造血干细胞移植受者外周血中单核细胞趋化蛋白2水平变化与急性移植物抗宿主病发生相关性探讨

目的探讨白血病患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后外周血中单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)水平的变化与急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生之间的关系。方法以10例白血病自体造血干细胞移植(auto-HSCT)患者作为对照,采用酶联免疫分析法检测31例行allo-HSCT白血病患者(观察组)干细胞回输前1d(-1d)、回输后7d(+7d)外周血中CCL8、TNF-α和IL-2的水平;同时,对观察组受者+7d后每7d动态监测上述指标,至+98d结束。结果对照组和观察组+7d时血浆中CCL8、TNF-α和IL-2的中位水平与-1d时比较,各指标均无明显改变(均P>0.05)。观察组中共11例发生了aGVHD。11例受者在诊断aGVHD时,IL-2水平与+7d时比较无明显变化(P>0.05),但CCL8和TNF-α水平较+7d时明显升高(均P<0.05);经抗aGVHD治疗获得完全缓解后,血浆中CCL8、TNF-α水平又降至+7d时水平(均P<0.05);aGVHD患者血浆CCL8水平首次升高至出现aGVHD临床症状的平均间隔时间为(7.0±1.6)d,而TNF-α水平变化的间隔时间则为(2.4±1.1)d,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CCL8可能参与了allo-HSCT受者aGVHD的发生,而且其血浆水平出现显著变化的时间要早于TNF-α。

窄谱中波紫外线对银屑病患者单核细胞趋化蛋白-1及其受体CCR2 mRNA表达的影响

目的:探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对银屑病患者单核细胞趋化蛋白(monocyte chemotactic protein,MCP)-1及其受体CCR2 mRNA表达水平的影响。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测30例银屑病患者NB-UVB照射治疗前、后外周血CC型趋化因子MCP-1的表达量。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测NB-UVB照射治疗前、后患者外周血单一核细胞CCR2 mRNA的表达水平。结果:寻常性银屑病患者治疗前外周血中MCP-1、CCR2 mRNA表达量明显高于正常对照组(P_1<0.01,P_2<0.01),NB-UVB照射治疗显著改善病情后,患者外周血中MCP-1、CCR2 mRNA表达量较治疗前明显降低,差异具有统计学意义(P_1<0.01,P_2<0.01)。结论:MCP-1及其受体CCR2可能与银屑病的发病相关,NB-UVB可能通过降低银屑病患者外周血MCP-1及其受体CCR2的表达而发挥作用。

血浆单核细胞趋化蛋白-2水平不能作为Allo-HSCT术后早期急性移植物抗宿主疾病与感染的鉴别指标

目的研究检测血浆单核细胞趋化蛋白-2(monocyte chemoattractant protein-2,MCP-2)水平作为区分白血病患者行异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,Allo-HSCT)后出现中性粒细胞缺乏合并感染(感染)或急性移植物抗宿主疾病(aGVHD)的鉴别指标的可行性。方法采用酶联免疫吸附试验检测35例Allo-HSCT患者(Allo-HSCT组)、14例自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation,Auto-HSCT)患者(Auto-HSCT组)和10名健康人(正常对照组)血浆中MCP-2的水平。比较Allo-HSCT与Auto-HSCT术后感染或aGVHD患者的血浆MCP-2水平变化。结果 14例Auto-HSCT患者和12例Allo-HSCT患者移植后早期发生中性粒细胞缺乏合并感染,其血浆MCP-2水平均明显高于感染前、感染控制后以及正常对照组的血浆MCP-2水平(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。Allo-HSCT组确诊aGVHD时的血浆MCP-2水平均明显高于发生aGVHD前、经抗aGVHD治疗有效后1d以及正常对照组的血浆MCP-2水平(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。与正常对照组比较,Auto-HSCT组、Allo-HSCT组患者确诊感染时及Allo-HSCT组患者确诊aGVHD时的血浆MCP-2水平均明显升高(均为P<0.05),但后3者比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 Allo-HSCT术后早期发生aGVHD或中性粒细胞缺乏合并感染时血浆MCP-2水平均明显升高,但比较差异无统计学意义,初步认为MCP-2血浆水平不能作为鉴别Allo-HSCT术后早期aGVHD或感染的指标。

益母草碱调节MCP-1/CCR2信号轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的影响

目的探讨益母草碱(Leo)调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号轴对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的影响。方法体外培养人肺泡上皮细胞(AEC);将细胞分为对照组、模型组(LPS组,10μg/mL LPS)、低浓度Leo组(Leo-L组,10μmol/L Leo)、中浓度Leo组(Leo-M组,20μmol/L Leo)、高浓度Leo组(Leo-H组,30μmol/L Leo)、MCP-1激活剂SLIGKV组(SLIGKV组,50μmol/L SLIGKV)、高浓度Leo+MCP-1激活剂SLIGKV组(Leo-H+SLIGKV组,30μmol/L Leo-H+50μmol/L SLIGKV);CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot分别检测细胞中MCP-1/CCR2信号通路及凋亡相关因子表达水平。结果与对照组比较,LPS组AEC细胞凋亡率、MCP-1、CCR2、IL-2、TNF-α及Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达显著升高,OD 450值和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达显著降低(P<0.05);与LPS组比较,Leo-L组、Leo-M组、Leo-H组AEC细胞凋亡率、MCP-1、CCR2、IL-2、TNF-α及Bax表达显著降低,OD 450值和Bcl-2表达显著升高,且呈现剂量依赖性(P<0.05);SLIGKV组上述指标趋势相反;SLIGKV减弱了高剂量Leo对LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的改善作用。结论Leo可能通过抑制MCP-1/CCR2信号轴改善LPS诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤。

血清单核细胞趋化蛋白-2和生长分化因子-15对重度抑郁症患者自杀意念的影响

目的 分析血清单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)、生长分化因子-15(GDF-15)与重度抑郁症(MDD)患者人格特征的相关性及对自杀意念的影响。方法 选取2022年1月至2023年6月哈尔滨市第一专科医院收治的149例MDD患者作为MDD组,选取同期体检健康的志愿者75例作为健康组。采用酶联免疫吸附法检测血清MCP-2、GDF-15水平,采用艾森克人格问卷(EPQ)评估人格特征。Pearson法分析血清MCP-2、GDF-15与EPQ评分的相关性。根据有无自杀意念分组,采用多因素logistic回归及受试者工作特征(ROC)曲线分析各因素对MDD患者产生自杀意念的预测价值。结果 MDD组血清MCP-2、GDF-15水平均高于健康组(P<0.05)。149例MDD患者中56例(37.58%)产生自杀意念。HAMD评分高、睡眠质量较差、重度焦虑、有自杀未遂史及血清MCP-2、GDF-15高水平是MDD患者产生自杀意念的独立危险因素(P<0.05)。血清MCP-2、GDF-15单独及联合预测MDD产生自杀意念的AUC分别为0.679、0.675和0.819。结论 MDD患者血清MCP-2、GDF-15水平与MDD患者人格特征关系密切,血清MCP-2、GDF-15升高为MDD患者产生自杀意念的危险因素。

木犀草素对神经性疼痛模型大鼠MCP-1/CCR2信号轴的影响

目的:探讨木犀草素调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴,对神经性疼痛(NP)模型大鼠神经胶质细胞激活和免疫炎症的影响。方法:采用坐骨神经慢性压迫损伤法构建大鼠NP模型。将大鼠按随机数字表法分为模型组、阿魏酸钠组及木犀草素低、中、高剂量组,每组12只;另选择同期12只大鼠为假手术组。各组大鼠腹腔注射及灌胃相应药物,每天1次,连续14 d。测定大鼠机械性缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL);实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫组织化学法检测脊髓中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测大鼠外周血中CD4^(+)、CD8^(+)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脊髓病理损伤情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脊髓中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测脊髓中MCP-1、CCR2蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠MWT、TWL、CD4^(+)T细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值降低,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,木犀草素低、中、高剂量组及阿魏酸钠组大鼠MWT、TWL、CD4^(+)T细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值升高,Iba-1、GFAP mRNA及蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例、炎症因子水平(IL-6、IL-1β、TNF-α)、MCP-1及CCR2蛋白表达降低,且木犀草素作用效果呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:木犀草素具有抗炎、增强免疫、抑制胶质细胞活化,缓解NP的作用,其作用机制可能与抑制MCP-1/CCR2信号轴的激活有关。

孕晚期血清趋化因子CXCL12、RANTES、CCL2与妊娠糖尿病孕妇妊娠结局的相关性

目的 分析孕晚期血清趋化因子CXCL12、RANTES、CCL2与妊娠糖尿病(GDM)孕妇妊娠结局的相关性。方法 选取2021年2月至2022年6月期间南通市海门区人民医院收治的GDM孕妇125例作为GDM组,60名同期体检健康孕妇为对照组。根据GDM孕妇妊娠结局将孕妇分为良好妊娠结局组(95例)和不良妊娠结局组(30例)。比较GDM组和健康孕妇、良好妊娠结局组和不良妊娠结局组孕妇血清CXCL12、RANTES、CCL2水平;采用Pearson法分析血清CXCL12、RANTES、CCL2水平与FINS、FPG、HOMA-IR的相关性;采用Logistic回归分析GDM孕妇不良妊娠结局的影响因素;绘制ROC曲线,分析血清CXCL12、RANTES、CCL2水平对GDM孕妇不良妊娠结局的预测价值。结果 GDM孕妇血清CXCL12、RANTES、CCL2水平均显著高于健康孕妇,差异有统计学意义(P<0.05);良好妊娠结局组血清CXCL12、RANTES、CCL2水平显著低于不良妊娠结局组,差异有统计学意义(P<0.05);不同妊娠结局的GDM孕妇饮食偏好、TG、HDL-C、LDL-C、FINS、FPG、2hPG、HOMA-IR、HOMA-β、HbA1c、孕酮比较,差异有统计学意义(P<0.05)。GDM孕妇血清CXCL12与RANTES水平呈正相关(r=0.322,P<0.05),与CCL2水平呈正相关(r=0.401,P<0.05),RANTES与CCL2水平呈正相关(r=0.334,P<0.05);血清CXCL12、RANTES、CCL2水平与FINS、FPG、HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。CXCL12、RANTES、CCL2、FINS、FPG、HOMA-IR水平升高为GDM孕妇不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。血清CXCL12、RANTES、CCL2水平联合评估GDM孕妇不良妊娠结局的AUC(0.936)显著高于三指标单独检测(AUC_(CXCL12)=0.811;AUC_(RANTES)=0.868;AUC_(CCL2)=0.796)(P<0.05)。结论血清CXCL12、RANTES、CCL2水平与GDM孕妇妊娠结局具有密切关系,可能可作为预测GDM孕妇不良妊娠结局的有效标志物。

维生素D_(3)对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2细胞平衡和MCP-1/CCR2信号的影响

目的:探讨维生素D_(3)对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(helper T cell 1/helper T cell 2,Th1/Th2)及单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2(monocyte chemoattractant protein-1/cell surface chemokine receptor 2,MCP-1/CCR2)信号的影响。方法:将Lewis大鼠按随机数字表法分为对照组(n=10)、模型组(n=15)和治疗组(n=15),采用免疫猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTG)诱导建立实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠模型,治疗组按照每只5 mg/kg的剂量腹腔注射1,25-二羟维生素D_(3)[1,25-(OH)2D_(3)],隔天1次,共用4周,其余2组均给予等体积生理盐水。采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色观察大鼠甲状腺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清中促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,TPOAb)及细胞因子干扰素-γ(interferon,IFN-γ)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),逐步线性回归分析TSH与自身抗体、细胞因子的关系;免疫组织化学检测甲状腺组织中的NF-κB p65;Western blot检测甲状腺组织中MCP-1/CCR2信号轴。结果:模型组甲状腺滤泡结构破坏、炎性细胞浸润,治疗组甲状腺病理变化明显改善并趋向于对照组。治疗组TSH、TGAb、TPOAb水平与模型组相比均明显降低(t=4.000、2.603、5.279,P=0.000、0.015、0.000),但仍明显高于对照组(t=2.400、2.216、7.392,P=0.025、0.037、0.000)。与模型组相比,治疗组IL-4、IL-10水平明显升高(t=3.522、2.432,P=0.001、0.022),IFN-γ、IL-12水平及IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10比值明显降低(t=2.940、4.700、5.416、8.178,P=0.007、0.000、0.000、0.000),均趋向于对照组水平。逐步回归分析结果显示,TSH与TGAb、TPOAb、IFN-γ、IL-12均呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关(r=0.872、0.868、0.731、0.706、-0.557、-0.236,均P<0.001),其中TGAb、TPOAb和IL-12对TSH的影响最明显。与模型组比较,治疗组大鼠甲状腺组织中的NF-κB p65、MCP-1及CCR2水平均下降,差异具有统计学意义(t=2.432、2.267、5.143,P=0.000、0.031、0.000)。结论:维生素D_(3)可能是通过抑制NF-κB通路以下调Th1型细胞因子、上调Th2型细胞因子进而降低Th1/Th2比值,还可能是通过抑制MCP-1/CCR2信号轴,最终减轻EAT大鼠甲状腺炎,改善甲状腺功能,抑制甲状腺抗体生成,保护甲状腺。

肝移植急性肺损伤患者围手术期血浆Eotaxin和MCP-2变化及意义

【目的】观察肝移植急性肺损伤患者围手术期血浆Eotaxin和MCP-2变化并探讨其意义。【方法】66例接受肝移植手术患者,观察其肺损伤发生率;用ELISA方法检测嗜酸性细胞选择性趋化因子(Eotaxin)、单核细胞趋化蛋白2(MCP-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的血浆水平。【结果】①66例患者有17例发生急性肺损伤(ALI),发生率为25.8%;术后5例患者死亡,肺损伤患者中死亡率为29.4%。②肝移植患者血浆Eotaxin、MCP-2、TNF-α水平在新肝3 h和术后24 h时高于术前,术后24 h最高。在各时间点,ALI组血浆Eotaxin、MCP-2、TNF-α水平明显高于非ALI组(P<0.01)。【结论】肝移植手术打击使血浆TNF-α、Eotaxin、MCP-2水平增高,急性肺损伤更显著,Eotaxin和MCP-2可能参与急性肺损伤过程。

MCP-1/CCR2基因多态性与冠状动脉疾病关联性的Meta分析

目的:采用Meta分析探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)基因的G2518A位点及趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2)基因的G190A位点多态性与冠状动脉疾病(coronary artery disease,CAD)的关联性。方法:通过PubMed,EMbase,CNKI及CBM等数据库搜索关于MCP-1/CCR2基因多态性与CAD关联性的文章。结果:符合纳入标准的共有21篇文献,MCP-1基因的G2518A位点和CCR2基因的G190A位点分别有6 835例CAD患者、11 142例正常对照受试者,以及2 801例CAD患者、5 789例正常对照受试者入选。综合数据表明MCP-1基因的G2518A位点和CCR2基因G190A位点多态性与CAD的发生存在关联[G2518A(P=0.04),G190A(P=0.005)]。根据分层分析观察到MCP-1基因的G2518A位点在非亚洲人群中与CAD存在关联性(P=0.04),而在亚洲人群中与CAD不具有统计学意义(P>0.05)。结论:MCP-1基因的G2518A位点及CCR2基因的G190A位点多态性与CAD的发生具有统计学意义。

通经定晕丸阻断颈椎病大鼠NF-κB激活MCP-1/CCR2通路及TNF-α及IL-1β、IL-6表达的研究

目的:研究通经定晕丸阻断颈椎病大鼠核因子-κB(NF-κB)激活单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:用手术的方法制作颈椎病大鼠模型,用通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。4周后检测,腹主动脉取血,进行血液黏度,血液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取颈椎椎间盘进行组织形态学分析;实时定量PCR检测颈椎椎间盘组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达,Western blot检测椎间盘组织中NF-κBp65蛋白表达。结果:通经定晕丸(5.0和10.0 g/kg)和颈复康冲剂(0.84 g/kg)可显著改善颈椎病模型大鼠的一般状况,降低血液低切黏度值、中切黏度值、高切黏度值,促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量及椎间盘组织中MCP-1、CCR2和NF-κBp65的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),减轻促炎因子对椎间盘造成的损伤,降低颈椎间盘高度和退变程度,降低纤维环裂隙、髓核、细胞数量、软骨厚度,其中以通经定晕丸10.0 g/kg剂量组作用效果更为显著。结论:通经定晕丸对颈椎病模型大鼠具有较好的治疗的作用,其作用机制与降低血液黏度,抑制MCP-1/CCR2信号通路激活、NF-κB活化及TNF-α、IL-1β和IL-6的生成相关。

异钩藤碱对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的 探讨异钩藤碱(IRN)调节单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)/CC趋化因子受体2(CCR2)信号通路对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 通过注射和吸入卵清蛋白的方法建立哮喘小鼠模型,将造模成功后的小鼠随机分为哮喘组、IRN低剂量组(IRN-L组,灌胃10 mg/kg IRN)、IRN高剂量组(IRN-H组,灌胃20 mg/kg IRN)、IRN-H+CCL2组[灌胃20 mg/kg IRN+腹腔注射7.5 ng CC趋化因子配体(CCL2)]、阳性对照组(腹腔注射2 mg/kg地塞米松),并以注射和吸入无菌磷酸盐缓冲液的小鼠为空白对照组,每组10只。各药物组小鼠每天给予相应药物1次,连续给药2周。检测各组小鼠气道高反应指标——呼吸间歇(Penh)值,血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素13(IL-13)、IL-4水平,支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(LYM)和中性粒细胞(NEU)数量,肺组织中MCP-1、CCR2蛋白表达水平;观察肺组织病理学变化并进行炎症细胞浸润评分。结果 与空白对照组比较,哮喘组小鼠肺组织炎症细胞浸润较明显,并有细胞肿胀、脱落现象发生;炎症细胞浸润评分,Penh值,IL-4、IL-13、TNF-α水平,EOS、NEU、LYM数量和MCP-1、CCR2蛋白表达水平均显著增加或升高(P<0.05);与哮喘组比较,IRN-L组、IRN-H组、阳性对照组小鼠肺组织病理损伤得到改善,上述定量指标均显著降低(P<0.05);与IRN-L组比较,IRN-H组、阳性对照组上述定量指标均显著降低(P<0.05);IRN-H组与阳性对照组比较,上述定量指标差异均无统计学意义(P>0.05);与IRN-H组比较,IRN-H+CCL2组上述定量指标均显著增加或升高(P<0.05),CCL2逆转了高剂量IRN对哮喘小鼠的保护作用。结论 IRN可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路的激活来减少哮喘小鼠气道炎症因子的释放,从而达到改善哮喘的目的。

汉黄芩素调节MCP-1/CCR2信号通路对妊娠高血压大鼠心脏炎症的影响

目的探讨汉黄芩素调节单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/CC类趋化因子受体2(CCR2)信号通路对妊娠高血压大鼠心脏炎症的影响。方法通过灌胃亚硝基左旋精氨酸甲酯构建妊娠高血压大鼠模型。将大鼠随机分为对照组(等量0.9%NaCl)、模型组(等量0.9%NaCl)和低、高剂量实验组(灌胃3.33、13.32 mg·kg^(-1)汉黄芩素)及硫酸镁组(腹腔注射100 mg·kg^(-1)硫酸镁)、重组大鼠MCP-1蛋白(rRMCP-1)组(腹腔注射0.026 mg·kg^(-1)rRMCP-1)、高剂量+rRMCP-1组(灌胃13.32 mg·kg^(-1)汉黄芩素+0.026 mg·kg^(-1)rRMCP-1),每组12只。各组给药1天1次,持续7 d。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;用免疫荧光染色检测大鼠心肌组织中M1、M2型巨噬细胞表达;用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织中MCP-1蛋白表达。结果对照组、模型组和低、高剂量实验组及硫酸镁组、rRMCP-1组、高剂量+rRMCP-1组的血清TNF-α水平分别为(10.06±0.41)、(23.39±0.57)、(19.89±0.62)、(13.64±0.51)、(12.97±0.48)、(28.84±1.05)和(17.15±0.69)pg·mL^(-1);M1型巨噬细胞表达的荧光强度分别为32.26±1.43、58.84±2.11、50.66±1.89、36.69±1.57、35.87±1.59、67.73±2.01和48.53±1.86;M2型巨噬细胞表达的荧光强度分别为31.15±1.20、46.56±1.03、51.92±1.04、59.11±0.82、59.26±0.83、40.26±1.12和45.53±1.65;MCP-1蛋白表达水平分别为0.58±0.03、1.86±0.11、1.62±0.09、0.76±0.07、0.78±0.06、2.16±0.13和1.34±0.12。模型组上述指标与对照组比较,低、高剂量实验组和硫酸镁组、rRMCP-1组上述指标与模型组比较,高剂量实验组上述指标与高剂量+rRMCP-1组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论汉黄芩素可能通过抑制MCP-1/CCR2信号通路抑制妊娠高血压大鼠心脏炎症反应。

大豆异黄酮对动脉粥样硬化大鼠炎症分子相关基因表达的影响

目的:研究大豆异黄酮(soybean isoflavone,SIF)对动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)大鼠血管中促As炎症相关基因表达的影响。方法:建立As大鼠模型,随机分成正常组、模型组、模型给药组和正常给药组;HE染色观察各组大鼠胸主动脉病理改变;实时PCR和免疫组化检测血管中促As炎症的相关基因表达量。结果:模型组胸主动脉严重萎缩、钙化,出现硬化斑块;模型给药组As病变较模型组明显减轻;正常组和正常给药组胸主动脉无病理改变。模型组胸主动脉中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、CC类趋化因子受体2(C-C chemokine receptor,CCR2)、单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白(MCPIP)和C反应蛋白(CRP)mRNA表达量较正常组明显升高(P<0.01或P<0.05);模型给药组上述4种基因mRNA表达量均较模型组明显降低(P<0.01或P<0.05);正常组与正常给药组4种基因mRNA表达量间的差异无统计学意义。免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组MCPIP、MCP-1、核因子κB(NF-κB)阳性染色和范围均增多(P<0.01),模型给药组3种蛋白的阳性染色和范围都较模型组明显减少(P<0.05);正常组和正常给药组3种蛋白表达间的差异无统计学意义。结论:大豆异黄酮能显著降低促As炎症的相关基因表达,明显抑制大鼠As病变。

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠CCL2,CCR2 mRNA表达的影响

目的:观察目前国际上公认的人类多发性硬化(MS)的理想动物模型-实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型脊髓中单核细胞趋化蛋白2(CCL2),单核细胞趋化蛋白受体2(CCR2)mRNA表达,探讨苦参素对EAE大鼠的保护作用,为临床应用提供依据。方法:将50只雌性Wistar大鼠随机分5组,分别为正常组,模型组,苦参素低、高剂量组(150,250 mg·kg^(-1)),地塞米松组(1 mg·kg^(-1)),每组10只,自免疫当天起连续给药16 d,同期正常组、模型组ip等量生理盐水,观察记录大鼠的临床症状,并检查组织病理学变化,采用RT-PCR法检测脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达。结果:与模型组比较,苦参素有效延迟EAE大鼠的发病时间,明显降低临床神经功能学评分(P<0.01),改善EAE大鼠中枢神经系统炎症浸润(P<0.01)和髓鞘脱失(P<0.01)程度,下调脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达(P<0.01,P<0.01)。结论:苦参素对EAE大鼠有防治作用,其作用机制可能与下调大鼠脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达有关。

火麻仁油对代谢综合征大鼠NF-κB/MCP-1/CCR2信号通路及促炎因子表达影响

目的:观察火麻仁油对代谢综合征(metabolic syndrome,MS)大鼠核因子-κB(NF-κB)/单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)/趋化因子受体-2(CCR2)信号通路及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用喂养高盐高脂高糖饲料,建立实验性MS大鼠模型,然后用火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg灌胃给药,每天1次,连续4周,每天观察实验大鼠一般状况。实验大鼠分别于给药后的第2周和第4周进行实验,检测大鼠血压(BP)、肥胖相关指标(体重、腹围、体长,计算Lee's指数和肥胖指数);进行血液中空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和TNF-α、IL-1β和IL-6含量分析;取肝组织进行组织形态学分析;实时定量PCR检测肝组织中MCP-1和CCR2的mRNA表达; Western blot检测肝组织中MCP-1、CCR2和NF-κB p65蛋白表达。结果:火麻仁油2. 0、8. 0ml/kg和二甲双胍70mg/kg可显著改善MS模型大鼠的一般状况,降低BP、体重、腹围、Lee's指数和肥胖指数,降低血液中FBG、FINS、FAA、TG、TC、LDL-D及TNF-α、IL-1β和IL-6含量,升高血液中HDL-D含量,抑制肝组织脂肪变性及炎症细胞浸润,降低肝组织中NF-κB p65和MCP-1、CCR2表达。结论:火麻仁油对大鼠MS具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MCP-1、CCR2表达、NF-κB活化及促炎因子的生成相关。

复方甘草酸苷改善慢性乙型肝炎患者肝脏炎症的机制研究

目的研究复方甘草酸苷改善慢性乙型肝炎患者肝脏炎症的机制。方法将21例慢性乙型肝炎患者分为试验组(10例)与对照组(11例),试验组患者给予复方甘草酸苷200 mg入液静脉输注,同时给予苦参素注射液、还原型谷胱甘肽和多烯磷脂酰胆碱注射液保肝,恩替卡韦抗病毒治疗;对照组患者除不使用复方甘草酸苷外与治疗组治疗相同,疗程均为2周。分别在治疗前后检测患者肝功能指标及多个细胞因子水平。结果两组患者肝功能均有好转,试验组ALT水平[(103.4±80.4)U/L]下降显著(t=6.162,P=0.000);MCP-2治疗后[(40.25±14.51)pg/ml]较治疗前显著下降(t=2.381,P=0.041);ENA-78治疗后较治疗前升高(t=-3.561,P=0.006)。试验组和对照组IL-16、6Ckine、TPO、SCF、TSLP、IL-33、IL-20、IL-21、IL-23、IL-28α、TRAIL和SDF-1α+β治疗前后差异均无统计学意义。试验组和对照组IL-18治疗前后均有所下降。结论复方甘草酸苷可显著改善肝脏炎症,抗炎的机制可能与抑制炎症因子MCP-2,活化ENA-78有关。

高脂饮食诱导肠腺瘤恶变机制研究

目的肠癌是消化道常见恶性肿瘤之一,越来越多的流行病学研究及动物实验表明高脂饮食(high fat diet,HFD)是肠癌发生的重要危险因素之一。本研究探讨HFD促进肠腺瘤恶变可能的分子机制。方法 4周龄Apcmin/+小鼠分为HFD组和对照组(常规饮食)。12周后处死,观察各组小鼠肠道腺瘤数目、大小及分布。采用HE染色评价腺瘤病理类型及癌变情况,Ki-67免疫组织化学染色评价肿瘤细胞增殖水平,脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法评价细胞凋亡。Real-time PCR和免疫组织化学染色评价单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2)的mRNA和蛋白表达。免疫荧光双染法检测肠道肿瘤组织中巨噬细胞表面分子F4/80、M1型及M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)表面分子的表达。结果 HFD组肠道腺瘤总数较对照组明显增加(26.60±1.03 vs 10.20±0.92,t=11.90,P<0.001),HFD组60%远段小肠和结肠腺瘤发生粘膜内癌,而对照组腺瘤未见癌变。HFD可增加肠道肿瘤Ki-67阳性细胞百分比[(70.80±7.57)%vs(30.80±5.77)%,t=4.20,P<0.01],降低肿瘤细胞凋亡百分比[(13.00±1.14)%vs(42.60±1.50)%,t=15.69,P<0.001]。HFD组肠道肿瘤组织MCP-1和CCR2 mRNA的表达水平增高,MCP-1及CCR2阳性细胞百分比较对照组明显增加[(73.80±7.02)%vs(36.80±4.68)%,t=4.38,P<0.01;(63.20±2.15)%vs(26.80±2.22)%,t=11.76,P<0.001]。免疫荧光双染提示HFD组肠道巨噬细胞表面分子F4/80和M2型TAMs表面分子MR阳性表达明显增加,M1型TAMs表面分子iNOS阳性表达明显减少。结论高脂饮食可活化MCP-1/CCR2信号通路促进TAMs募集及M2型TAMs极化进而促进Apcmin/+小鼠肠道腺瘤发展成为肠癌。