据,使用逆方差加权分析(IVW)作为主要分析,另选用加权中位数法、简单模式法、MR-Egger回归法、加权模式法进行补充分析,并进行敏感性分析验证数据的可靠性。结果趋化因子CCL2对肺腺癌的IVW分析结果OR=1.065,95%CI(0.919~1.234),P=0.401。趋化因子CCL2对肺鳞状细胞癌的IVW分析结果OR=1.059,95%CI(0.931~1.205),P=0.381。趋化因子CCL2对小细胞肺癌的IVW分析结果OR=0.959,95%CI(0.760~1.208),P=0.720。结论趋化因子CCL2与肺癌没有直接因果关系。

趋化因子MCP-1和RANTES与不明原因复发性流产的关系研究

目的 分析不明原因复发性流产(URSA)的危险因素,观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)与URSA的关系。方法 选择70例URSA患者作为URSA组,同期正常妊娠孕妇70例作为正常妊娠组。比较两组的临床资料,包括年龄、孕产次、家族遗传史、吸烟饮酒史、体质量指数(BMI)、从事职业、受教育程度等;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清中的RANTES以及MCP-1水平。分析URSA发生的危险因素;比较两组血清MCP-1、RANTES水平, URSA组中不同胎龄、流产次数患者血清MCP-1、RANTES水平。结果 单因素分析显示, URSA组中年龄≥35岁、BMI≥24 kg/m^(2)、有吸烟史、有饮酒史、受教育程度初中及以下占比分别为62.9%、67.1%、61.4%、57.1%、65.7%,较正常妊娠组的30.0%、27.1%、18.6%、17.1%、37.1%更高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,患者BMI≥24 kg/m^(2)、年龄≥35岁、有吸烟及饮酒史、受教育程度初中及以下是导致URSA的危险因素(OR>1, P<0.05)。URSA组患者血清MCP-1、RANTES水平分别为(127.31±70.12)、(220.98±69.51)ng/L,低于正常妊娠组的(239.20±75.64)、(412.34±82.47)ng/L(P<0.05)。URSA组中,随流产次数增加,血清MCP-1、RANTES水平降低,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。URSA组中,不同胎龄患者的血清MCP-1、RANTES水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMI偏高、年龄偏大以及有吸烟及饮酒史、受教育程度低等因素是导致URSA的危险因素,血清RANTES以及MCP-1异常表达与URSA的发生关系密切。对于URSA患者,妊娠早期及时检测血清中RANTES和MCP-1水平,可能成为URSA胚胎丢失及免疫治疗效果的临床观察指标。

急性脑梗死患者颈动脉粥样斑块稳定性与单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平的关系

目的探讨急性脑梗死患者颈动脉粥样斑块稳定性与单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平的关系。方法选择西安交通大学医学院神经内科2008年1月至2010年12月住院的124例急性脑梗死患者,男性73例,女性51例,年龄41～88(60.8±12.9)岁,健康对照组35例,其中男性21例,女性14例,年龄42～79(59.3±12.1)岁。采用彩色多普勒超声仪测量颈动脉内中膜厚度及斑块类型,颅脑CT检查计数颅内分布区的梗死病灶。脑梗死患者分为颈动脉正常组(n=26)、稳定型斑块组(n=38)、不稳定型斑块组(n=60)。用酶联免疫法测定单核细胞趋化因子4,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测膜联蛋白A1基因的mRNA表达水平,免疫组化法测膜联蛋白A1的表达,Western blot检测膜联蛋白A1蛋白质表达水平。对检查结果进行比较。结果①颈动脉正常组、稳定型斑块组、不稳定型斑块组的颈内动脉分布区病灶数、颈动脉内中膜厚度差异显著(F=21.36、24.5,P<0.05);②健康对照组、颈动脉正常组、稳定型斑块组和不稳定型斑块组单核细胞趋化因子4的含量比较差异显著(F=19.8,P<0.05);不稳定型斑块组颈动脉粥样斑块组织膜联蛋白A1的mRNA、蛋白表达水平、蛋白表达率明显少于稳定型斑块组(t=2.19、2.876,χ2=9.23,P<0.05)。结论单核细胞趋化因子4、膜联蛋白A1水平与颈动脉粥样斑块不稳定性密切相关,并参与了急性脑梗死的发生。

米非司酮联合左炔诺孕酮宫内缓释系统对子宫肌瘤患者单核细胞趋化因子-1水平的影响

目的探讨米非司酮联合左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)对子宫肌瘤患者单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达水平的影响。方法选取医院2018年9月至2020年6月收治的子宫肌瘤患者154例,按随机数字表法将患者分为宫内缓释组与联合治疗组,各77例。两组患者均采用LNG-IUS治疗,联合治疗组患者加用米非司酮治疗,均持续治疗6个月。结果与宫内缓释组相比,联合治疗组患者的子宫内膜厚度、子宫体积及肌瘤体积均显著缩小,雌二醇、孕激素、促卵泡生成素、血管内皮生长因子、MCP-1水平,以及视觉模拟评分法(VAS)评分均显著降低,血红蛋白水平显著升高(P<0.05);联合治疗组的总有效率为97.40%,显著高于宫内缓释组的88.31%(P<0.05);宫内缓释组与联合治疗组的不良反应发生率相当(6.49%比7.79%,P>0.05)。结论米非司酮联合LNG-IUS治疗子宫肌瘤疗效较好,能有效改善临床症状、缓解病情,并有效抑制病情进展,降低MCP-1的表达水平,改善预后,且安全性较高。

冠心病心绞痛患者血浆白细胞介素-6和单核细胞趋化因子-1变化及其临床意义

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在冠心病心绞痛发病机制中的作用。方法选择冠状动脉造影确诊的心绞痛患者70例,包括稳定型心绞痛(SAP)组36例,不稳定型心绞痛(UAP)组34例,另选择30例冠状动脉造影正常者作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血浆IL-6、MCP-1水平。结果 UAP组血浆IL-6、MCP-1水平为(18.12±2.62)pg/L、(25.63±4.76)pg/L,显著高于SAP组的(14.98±2.54)pg/L、(21.78±4.53)pg/L(P<0.01),UAP组、SAP组均高于对照组(11.68±2.51)pg/L、(15.71±4.34)pg/L(P<0.01)。结论血浆IL-6与MCP-1在冠心病患者中显著升高,在反映冠状动脉斑块稳定性及冠状动脉病变的严重程度方面有重要的临床意义。

冠状动脉介入治疗对冠心病血浆超敏C反应蛋白和单核细胞趋化因子-1水平的影响

目的通过测定冠心病病人行冠状动脉介入治疗前后血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)水平的改变,探讨冠状动脉介入治疗对冠心病病人炎症指标及术后再狭窄的影响。方法连续入选经冠状动脉介入治疗单支病变的冠心病病人80例,40例经冠状动脉造影证实冠状动脉正常的人作为对照组。分别采用免疫浊度法和酶联免疫吸附法检测入选病人冠状动脉介入治疗前后hs-CRP和MCP-1水平。结果(1)冠状动脉介入组病人术后血浆hs-CRP为(2.37±0.56)μg/L,显著高于术前的(1.59±0.41)μg/L(P<0.01),而对照组冠状动脉造影术后hs-CRP为(1.18±0.37)μg/L与术前的(1.13±0.32)μg/L相比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)冠状动脉介入组病人术后血浆MCP-1为(26.04±5.43)pg/L,显著高于术前的(18.07±4.30)pg/L(P<0.01),而对照组冠脉造影术后MCP-1为(9.80±2.64)pg/L,与术前的(9.63±2.52)pg/L相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论冠脉介入治疗促进冠心病病人血浆hs-CRP及MCP-1水平的升高,是否为冠脉介入治疗术后支架内再狭窄的重要机制之一尚待进一步考证。

胸腺肽α1和α干扰素对新生儿和成人单核细胞分泌三种C-C趋化因子的调节作用

目的 :观察胸腺肽α1(Tα1)和α干扰素 (IFNα)对健康新生儿和成人单核细胞分泌三种C -C趋化因子的调节作用 ,探讨二者用于阻断艾滋病病毒 (HIV)母婴传播的可能性及其机制。方法 :Ficoll密度梯度离心、贴附法分离健康新生儿和成人单核细胞 ,FITCmAbCD14鉴定 ,与 1μg/ml的Tα1和 /或 5 0 0U/ml的IFNα共培养 3d后 ,ELISA法分别检测培养上清中的正常T细胞表达和分泌因子 (RANTES)、巨噬细胞炎症蛋白 1α(MIP - 1)和MIP - 1β。结果 :14例健康新生儿和 17例正常成年人单核细胞分泌RANTES、MIP - 1α、MIP -1β的浓度分别为 310± 90、2 310± 6 70、182 0± 75 0和 75 0± 2 10、2 5 80± 12 80、1910± 4 6 0 pg/ml。Tα1和 /或IFNα可明显上调单核细胞分泌的RANTES ,二者联用并有协同作用 ;MIP - 1α可被Tα1调高 ,新生儿单核细胞的MIP - 1β可被IFNα调高。上述处理对新生儿单核细胞的调节作用比对成人更明显。结论 :新生儿单核细胞分泌RANTES和MIP - 1α的能力明显低于成人。Tα1和 /或IFNα能上调新生儿和成人单核细胞分泌的三种C -C趋化因子 ,有可能降低新生儿单核细胞对HIV感染的易感性。

平滑肌细胞源性趋化因子所致单核细胞迁移的钙依赖性研究

本文以培养的兔主动脉平滑肌细胞条件培养基作为趋化因子的来源，用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室微孔滤膜法进行单核细胞的迁移试验，并观察戊脉胺和细胞外Ｃａ２＋对其影响。用Ｆｕｒａ－２检测单核细胞胞液游离钙浓度，并观察上述条件培养基及戊脉胺对其影响。结果表明，该条件培养基对单核细胞有明显趋化作用并被戊脉胺所抑制；它也能明显地升高单核细胞胞液游离钙浓度，并被戊脉胺所抑制。细胞外Ｃａ２＋也能影响单核细胞的迁移。以上结果提示，单核细胞迁移对细胞内、外Ｃａ２＋均有依赖性。

单核细胞趋化因子-1对小鼠3T3-L1脂肪细胞B族Ⅰ型清道夫受体表达的影响

目的:观察单核细胞趋化因子-1(MCP-1)对小鼠3T3-L1脂肪细胞B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BI)膜蛋白表达的影响。方法:3T3-L1前脂肪细胞应用"鸡尾酒"法:0.5 mmol/L 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、1 umol/L地塞米松和10 mg/L胰岛素诱导分化成熟,油红O染色法鉴定;将诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞应用MCP-1按照不同浓度及时间进行干预,分为浓度梯度组:分别加入MCP-1 0 ng/mL、20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL,各作用48 h;时间梯度组:分别加入MCP-1 40ng/mL各作用0 h、24 h、48 h、72 h。流式细胞仪分别测定各组细胞表面SR-BI表达。结果:(1)3T3-L1前脂肪细胞诱导分化至第9～10 d,油红O染色示90%以上可见明显脂滴,分化为成熟脂肪细胞。(2)流式细胞仪浓度梯度组结果示:与MCP-1 0 ng/mL组相比,20 ng/mL、40 ng/mL、80 ng/mL组细胞表面SR-BI表达均下降,差异均有统计学意义(P均<0.01);流式细胞仪时间梯度组结果示:与MCP-10h组相比,48 h和72 h组细胞表面SR-BI表达亦均下降,差异亦均有统计学意义(P均<0.01)。结论:MCP-1干预3T3-L1脂肪细胞后,SR-BI细胞表面SR-BI的表达呈浓度依赖性和时间依赖性减少,MCP-1抑制3T3-L1脂肪细胞SR-BI细胞表面SR-BI的表达。

单核细胞趋化因子1和Fractalkine对平滑肌细胞增殖、趋化和组织因子表达的影响

目的观察趋化因子单核细胞趋化因子1和Fractalkine对血管平滑肌细胞组织因子表达及血管平滑肌细胞增殖和趋化的影响。方法在细胞水平,采用酶联免疫吸附法检测单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对组织因子抗原表达的影响,噻唑蓝法比较单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞增殖的作用,细胞趋化实验比较单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞趋化的影响。结果单核细胞趋化因子1和Fractalkine可增加血管平滑肌细胞组织因子抗原的表达,单核细胞趋化因子1与Fractalkine共同作用后,组织因子抗原表达量较二者单独作用时明显降低。Fractalkine对血管平滑肌细胞有明显的促增殖作用,但单核细胞趋化因子1+Fractalkine和单核细胞趋化因子1均无明显促增殖作用。Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞有明显的趋化作用,而单核细胞趋化因子1的趋化作用不够明显。结论单核细胞趋化因子1和Fractalkine在动脉粥样硬化过程中分别对血管平滑肌细胞组织因子的表达、增殖和趋化发挥了不同程度的作用。

沥水调脂胶囊对轻度修饰低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化因子1及内皮细胞P选择素表达的影响

探讨健脾祛痰化瘀方药 (沥水调脂胶囊 )含药血清对轻度修饰低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞表达单核细胞趋化因子 1及内皮细胞表达P选择素的影响。用细胞酶联免疫法测定内皮细胞P选择素的表达 ,酶联免疫法测定培养血管平滑肌细胞上清液中单核细胞趋化因子 1的含量。结果发现 ,2 0 %沥水调脂胶囊除蛋白含药血清组对轻度修饰低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化因子 1表达的升高具有一定的抑制作用。10 %含药血清组对轻度修饰低密度脂蛋白诱导的内皮细胞表达P选择素已具有抑制作用 ,当含药血清浓度达 2 0 %时其抑制作用更为明显。由此可见 ,通过抑制细胞炎性因子单核细胞趋化因子 1和血小板活化因子P选择素 ,减轻血管炎性反应和血栓形成 ,是健脾祛痰化瘀方药沥水调脂胶囊抗氧化损伤。

阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征患者血浆肿瘤坏死因子-α和单核细胞趋化因子-1水平的影响

目的探讨阿托伐他汀对急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响。方法采用ELISA法检测60例ACS患者服用阿托伐他汀前后血浆TNF-α及MCP-1水平,并与健康对照组(n=30)进行比较。结果 ACS组血浆TNF-α、MCP-1水平显著高于健康对照组(P<0.01);服用阿托伐他汀4周后血浆TNF-α及MCP-1水平下降(P<0.01)。结论 ACS患者血浆TNF-α及MCP-1水平升高与冠状动脉炎性反应相关,阿托伐他汀可显著降低ACS患者血浆TNF-α及MCP-1水平,改善冠心病患者的预后。

小鼠杏仁核脑区(CeA)中单核细胞趋化因子(MCP-1)及其受体CCR2在慢性炎症性疼痛过程中的作用

目的观察完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)诱导的小鼠慢性炎症性疼痛模型中,单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CCR2在杏仁核脑区(the central nucleus of the amygdala,CeA)中的表达变化以及细胞定位情况。方法足底皮下注射CFA 20μL,制作慢性炎症性疼痛模型,用行为学方法检测小鼠的机械性刺激缩爪阈值和热刺激缩爪潜伏期的变化;用real-time PCR法检测造模后不同时间点CeA中MCP-1/CCR2mRNA的表达变化;用Western blot法检测造模后不同时间点CeA中CCR2蛋白的表达变化;选择CFA 7天组,用免疫荧光染色来观察CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达情况,并用双标染色来定位表达MCP-1/CCR2的细胞类型。结果造模1h后小鼠同侧后爪机械性缩爪阈值和热缩爪潜伏期显著降低(P<0.001),并能维持7天以上;造模1天后,CeA中MCP-1mRNA表达量增加(P<0.05),7天达高峰(P<0.01),一直持续到14天(P<0.05);CCR2mRNA从造模6h起表达增加(P<0.05);Western blot结果显示CeA中CCR2蛋白在造模后各个时间点均有表达上调,7天达高峰(P<0.01),一直持续到14天(P<0.01);免疫荧光染色显示,CFA 7天组CeA中MCP-1/CCR2蛋白的表达与生理盐水对照组相比均有增加,而且荧光双标染色显示MCP-1/CCR2蛋白主要与神经元核标记物(NeuN)共标。结论足底皮下注射CFA能诱导小鼠产生机械性触诱发痛和热痛觉过敏,CeA中MCP-1/CCR2mRNA和蛋白表达均增加,且均在神经元表达,提示该部位表达增加的MCP-1/CCR2可能参与炎症性疼痛的维持过程。

糖皮质激素联合环磷酰胺对人脐静脉内皮细胞增殖及其细胞间黏附分子-1和单核细胞趋化因子-1表达水平的影响

目的:探讨地塞米松、环磷酰胺对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及其细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)基因表达的影响。方法:对培养的人脐静脉内皮细胞,在不同时间以不同药物浓度分别加入地塞米松和环磷酰胺进行干预。以MTT法检测药物对脐静脉内皮细胞增殖的影响。计算两种药物的半数抑制浓度(IC50)。以地塞米松和环磷酰胺半数抑制浓度分别及联合作用人脐静脉内皮细胞48h,以RT-PCR的方法比较3组间人脐静脉内皮细胞ICAM-1和MCP-1的mRNA表达差异。结果:地塞米松、环磷酰胺均呈时间、剂量依赖性地抑制HUVECs的增殖,地塞米松和环磷酰胺IC50分别为0.74、1.87mg/mL。地塞米松与环磷酰胺分别及联合孵育下,人脐静脉内皮细胞ICAM-1和MCP-1mRNA表达水平较对照组显著下降(P<0.05),且联合作用组显著低于单个药物组(P<0.05)。结论:糖皮质激素和环磷酰胺抑制血管内皮细胞增生,并抑制血管内皮细胞ICAM-1和MCP-1mRNA表达,从而对血管起到保护作用并可能为临床治疗血管炎提供理论支持。