心肌梗塞患者单核细胞-血小板聚合率的检测

目的 建立流式细胞术检测循环全血中单核细胞与血小板聚合率的方法。方法 全血与CD14-FITC和CD61-PE单克隆抗体共同孵育15min,加溶血素溶解红细胞,洗涤后用流式细胞仪检测。以CD14区分出单核细胞,检测单核细胞中CD61的表达率。CD14和CD61双阳性的细胞是单核细胞与血小板聚合物。结果 心肌梗塞组循环全血中单核细胞-血小板聚合率为25.8±8.3％,显著高于正常对照组6.2±3.5％。结论 流式细胞术可用于检测全血中单核细胞-血小板聚合率。单核细胞-血小板聚合率的检测对心肌梗塞患者具有一定的诊断价值。

慢性粒-单核细胞白血病合并免疫性血小板减少症1例

慢性粒-单核细胞白血病(chronic myelomonocytic leukemia,CMML)合并免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)十分罕见。该文报告1例采用维奈克拉联合瑞帕妥单抗(一种抗CD20单克隆抗体)及海曲泊帕治疗CMML合并ITP患者的临床资料。CMML和ITP的共存机制需要进一步明确。维奈克拉联合抗CD20单抗及血小板生成素受体激动剂可能是治疗该合并症的有效策略之一。

悬浮红细胞保存过程中高浓度血小板-白细胞聚合物的形成及其预防措施

为研究悬浮红细胞 (CRCs)在体外 4℃保存过程中血小板 白细胞聚合物 (PLA)形成的数量及其变化特点及使用滤器的预防效果 ,将每袋 8个单位分离血浆或富含血小板血浆的CRCs等分为两袋 ,即对照组和滤器过滤组。当天和每周测定对照组和过滤组CRCs内血小板、白细胞计数和血小板 淋巴细胞 (P Lym)聚合物、血小板 单核细胞 (P Mon)聚合物、血小板 中性粒细胞 (P Neu)聚合物及总的PLA百分比率及浓度。结果显示 ,两组经过 4℃保存后 ,CRCs所含PLA比率和浓度都显著升高。与体内循环血液比较 ,P lym、P mon升高 2～ 5倍 ,P neu升高 10～ 2 0倍 ,其中分离血浆制备的CRCs在第 1天就已经显著升高。CRCs内PLA在保存 1周时浓度和比率最高 ,然后缓慢下降 ,但始终保持较高的水平。P neu占总PLA的 80 %～ 90 %。过滤组在保存过程中 ,利用流式细胞术未能检测出其产生的PLA。研究发现 ,在 4℃保存CRCs内检测出高浓度的PLA ,利用去白细胞滤器能有效防止PLA的产生。

实验性大鼠肺血栓栓塞单核细胞趋化蛋白-1和血小板源生长因子-B表达的改变与肺血管重建

目的探讨实验性肺血栓栓塞症(PTE)后单核细胞趋化蛋白1(MCP1)和血小板源生长因子B(PDGFB)表达及其在栓塞后肺血管重建中的作用。方法60只雄性SD大鼠随机分为假手术组和肺栓塞组,每组30只,肺栓塞组经颈静脉注入自体血栓制备PTE模型。两组分别于术后第1、4、7、14及28d各处死6只,分别测PaO2、mPAP,HE染色观察栓塞后肺动脉内膜增生情况,免疫组化方法检测MCP1和PDGFB在肺动脉和周围肺组织的表达,半定量观察其动态变化。结果PTE组栓塞后1周内PaO2明显低于假手术组(P<0.05),1周后恢复正常。两组mPAP比较无显著性差异。栓塞后第4d即见肺动脉内膜增生并持续至第28d。MCP1和PDGFB主要由肺动脉平滑肌细胞和巨噬细胞表达,MCP1在栓塞后第1～14d、PDGFB在栓塞后第1～7d持续高表达,之后表达逐渐减弱。结论急性PTE后肺动脉MCP1、PDGFB表达增强,参与了栓塞后肺血管重建过程。

急性心肌梗死患者PCI术中血栓事件不同亚群单核细胞及单核细胞-血小板聚集体的变化

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)过程中,术中血栓事件(IPTE)的出现情况;分析出现和不出现IPTE的情况下,单核细胞、不同单核细胞亚群以及单核细胞-血小板聚集物(MPA)的变化。方法入选的AMI患者PCI术前抽血进行单核细胞亚群和MPA的四色流式细胞术检测。根据血小板表面标志CD41的表达,利用绝对计数管中的荧光微球,进一步对单核细胞及3个亚群进行MPA的数量进行分析。采用Wilcoxon秩和检验、受试者工作曲线(ROC)等检验方法分析。结果 IPTE组CD14+CD16++单核细胞较非IPTE组明显减少,且占总单核细胞百分比下降。与非IPTE组患者相比,IPTE组MPA、各亚群与MPA以及结合比例均显著高于非IPTE组患者。各组患者的受试者工作特征(ROC)曲线分析显示MPA结合比率以及各亚群MPA结合比率对AMI患者PCI术中发生IPTE有较好的预测价值。结论 IPTE组患者中CD14+CD16++单核细胞亚群较非IPTE组患者显著减少,MPA结合比率及各单核细胞亚群MPA结合比率均显著高于非IPTE组患者,对于AMI患者PCI术中发生IPTE有较好的预测价值。

单核细胞-血小板聚集物测定在心脑血管血瘀证诊断中的意义

目的通过比较单核细胞-血小板聚集物(MPA)在正常人与心脑血管血瘀证病人中的表达,探讨MPA与血瘀证之间的相关性。方法选取84例心脑血管血瘀证病人,包括急性血瘀证组11例(急性心肌梗死,急性脑梗死),慢性血瘀证组65例(症状相对平稳的冠心病、脑梗死)和轻型血瘀证组8例(高血压,短暂性脑缺血发作);另随机选取30名正常人作为正常组。采用流式细胞仪检测CD14、CD41,从而得出MPA表达的百分率数值。结果血瘀证各组与正常组比较MPA数值均增加(P<0.01),急性血瘀证组>慢性血瘀证组>轻型血瘀证组>正常组。MPA数值与血瘀证积分呈直线正相关关系(r=0.93,P<0.05)。结论MPA测定在血瘀证诊断中有着重要的意义,并对判断血瘀证轻重、预测心脑血管疾病的发生有一定的价值。

不同处理方法对流式细胞术检测外周血单核细胞-血小板聚集体的影响

目的：探讨实际工作中不同处理方法对流式细胞术检测单核细胞-血小板聚集体（ MPA）的影响，为准确检测MPA提供依据。方法获取枸橼酸钠抗凝外周静脉全血，分别以CD14-藻红蛋白（ PE）、CD61-异硫氰酸荧光素（ FITC）标记单核细胞、血小板，以CD62P-PE标记活化血小板，使用流式细胞术检测CD14-PE／CD61-FITC双阳性MPA占单核细胞百分比及血小板CD62P阳性率。采用不同处理方法[全血标本处理前后放置不同时间、全血固定后立即标记抗体或放置不同时间后标记抗体、抗体标记前全血离心处理、不同抗体组合（抗CD14-PE和抗CD61-FITC ，抗CD14-PE和抗CD41-ECD，抗CD45-ECD和抗CD61-FITC）]检测MPA，比较各种处理方法检测的MPA是否有差异。结果与获取标本后立即处理比较，放置于室温（18～25℃）和低温（2～8℃）， MPA百分比、血小板CD62P阳性率均随放置时间的延长而增加（P＜0．05），两者呈正相关（室温r＝0．82，P＜0．05；低温r＝0．83，P＜0．05）。标本处理后立即检测或低温保存放置至24 h再检测， MPA百分率差异无统计学意义（P＞0．05）。与固定前标记抗体的处理方法比较，1％多聚甲醛低温固定全血标本后标记抗体，或者低温保存放置至24 h再标记抗体，MPA百分率差异无统计学意义（P＞0．05）。全血标本离心处理后，MPA百分率和血小板CD62P阳性率均明显增加（P＜0．05）。不同的抗体组合检测MPA百分比的差异均无统计学意义（P均＞0．05）。结论获取全血标本后应尽快处理，不能立即处理的应使用固定剂固定后可低温保存24 h。在标记新鲜全血标本前，应避免离心，处理完毕的标本使用固定剂固定后可低温保存24 h再用流式细胞术检测。不同抗体组合应验证后使用，CD14／CD61、CD14／CD41、CD45／CD61组合均适用于检测MPA。

血小板-白细胞聚合物引发的退血1例

悬浮红细胞由于治疗效果优于全血，不良反应相对少，临床上广泛应用于各种急性失血、慢性贫血的治疗。虽然输注去白悬浮红细胞具有疗效好、不良反应小等优点，但由于其在保存过程中血液内各种细胞间的相互作用会有血小板-白细胞聚合物的形成而引发的输血反应，我中心在2011年11月接到1例由于去白悬浮红细胞中的血小板-白细胞聚合物引发的输血反应造成的退血，分析报道如下。

单核细胞-血小板聚集物测定在心脑血管疾病诊断中的意义

目的通过比较单核细胞一血小板聚集物（MPA）在健康人群与心脑血管疾病患者中的表达，探讨MPA与心脑血管疾病之间的相关性。方法选取84例心脑血管疾病患者，包括急性组11例（急性心肌梗死、急性脑梗死），慢性组65例（症状相对平稳的冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑梗死），轻型组8例（原发性高血压、短暂性脑缺血发作）；另选取30例体检健康者作为对照组。采用流式细胞仪检测CD14、CD41，从而得出MPA表达的百分率。结果MPA表达的百分率急性组最高为（86．10±5．84）％，并随病情的缓解而逐渐降低，依次为慢性组（63．23＋17．77）％、轻型组（49．70±9．29）％和对照组（7．28±2．94）％，且差异均有统计学意义。结论MPA测定在心脑血管疾病诊断中有着重要的意义，并对判断病情轻重、预测心脑血管疾病的发生有一定的价值。

C反应蛋白和血小板-单核细胞聚集物检测在输血的恶性肿瘤患者中的应用

目的观察恶性肿瘤患者输血前后C反应蛋白(C reactive protein,CRP)和血小板-单核细胞聚集物(platelet-monocyte aggregates,PMA)的变化,探讨输血的恶性肿瘤患者检测CRP和PMA的应用价值。方法分别检测41例肺癌、33例大肠癌和30例外伤后需输血患者输血前、输血后5天和输血后2周血浆超敏CRP(hs-CRP)和PMA水平,并进行统计分析。结果输血后5天,肺癌组、大肠癌组和对照组hs-CRP和PMA水平均显著高于输血前(P<0.01)。输血后2周,肺癌组、大肠癌组和对照组hs-CRP和PMA水平均显著低于输血后5天(P<0.01),但肺癌组和大肠癌组二者水平均显著高于输血前(P<0.01)。输血前后,有转移组hs-CRP和PMA水平均显著高于同期无转移组(P<0.01),输血后5天和2周,反复输血组和全血输注组hs-CRP和PMA水平均显著高于同期非反复输血组和洗涤红细胞输注组(P<0.01)。各组输血后5天hs-CRP和PMA水平显著高于输血前而输血后2周显著低于输血后5天(P<0.01),有转移组、反复输血组和全血输注组输血后2周二者水平显著高于输血前(P<0.01),无转移组、非反复输血组和洗涤红细胞输注组与输血前无显著差异(P>0.05)。结论输血与恶性肿瘤患者炎症反应和高凝状态的进展有密切关系,CRP和PMA可作为预测恶性肿瘤患者输血后病情程度的有用指标。

2型糖尿病血小板-单核细胞聚集体水平及其与CD40、CD40L的关系研究

目的:观察2型糖尿病外周血的血小板-单核细胞聚集体、CD62p及其与CD40、CD40L之间关系变化,并探讨2型糖尿病微血管特异病变的发病机制和临床识别和预测的指标。方法:流式细胞术检测2型糖尿病病人血小板-单核细胞聚集体、CD62P以及CD40、CD40L。结果:有微血管病变的糖尿病组的血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40/M、CD40L/P、CD40L/M均明显高于对照组;无微血管病变的糖尿病组血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40L/P、CD40L/M均明显高于对照组;有微血管病变的糖尿病组的血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40/M、CD40L/P、CD40L/M明显高于无微血管病变的糖尿病组。血小板-单核细胞聚集体、CD62p与CD40L/P、CD40L/M有明显的正相关性;血小板-单核细胞聚集体与CD40/M呈显著正相关性。血小板-单核细胞聚集体、CD62p、CD40L/P、CD40L/M与空腹血糖有明显的正相关性。结论:血小板-单核细胞聚集体、CD62p的测定对于糖尿病微血管病变的早期诊断具有重要的临床应用和研究价值。CD40-CD40L可能通过诱导血小板的活化,血小板-单核细胞集聚参与糖尿病微血管病变。

急性冠脉综合征患者血小板-单核细胞聚集及相关细胞因子表达的研究

目的研究急性冠脉综合征（ACS）与血小板-单核细胞聚集及其相关细胞因子表达的关系。方法采用流式细胞术同时测定74例ACS患者、58例稳定性心绞痛（SAP）患者和46例冠脉造影阴性患者血浆中IL6、IL-8单核细胞超化因子-1、MCP-1、sCD40L（可溶性CD40配体）、sP-选择素（sp-selectin）和全血中血小板-单核细胞聚集率（PMAs）。结果ACS患者各细胞因子和PMAs水平均显著高于SAP和冠脉造影阴性患者（P【0.01）;而IL-8、sCD40L、sP-选择素和CRP在SAP患者与冠脉造影阴性患者间无显著性差异（P】0.05）。相关性分析显示,各细胞因子及CRP与PMAs均有良好的正相关性（P【0.01）,其中IL-6和sP-selectin与PMAs相关性最高,相关系数r分别为0.484和0.481（P均【0.001）。Logistic回归分析显示,hs- CRP、IL-6和PMAs对于ACS的OR值分别为2.639（95%CI 1011～6.892）,1.031（1.001～1.062）和1.331（1.054～1.680）。结论急性冠脉综合征的发生与血小板的活化、血小板-单核细胞聚集形成及与其相关的细胞因子表达有关,检测PMAs和IL-6水平可以反映冠心病患者冠脉内斑块的稳定性状态。

血小板与单核细胞聚合物在2型糖尿病患者血管并发症诊断中的意义

目的探讨血小板与单核细胞聚合物（platelet—monocyte aggregates，PMA）在2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者血管病变诊断中的意义。方法应用荧光标记单抗流式细胞术对94例T2DM患者（按有无血管并发症分为有血管并发症组64例和无血管并发症组30例）和42例健康刘照者血清中PMA表达率及实验室常规检测指标进行分析。结果T2DM患者组血清中的PMA表达率明显高于健康对照组，且差异有统计学意义（P〈0．01）。有血管病发症组患者血清中的PMA表达率高于无血管病发症组，且两组间差异亦有统计学意义（P=0．015）；糖尿病患者血管病变损伤区域数量≥2时，其PMA表达率明显高于无血管病变患者组，且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。PMA表达率与RBC、WBC、HGB、高密度脂蛋白胆固醇等均有一定相关性（P均〈0．05）。受试者工作特征曲线显示PMA表达率为24．72％时，对T2DM血管并发症诊断的灵敏度为71．9％，特异性为73．8％，曲线下面积为0．754。结论T2DM患者血清中的PMA表达率明昆升高，日升高的程度与糖尿病血管病变数量有关。

肺癌患者血清淋巴细胞-单核细胞比值、中性粒细胞-淋巴细胞比值及血小板-淋巴细胞比值变化及对预后的预测价值

目的探讨肺癌患者血清淋巴细胞-单核细胞比值(LMR)、中性粒细胞-淋巴细胞比值(NLR)、血小板-淋巴细胞比值(PLR)变化及对预后的预测价值。方法选取2015年1月至2018年5月我院诊治的肺癌患者90例(肺癌组),选取同期健康体检者90例(对照组),检测两组血清中的LMR、NLR、PLR变化,根据预后将肺癌组分为生存组和死亡组,比较两组血清LMR、NLR、PLR水平。分析对预后的预测价值及影响因素。结果肺癌组LMR、NLR、PLR水平高于对照组(P<0.05);生存组LMR、NLR、PLR水平低于死亡组(P<0.05);LMR、NLR、PLR的最佳诊断截点分别为5.93、3.28、139.38;LMR、NLR、PLR联合预测的AUC高于LMR、NLR和PLR(P<0.05);生存组和死亡组在病理类型、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、LMR水平、NLR水平、PLR水平方面比较差异有统计学意义(P<0.05);病理类型、远处转移、NLR水平、PLR水平为影响肺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肺癌患者血清LMR、NLR、PLR水平升高,可用于预测在常规临床实践中肺癌患者的预后。

单核细胞亚群与单核细胞-血小板聚集体与老年心肌梗死心血管不良事件的关系

目的分析单核细胞亚群相关指标、血小板-单核细胞聚集体(MPA)与心肌梗死心血管不良事件的关系。方法流式细胞术检测老年心肌梗死患者(病例组)及健康人群(对照组)的单核细胞亚群、MPA。结果病例组中间型(MON2)、非经典型单核细胞亚群(MON3)百分比、MPA百分比明显高于对照组,经典型单核细胞亚群(MON1)百分比明显低于对照组(P<0.05)。不良事件患者MON2、MON3百分比和MPA%水平明显高于无不良事件患者(P<0.05)。年龄、体重指数(BMI)、C反应蛋白(CRP)、凝血酶原时间(PT)、MON2百分比、MON2-MPA%是心血管发生不良事件的危险因素。结论MON2、MON3及其MPA%水平在预测老年心肌梗死患者预后中具有一定临床价值。

Ⅱ型糖尿病患者单核细胞表面CD36表达和单核细胞-血小板聚集的临床研究

目的:探讨Ⅱ型糖尿病有无血管病变、患者外周血单核细胞CD36表达和单核细胞-血小板聚集的临床意义。方法:采用流式细胞仪,测定56例糖尿病伴血管病变患者及53例无血管病变患者外周血单核细胞表面CD36平均荧光强度和单核细胞-血小板聚集的百分率,并与56例健康对照组比较。结果:糖尿病伴血管病变患者外周血单核细胞CD36平均荧光强度和单核细胞-血小板聚集的百分率均明显高于无血管病变组和健康对照组(P<0.01);且伴血管病变组外周血单核细胞CD36平均荧光强度与单核细胞-血小板聚集的百分率具有显著的正相关性(r=0.582,P<0.01)。结论:糖尿病患者长期慢性高血糖产生糖基化产物(Advanced Glycation End-product,AGE),可能会促使CD36表达增加,进一步触发单核细胞-血小板聚集体增加,从而加速动脉粥样硬化的发生和发展。

冷沉淀融解后白细胞-血小板聚合物析出原因分析及改进措施

目的分析冷沉淀融解后白细胞-血小板聚合物析出的原因,制定改进措施,减少血液报废。方法通过对临床短期内集中退回报废的18袋冷沉淀融解后出现白细胞-血小板聚合物（PLA）析出的原因进行回顾性分析并制定改进措施,减少血液报废。结果 2016年9—10月发往临床的冷沉淀因聚合物析出退库报废比例达1. 8%（18/980）,制定改进措施后（2017年1—2月）报废比例0. 1%（1/781）,差异有统计学意义（P〈0. 01）。结论冷沉淀融解后白细胞-血小板聚合物析出的主要原因是1次成浆标准过低,血浆中混有少量血细胞成分,其次是滤器质量问题、采血和白细胞过滤不畅等,应严把耗材质量关,加强采血不畅的标识和成分制备环节的监控检查,严格筛选原料血浆,避免1次成浆。

脑梗死患者单核细胞CD14^+CD16^+亚群及单核细胞-血小板聚集水平的检测及其意义

目的:通过检测脑梗死患者外周血单核细胞各亚群分布情况以及单核细胞-血小板聚集水平,探讨脑梗死患者外周血单核细胞状态、单核细胞-血小板聚集情况及其临床意义。方法:利用流式细胞仪(FCM)检测48例脑梗死患者及31例正常人外周血CD14、CD16、CD41的表达。结果:脑梗死组的CD14+CD16+亚群、单核细胞-血小板聚集比率与正常对照组比较显著增高(P<0.001);脑梗死组间的CD14+CD16+亚群、单核细胞-血小板聚集比率的差别不大(P>0.05)。结论:脑梗死患者单核细胞、血小板活性增高,因此检测单核细胞CD14+CD16+亚群及单核细胞-血小板聚集对于脑梗死患者早期诊断具有重要的临床应用价值。

左卡尼汀对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血小板因子4、单核细胞趋化蛋白-1、基质金属蛋白酶及热休克蛋白的影响

目的研究左卡尼汀对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血小板因子4(PF4)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶(MMP)及热休克蛋白(HSP)的影响。方法选取2009年6月～2011年11月我院冠状动脉粥样硬化性心脏病90例,采用随机数字表法分为对照组(常规方案)45例和观察组(常规方案加用左卡尼汀)45例,将两组患者治疗前和治疗后1、2周的PF4、MCP-1、MMP-9、MMP-12及HSP60、HSP90的水平进行检测及比较。结果观察组治疗后1周、2周的PF4、MCP-1、MMP-9、MMP-12及HSP60、HSP90的水平均低于对照组,且对心肌梗死型和心绞痛型患者的上述指标降低幅度均较大,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论左卡尼汀对冠状动脉粥样硬化性心脏病患者PF4、MCP-1、MMP及HSP的影响较大,反映出其在本病治疗中的临床效果。

急性脑梗死患者各类血小板-白细胞聚集体的检测及在临床诊断中的应用

目的检测急性脑梗死患者各类血小板-白细胞聚集体(PLA)水平,探讨其临床应用价值。方法选取58例急性脑梗死患者,其中大动脉粥样硬化性脑梗死(LAA)19例、小动脉闭塞性脑梗死(SAO)39例,以体检健康者20名作为正常对照组。采用流式细胞术检测总PLA、血小板-单核细胞聚集体(PMA)、血小板-粒细胞聚集体(PNA)、血小板-淋巴细胞聚集体(PLy A)和血小板(PLT)CD62P阳性率。采用免疫荧光干式定量法检测高敏C反应蛋白(hs-CRP),以hs-CRP<1.0 mg/L、1.0~3.0 mg/L、>3.0 mg/L将急性脑梗死患者分为低风险组、中度风险组和高风险组。由临床医师依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)对患者进行评分,以NIHSS<5分为轻度梗死,NIHSS≥5分为中重度梗死。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各类PLA及CD62P诊断急性脑梗死的价值。结果 LAA组、SAO组PMA及LAA组PNA明显高于正常对照组(P<0.05),LAA组PMA与SAO组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组间PLA和PLy A差异均无统计学意义(P>0.05)。SAO组PLT活化后CD62P高于正常对照者(P<0.05)。SAO患者PMA与CD62P阳性率呈正相关(r=0.692,P<0.01)。ROC曲线分析显示,PMA、PNA、CD62P、PLA和PLy A诊断急性脑梗死的ROC曲线下面积分别为0.769(P<0.01)、0.652(P<0.05)、0.686(P<0.05)、0.641(P>0.05)和0.517(P>0.05)。各类PLA与hs-CRP、NIHSS评分之间均无相关性(P>0.05)。结论不同类型PLA在急性脑梗死中的变化不同。PMA与PNA水平在急性脑梗死中升高更显著,对急性脑梗死有一定的诊断意义,但可能不能用于鉴别LAA与SAO以及提示病情严重程度和预后。