单步萃取反相高效液相色谱法测定人全血中环孢素A的浓度

目的 建立单步萃取反相高效液相色谱法测定人全血中环孢素A(CsA)浓度。方法 采用反相高效液相色谱法 ,罗通定为内标 ,YWG -C18色谱柱 ,乙腈 -甲醇 -水 -异丙醇 (30∶10∶6 0∶1.5 )为流动相 ,流速 1.0ml/min ,柱温 70℃ ,检测波长 2 10nm。结果 CsA全血浓度在 5 2 .6 0～ 10 5 2 .0 0ng·ml-1范围内线性关系良好 ,r =0 .9996 ,最低检测浓度为 2 0ng·ml-1,平均回收率96 .33% ,日内和日间RSD均低于 5 %。结论 本法简便灵敏、准确可靠、经济 。

分子印迹膜-固相萃取-高效液相色谱法同时检测橙子中噻苯隆和氯吡脲

以聚多巴胺(polydopamine,PDA)修饰的聚偏氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)膜为基膜,噻苯隆(thidiazuron,TDZ)为模板,甲基丙烯酸(methacrylic acid,MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(ethylene glycol dimethacrylate,EGDMA)为交联剂,合成TDZ分子印迹膜(molecularly imprinted membrane,MIM),并将其应用于橙子中TDZ及其结构类似物氯吡脲(forchlorfenuron,CPPU)的高选择性同时提取。扫描电子显微镜表征结果表明,致密分子印迹聚合物通过PDA涂层固定在PDA@PVDF膜的三维网络结构表面;性能测试结果表明,MIM对TDZ和CPPU的吸附容量分别是相应非印迹膜的1.80、1.89倍,分别在20、30 min达到吸附平衡;MIM对干扰物质香豆素和3-叔丁基苯酚的特异性因子分别达到23.2和19.3。以MIM为固相萃取膜片,成功从橙子样品中高选择性同时提取TDZ和CPPU,在加标浓度为2.0、3.0、5.0μmol/L时,高效液相色谱法检测的加标回收率分别为90.3%~99.4%和88.2%~98.1%,相对标准偏差分别为0.9%~2.5%和1.2%~3.0%(n=3)。该方法能同时快速检测TDZ和CPPU,操作简单,具有较好的灵敏度、精密度及回收率,检测成本低,适用于果蔬中TDZ和CPPU残留的检测。

全自动固相萃取—高效液相色谱法测定现制饮料中7种合成着色剂

目的:建立一种全自动固相萃取—高效液相色谱双波长法测定现制饮料中7种合成着色剂的方法。方法:样品经纯水提取2次,离心后,合并上清液,调节pH至3~4。利用全自动固相萃取装置活化Poly-sery色素专用固相萃取小柱,并上样、淋洗、洗脱。洗脱液氮吹浓缩至200μL,用50%流动相A+50%流动相B混合液定容至1.0 mL。色谱柱采用C 18柱,流动相为20 mmol/L乙酸铵—甲醇,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,进样量10μL,检测波长254,628 nm。结果:各物质在0.5~50.0μg/mL范围内相关系数均大于0.9999,方法检出限为0.023~0.179 mg/kg,定量限为0.078~0.598 mg/kg,加标回收率为92.4%~96.8%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~4.2%。结论:该方法试剂使用量小,操作步骤简便,自动化程度高,回收率高,重复性好,适合于批量样品测定。

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定果蔬中4种有机磷类农药的残留量

以4种目标物丙溴磷、毒死蜱、二嗪磷、辛硫磷的混合物作为模板分子,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂、甲基丙烯酸为功能单体,通过水热聚合法制备分子印迹聚合物(MIPs),将MIPs填充在聚丙烯空柱中制备MIPs固相萃取(MIPs-SPE)柱。将果蔬样品洗净、晾干、粉碎后,分取5.00 g,加入2 g无水硫酸钠,研磨均匀。加入30 mL乙腈,超声1.5 h,离心10 min。分取1 mL上清液过活化好的MIPs-SPE柱,用4 mL正己烷淋洗,6 mL体积比9∶1的甲醇-乙酸混合溶液洗脱。收集洗脱液,于35℃氮气吹干,用1 mL乙腈定容,用高效液相色谱法分析。结果显示:MIPs可特异性识别4种目标物,对目标物的吸附量约非分子印迹聚合物(NIPs)的2.5倍,对硫磷、马拉硫磷、甲拌磷、甲基毒死蜱的吸附量显著低于目标物的;经MIPs-SPE柱净化后,样品大部分基质成分被去除,目标物测定无干扰。4种目标物的浓度在0.005~2.0μmol·L^(−1)内和对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.0015~0.0040μmol·L^(−1);在0.01,0.5,1.0,2.0 mg·kg^(−1)加标浓度水平下,4种目标物的回收率为85.9%~102%,测定值的相对标准偏差(n=5)为3.0%~7.1%。方法用于4种果蔬样品的分析,在草莓样品中检出了丙溴磷(检出量为0.07 mg·kg^(−1)),甘蓝样品中检出了辛硫磷(检出量为0.05 mg·kg^(−1)),其他样品中均未检出这4种目标物。

磁分散固相萃取-高效液相色谱法检测人体尿样中天麻素

建立了一种磁分散固相萃取技术结合高效液相色谱法,用于快速检测人体尿液样本中的天麻素。采用化学共沉淀法自组装制备磁性活性炭/大孔树脂三元复合材料(Fe_3O_(4)/AC/MR),并将该材料用作吸附剂,实现尿液样本中天麻素的分离富集。在最佳实验条件下,天麻素浓度与峰面积间呈良好线性关系,线性范围为3.0×10^(-2)~10.0μg·mL^(-1),线性相关系数为0.9994,检出限为5.4μg·L^(-1)。以模拟人体尿液作为实际样品进行加标回收验证,加标回收率为94.87%~106.3%,相对标准偏差(RSD)在2.8%-4.2%之间。本研究建立的方法简便、快速、有效,为生物样本中天麻素的分离提纯提供了新方法。

通过式固相萃取-高效液相色谱法测定糕点中15种抗氧化成分

目的建立通过式固相萃取-高效液相色谱法同时测定糕点中7种天然抗氧化成分和8种合成抗氧化剂的定量分析方法。方法目标物采用1%乙酸乙腈溶液提取,用通过式亲水亲油平衡(hydrophilic and oleophilic balance,HLB)固相萃取柱净化,净化液浓缩处理后供高效液相色谱仪分析,15种目标物以0.5%甲酸溶液-甲醇为流动相梯度洗脱,C18色谱柱分离,二极管阵列检测器280 nm处测定。结果15种抗氧化成分在1~50μg/mL范围内有良好的线性关系,表没食子酸儿茶素的检出限(limit of detection,LOD)为2 mg/kg,定量限(limit of quantification,LOQ)为5 mg/kg,其余14种化合物的LOD为0.2 mg/kg,LOQ为0.5 mg/kg;各组分的平均回收率为88.10%~94.73%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)≤5.2%。结论本方法具有快速简单、高灵敏度、重现性好等优点,对糕点中抗氧化剂含量的检测具有很好的实用价值,同时为糕点的质量安全提供了有效的技术支持。

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸浓度

目的 建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸 (MPA)浓度 ,探讨MPA与其代谢产物间的转化。方法 用固相萃取法处理样品 ,以泼尼松为内标物 ,C18硅胶键合相为固定相 ,甲醇 四氢呋喃 水 (6 0∶2∶5 0 )作流动相 ,在波长 2 5 4nm处紫外定量检测。结果 MPA浓度在 0 .2～ 40 μg·mL-1范围内与色谱峰高呈良好线性关系 ,血浆MPA回收率为 92 .3%～10 3.1% ,绝对回收率为 5 0 .2 %～ 5 3.7%。最低检测极限为 0 .2 μg·mL-1,批内与日间 (n =5 )RSD为 3.34%和 4.70 %。结论 本法用于MPA测定具有准确、灵敏、简便等特点 。

固相萃取反相高效液相色谱法检测人血浆中辛伐他汀浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中辛伐他订。方法:应用OASIS因相萃取小柱提取血浆中辛伐他汀,采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器检测,色谱柱为Symmetry C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm),内标物为洛伐他汀,流动相为0.1％磷酸液(用氢氧化钠调pH4.0)-乙腈(40:60),检测波长238um,流速1.2mL·min^(-1)。结果:辛伐他汀在1.0～35.0ng·mL^(-1)范围内线性良好(r=0.9997)。低、中、高浓度加样回收率在97.3％～108.0％之间,日内、日间RSD在5.9％～8.8％之间,最低检测浓度为0.8ng·mL^(-1)。结论:本法快速、灵敏、高效,适于辛伐他汀的血药浓度检测。

固相萃取-高效液相色谱法测定水中氢氯噻嗪

为准确测定水体中的痕量氢氯噻嗪含量,建立了固相萃取(SPE)-高效液相色谱法(HPLC)联用的测定方法。首先,将采集的水样(1000 mL)进行过滤并调节pH值后,通过活化后的HLB固相萃取柱进行净化;然后,用10 mL纯甲醇进行洗脱提取,氮吹至近干,用1 mL甲醇定容;最后,采用HPLC检测所得溶液。检测条件:色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(二者体积比为70∶30),流速为1 mL/min,等度洗脱,检测波长为270 nm,采用外标法定量。结果表明:氢氯噻嗪质量浓度为0.1~50.0μg/L时,待测物的质量浓度和色谱峰面积成正比例线性关系,线性方程为A=221.49c+3915,R^(2)=0.9997;供试品在24 h内放置稳定,平均回收率为99.90%(RSD值为1.8%,n=5),精密度为1.1%。所建立的方法操作简便,具有较高的精密度,检出浓度低,采用的流动相配制简单,对环境污染小,可用于水环境中痕量氢氯噻嗪的检测、分析及风险评估。

基于聚乙烯亚胺修饰磁性纳米粒的分散固相萃取/高效液相色谱法测定水中非甾体抗炎药

环境水样中非甾体抗炎药(NSAIDs)的长期存在不仅会影响水生生物的生命安全,扰乱生态系统环境,而且会对人类健康构成严重威胁。采用溶剂热法首先制备了氨基功能化Fe_(3)O_(4)纳米粒子(Fe_(3)O_(4)-NH_(2))。随后,通过室温下水溶液中的席夫碱反应,以戊二醛为交联剂,将具有支链结构的聚乙烯亚胺(PEI)成功地接枝到Fe_(3)O_(4)纳米粒子上,合成了一种可回收的PEI接枝磁性纳米吸附剂(Fe_(3)O_(4)@PEI)并将其应用于环境水中NSAIDs的检测。通过各种表征手段研究了Fe_(3)O_(4)@PEI的组成特性,并对影响NSAIDs萃取效果的参数进行了优化。Fe_(3)O_(4)@PEI对4种NSAIDs具有高吸附性,与高效液相色谱联用可对环境水样中的酮洛芬、萘普生、双氯芬酸和托芬那酸4种NSAIDs进行定量分析,在1~500μg/mL范围内,色谱峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,样品在3种不同添加水平下的加标回收率在85.6%~107.8%,日内精密度均小于7.8%(n=6),日间精密度均小于9.5%(n=3)。该方法操作简单、准确高效,可用于环境水样中非甾体抗炎药的测定。

离子液体基磁性固相萃取-高效液相色谱法测定饮料中的合成色素

国家对合成色素使用量有严格限量标准,有效萃取和测定食品中合成色素对保障食品安全有重要意义。采用红外光谱、透射电镜和振动样品磁强计等对合成的聚合离子液体修饰的磁性纳米材料的结构、形貌和磁性进行了表征,将此磁性纳米材料作为磁性固相萃取(magnetic solid-phase extraction,MSPE)吸附剂,研究了其对4种合成色素(柠檬黄、日落黄、诱惑红和亮蓝)的萃取性能,结合MSPE与高效液相色谱技术,对影响萃取效率的吸附剂用量、吸附时间、解吸时间和盐的含量等参数进行了优化。研究结果表明:根据吸附剂对典型阴/阳离子型染料的吸附结果,推断4种合成色素的有效萃取归因于吸附剂与分析物之间存在的强静电引力以及π-π和疏水作用等多重作用;在吸附剂用量为10 mg、吸附时间为20 min、解吸剂为1 mL乙腈/盐酸(体积比9∶1)和解吸时间为10 s的优化萃取条件下,4种色素具有良好的线性(决定系数为0.9922~0.9975),检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为1~3μg/L和2.5~10μg/L;该方法能成功用于碳酸饮料健力宝和菠萝啤中合成色素的测定,3个质量浓度下(日落黄、诱惑红和亮蓝均为25、100、250μg/L,柠檬黄为50、200、500μg/L)的加标回收率为71.4%~113.0%,相对标准偏差小于10.9%(n=3)。本研究为食品中合成色素的分析提供了一种很有前景的样品前处理方法。

固相萃取反相高效液相色谱法测定通痹灵人血清中士的宁浓度

[目的]建立测定人血清中士的宁含量的方法,以监控服通痹灵后人血清中士的宁的浓度,避免药物蓄积中毒。[方法]应用固相萃取小柱提取血清中士的宁,采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil Division ODS C18分析柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),1000 mL中加入磷酸二氢钾0.6 g、十二烷基磺酸钠1.0 g(冰醋酸调pH至4.5),检测波长254 nm,流速1.0 mL/min,室温操作。[结果]士的宁浓度在0.031～2.000μg·mL-1的范围内线性关系良好,最小检测浓度为0.01μg·mL-1,平均回收率大于90％,日内、日间RSD为1.53％～5.32％。[结论]该方法快速准确,样品处理简便易行,适用于士的宁的浓度检测。

固相萃取反相高效液相色谱法测定血浆中利鲁唑的浓度

目的:建立固相萃取-高效液相色谱法测定利鲁唑血药浓度。方法:采用 Supelclean LC-18 SPE 小柱处理血样,Kroma-sil C_(18)柱(4.6 mm×200 mm,5μm)为分析柱,甲醇-0.01 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液-乙腈(55:35:10)为流动相,检测波长为265nm,以非那吡啶为内标。结果:测定利鲁唑的线性范围为10～3200 ng·mL^(-1),日内日间误差 RSD 均小于10%,方法回收率86.36%。结论:本法准确、简便,适用于利鲁唑药代动力学的研究。

固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素A

目的 建立固相萃取反相高效液相色谱法测定全血环孢素A的方法。方法 全血中的环孢素A采用Wa tersSep PakC18萃取小柱提取浓缩 ,色谱柱WatersNova PakC18;流动相 乙腈∶甲醇∶水 (32 0∶30∶15 0 ,V/V) ;流速 0 6 5ml/min ;检测波长 2 0 6nm ,环孢素D作内标。结果 方法的回收率为 95 8% ,相对标准差 (RSD)为 7 5 % ,线性范围为5 0～ 2 0 0 0 μg/L ,r=0 9999。 结论 该方法特异、敏感、准确 ,可用于全血环孢素A的测定。

分散固相萃取法联合高效液相色谱法测定水果蔬菜10种农药残留效果分析

文章为分析水果、蔬菜农药残留检测中分散固相萃取法联合高效液相色谱法的应用价值,文章选择市售的水果和蔬菜,通过分散固相萃取法处理乙腈提取的样本,加入吸附剂将其中的杂质去除,将净化后的样本溶液通过高效液相色谱仪分离,使用外标法定量,检测其中的农药残留情况。经检测,水果样本农药残留55.81%、超标1.16%,蔬菜样本农药残留31.68%、超标0.41%,超标率均较低;蔬菜中农药检出率前三位分别为百菌清、啶虫脒、苯醚甲环唑,超标农药为啶虫脒、克百威,超标率为0.41%、0.21%;水果中农药检出率前三位分别为吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑、烯酰吗啉,超标农药为苯醚甲环唑,超标率为1.16%。因此,市售水果、蔬菜中偶有农药超标问题,分散固相萃取法联合高效液相色谱法应用效果良好,能够为检测者提供精准数据参考,适用于农药残留检测。

复合离子液体修饰硅胶嵌套海绵材料固相萃取-超高效液相色谱法测定环境水中黄曲霉毒素B1的含量

将功能化离子液体制备的复合离子液体用于修饰硅胶嵌套海绵材料,采用场发射扫描电子显微镜和傅里叶变换红外光谱仪对该复合材料的性能进行表征。将复合材料装填于一次性使用无菌注射器制备固相萃取柱,并考察了其吸附容量。水样经除杂、过滤后,取续滤液1.5 L,以3 mL·min^(-1)流量过上述制备好的固相萃取柱,用5 mL水淋洗,3 mL体积比1∶5的丙酮-2 mol·L^(-1)盐酸溶液的混合液洗脱,收集洗脱液,过0.45μm有机系滤膜,滤液按照色谱条件测定。以Eclipse Plus C18色谱柱作固定相,体积比68∶32的水和体积比1∶1的乙腈-甲醇溶液的混合溶液作流动相进行等度洗脱,荧光检测器测定黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量。结果显示:合成的复合材料中具有六圆环网状结构的海绵骨架和离子液体修饰的硅胶大颗粒物质相互嵌套,形成了类似于钢筋混凝土的结构,兼具离子液体的良好选择性和海绵的机械柔性;制备的固相萃取柱对AFB1的吸附容量为26.48 mg·g^(-1),显著高于文献报道的用于吸附黄曲霉毒素吸附材料的(0.460~4.289 mg·g^(-1));AFB1的质量浓度在0.1~40μg·L^(-1)内和峰面积呈线性关系,测定下限为0.2 ng·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为75.2%~95.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为6.9%~8.4%。

固相萃取-高效液相色谱法测定肉及肉制品中9种人工合成着色剂的研究

建立同时测定肉及肉制品中9种水溶性人工合成着色剂含量的固相萃取-高效液相色谱法。方法采用氨水-乙腈-水溶液(1∶70∶29,v/v/v)提取,固相萃取小柱富集净化,多波长检测分析。肉及肉制品中9种水溶性人工合成着色剂在0.1~10μg/mL浓度内线性关系良好,R^(2)>0.9999,检出限为0.02~0.20mg/kg,回收率为75.0%~103.3%,相对标准偏差(RSD)为0.10%~1.73%。研究结果表明,本方法前处理操作简单,各种色素分离度和回收率高,检测结果准确,且实验重现性好。

固相萃取反相高效液相色谱法测定环孢素A滴眼剂中环孢素A的含量

目的:应用固相萃取改进环孢素A滴眼剂中环孢素A含量的测定方法。方法:环孢素A滴眼剂中的环孢素A经固相萃取,以反相高效液相色谱法测定。色谱柱Waters Sep—Pak C18萃取小柱,Nova—Pak C18分析柱;流动相乙腈:甲醇:水(265:22:120);流速0.5ml/min;检测波长206nm。结果:该法回收率为98.6％,相对标准差(RSD)为2.4％,线性范围为0.5-40μg/ml,r=0.9993。结论:该法快速、敏感、高效,可用于环孢素A滴眼剂中环孢素A含量的测定。

基质分散固相萃取—高效液相色谱法检测鸡蛋中氯羟吡啶和二硝托胺药物残留

建立基于基质分散固相萃取(MSPD)—高效液相色谱法(HPLC)同步检测鸡蛋中氯羟吡啶和二硝托胺残留的快速、高效、经济的方法。鸡蛋样品经甲醇—乙腈混合溶液提取,利用200 mg十八烷基键合硅胶吸附剂(C18)和50 mg N-丙基乙二胺(PSA)混合分散固相萃取粉末净化,C18色谱柱分离,纯水—乙腈作为流动相进行梯度洗脱,外标法进行定性定量分析。结果表明,氯羟吡啶和二硝托胺在0.025~50.0μg/mL范围呈良好的线性关系(R^(2)>0.999),检出限为0.025 mg/kg和0.050 mg/kg,定量限为0.075 mg/kg和0.100 mg/kg。在0.1、2.5 mg/kg和5.0 mg/kg水平的加标回收试验中,氯羟吡啶的回收率为87.70%~101.78%,相对标准偏差(RSD)为0.66%~5.41%;二硝托胺的回收率为84.99%~97.11%,RSD为0.95%~5.34%。该方法简便、净化效果好、回收率高,适用于鸡蛋中氯羟吡啶和二硝托胺药物的同步定量检测。