利用RNA干扰技术抑制单胺氧化酶B基因的表达

目的确定并筛选用于特异静默单胺氧化酶B(Monoamine Oxidase B,MAOB)基因的干扰小RNA(siRNA)片段,建立RNA干扰技术平台。方法构建含单胺氧化酶B基因siRNA片段的pSilencer 1.0-U6 siRNA表达质粒,转染Hela细胞,用RT-PCR和定量PCR方法检测单氨氧化酶B mRNA的水平。结果所设计的两段siRNA片段均有干扰MAOB mRNA水平的作用,片段2的作用优于片段1,两个片段之间有一定的协同作用。结论选择的siRNA片段可以抑制Hela细胞单胺氧化酶B的表达。

一种优化的单胺氧化酶检测试剂及质量影响因素分析

建立一种优化的MAO检测试剂(GLDH法)分析方法。分析影响MAO检测试剂质量的主要因素,制备MAO检测试剂并对自制试剂的各项性能指标进行评价。结果 氨、试剂pH值、重金属离子是影响试剂准确度和活性的主要因素,优化后的MAO检测试剂的空白吸光度变化值为0.0003A/min,试剂的灵敏度为0.0009△A/min/U,准确度偏差<10%,批内精密度(CV)<5%、批间CV<8%,检测范围内线性相关系数(r)为0.9994且抗干扰性好。 结论 自研MAO检测试剂(GLDH)各项指标均达到预期的设计要求和临床检测要求,具有可实现自动化快速检测、准确度高、精密度好的特点,有良好的临床应用前景。

帕金森病病因蛋白质:α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响

目的:α-突触核蛋白是帕金森病的病因蛋白质之一,α-突触核蛋白与酪氨酸羟化酶具有相互作用。制备一个基因重组酪氨酸羟化酶,探讨α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的影响。方法:实验于2004-05/11在北京老年医学研究所神经生物研究室完成。将携带人酪氨酸羟化酶cDNA的基因重组质粒pGEX-TH转化BL21(DE3)细菌使其表达谷胱甘肽S转移酶-TH为标签的融合蛋白质,用谷胱甘肽-琼脂糖4B亲和层析法纯化基因重组酪氨酸羟化酶,用高压液相色谱(HPLC)法分析酪氨酸羟化酶活性,将α-突触核蛋白添加至酪氨酸羟化酶的酶促反应体系中。观察基因重组型酪氨酸羟化酶制备生成物特点,以及α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性的作用。结果:①基因重组酪氨酸羟化酶约占菌体可溶性蛋白组分的1%,纯化的酪氨酸羟化酶在SDS-PAGE上表现为单一条带,可催化L-酪氨酸发生羟化反应生成L-多巴。②随α-突触核蛋白浓度递增,酪氨酸羟化酶活性有不同程度的下降。结论:原核表达方法可制备纯化度较高的人基因酪氨酸羟化酶,α-突触核蛋白对酪氨酸羟化酶活性具有抑制作用。

卡维地洛对慢性心力衰竭大鼠心肌酪氨酸羟化酶表达的影响

目的:评价卡维地洛(Carvedilol)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响.方法:应用阿霉素腹腔注射制作CHF大鼠模型,根据干预药物的不同随机分为Carvedilol治疗组(CHF-C组,n=9),倍他乐克(Betaloc)治疗组(CHF-M组,n=9),CHF安慰剂治疗组(CHF-P组,n=9)和正常对照组(NC组,n=6).阿霉素应用第5周后采用灌胃给药途径,CHF-C组以Carvedilol0.25mg/kg,1次/d进行干预;CHF-M组以Betaloc0.25mg/kg,1次/d进行干预;CHF-P组和NC组加以食用淀粉0.25mg/kg,1次/d进行干预.10wk后透射电镜检测大鼠心肌超微结构,并采用RT-PCR和Western Blot方法检测大鼠心肌TH表达水平.结果:大鼠心肌THmRNA和蛋白表达水平CHF-C组明显低于NC组[(0.94±0.31)vs(1.18±0.39),(0.91±0.30)vs(1.32±0.41),均P<0.05];但明显高于CHF-P组[(0.94±0.31)vs(0.47±0.12),(0.91±0.30)vs(0.41±0.14),均P<0.05];也明显高于CHF-M组[(0.94±0.31)vs(0.66±0.20),(0.91±0.30)vs(0.58±0.19),均P<0.05].结论:CHF大鼠心肌TH表达水平明显下调,Carve-dilol治疗能够阻止CHF心肌TH下调,有助于改善CHF大鼠心肌交感神经重构.

心理应激对中枢多巴胺能神经元的影响及酪氨酸的干预作用

目的观察反复心理应激对中枢多巴胺(DA)系统的影响及酪氨酸(Tyr)的干预作用。方法用CommunicationBox模型对大鼠进行连续14天、每天30min的心理应激,并经饲料给予250、500、1000mg/kg三个剂量Tyr的干预。应激后对含中脑腹侧被盖区(VTA)、伏隔核(Nac)及前额皮质(mPFC)的脑组织切片进行酪氨酸羟化酶(TH)和Fos蛋白免疫组化染色。结果心理应激组在前囟后5·1mm处VTA部位TH阳性神经元数比正常对照组下降显著(P<0·01);在5·1、5·4、5·7mm处VTA部位,Tyr干预500、1000mg/kg组TH阳性神经元数升高。Fos蛋白在VTA、Nac、mPFC等三个部位均有较强的表达,且心理应激组较对照组明显升高,1000mg/kgTyr干预组较心理应激组明显降低。结论反复心理应激能够损害中枢DA神经元,导致TH阳性神经元数目减少,Fos蛋白表达增加,多巴胺前体物质Tyr的干预能够降低此种损害。

内脏脂肪组织传入神经阻断对心肌梗死后心脏功能和心脏神经重构的影响

目的探讨内脏脂肪组织(VAT)传入神经阻断对心肌梗死(MI)后大鼠心脏功能及心脏神经重构的影响。方法选择SPF级健康雄性SD大鼠30只,其中12只大鼠随机分为对照组和激活组,每组6只,激活组使用低浓度辣椒素(1 mmol/L)激活VAT传入神经,对照组注射等量生理盐水,监测实时血压心率30 min,计算激活前后血压及心率变化。另外18只大鼠随机分为假手术组、MI组、高浓度辣椒素阻断组(33 mmol/L),每组6只,采用结扎冠状动脉左前降支建立MI模型。MI造模成功后高浓度辣椒素阻断组使用高浓度辣椒素阻断VAT传入神经,假手术组和MI组注射等量生理盐水。2周后通过超声心动图测定心功能,氯化三苯四氮唑染色测定MI面积,检测心肌酪氨酸羟化酶(TH)密度。生化法检测心肌丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果激活组大鼠血压及心率变化显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。MI组大鼠MI面积、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、心肌TH密度、心肌MDA水平显著高于假手术组,左心室射血分数(LVEF)、心肌SOD水平显著低于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);高浓度辣椒素阻断组、LVEDD[(9.15±0.37)mm vs(10.1±0.85)mm]、LVESD[(6.33±0.40)mm vs(7.87±0.86)mm]显著低于MI组,LVEF[(67.04±3.34)%vs(47.10±3.89)%]、FS[(33.26±2.50)%vs(20.81±2.14)%]水平显著高于MI组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VAT传入神经激活可升高血压及心率;VAT传入神经阻断可降低大鼠MI面积,保护心脏功能并抑制心脏神经重构,可能通过降低氧化应激反应发挥作用。

Synphilin-1寡核苷酸对帕金森病酪氨酸羟化酶表达的影响

目的探讨Synphilin-1对帕金森病(PD)酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。方法50只SD大鼠随机分成5组,每组10只。PD组大鼠右侧黑质注入6-羟多巴3μL制作PD模型,反义组、同义组、错义组分别注入Synphilin-1反义寡核苷酸、同义寡核苷酸、错义寡核苷酸各3μL,正常对照组右侧黑质注入2 g/L抗坏血酸生理盐水。取鼠的术侧脑黑质制作切片,利用免疫组化方法检测Synphilin-1表达,利用免疫组化、Western blot、原位杂交方法检测TH的表达。结果与正常对照组比较,PD组Synphilin-1蛋白表达显著增加,TH蛋白和TH mRNA表达显著减少;与PD组比较,Synphilin-1反义组TH蛋白和TH mRNA表达显著增多。结论Synphilin-1可能通过影响TH的表达对帕金森病的发病机制产生影响。

酪氨酸羟化酶和GTP环水解酶-1基因修饰永生化成纤维细胞及其表达研究

目的 探讨酪氨酸羟化酶 (TH)和GTP环水解酶 1(GCH)基因修饰的永生化成纤维细胞的可行性和表达能力 ,为其混合移植治疗帕金森病 (PD)作准备。方法 SV40大T抗原转化成纤维细胞使其永生化。构建TH和GCH基因真核表达质粒并转染永生化成纤维细胞 ,利用免疫组化和RT PCR检测其在体内外的表达。结果 TH和GCH基因修饰的永生化成纤维细胞在体外可长期传代培养且可有效表达 ,脑内移植后TH基因至少可表达 8周以上。

小鼠α-syn基因敲除对高铁所致黑质酪氨酸羟化酶表达降低影响

目的探讨α-突触核蛋白(α-syn)基因敲除(α-syn^(-/-))小鼠是否能够抵抗高铁饮食造成的黑质(SN)酪氨酸羟化酶(TH)表达降低。方法实验分为野生型正常饮食组、野生型高铁饮食组、α-syn^(-/-)正常饮食组和α-syn^(-/-)高铁饮食组。其中高铁饮食组用含质量分数0.03羰基铁粉的鼠粮喂养小鼠3个月。采用蛋白质免疫印迹实验检测各组小鼠TH的表达。结果与野生型正常饮食组相比,野生型高铁饮食组小鼠TH蛋白表达水平降低(F=3.761,P<0.05);α-syn^(-/-)高铁饮食组和α-syn^(-/-)正常饮食组小鼠TH蛋白表达水平比较差异无显著性(P>0.05)。结论α-syn^(-/-)小鼠能够抵抗高铁负载造成的SN区TH表达下降,减轻铁对SN神经元的损伤。

肾上腺髓质增生大鼠模型酪氨酸羟化酶基因的表达

目的 :研究肾上腺髓质增生 (AMH)大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因表达水平。方法 :Wistar大鼠随机分为 2组 :正常对照组 (NC组 )和肾上腺髓质增生组 (AMH组 )。用利血平皮下注射制备肾上腺髓质增生大鼠模型。 6周后取出肾上腺组织 ,用免疫组织化学和原位杂交法分别测定该模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶蛋白质及mRNA表达 ,检测血清中的去甲肾上腺素 (NE)、肾上腺素 (E)和 2 4h尿 3 甲氧 4 羟基苦杏仁酸 (VMA)的含量 ,同时测量肾上腺髓质百分数以反映肾上腺髓质增生的程度。结果 :肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶蛋白质及mRNA表达均明显增强 ,血清中的NE ,E和 2 4h尿VMA的含量明显升高 ,肾上腺髓质百分数明显升高。结论 :肾上腺髓质增生大鼠模型肾上腺组织酪氨酸羟化酶基因表达增强。

重组慢病毒携带酪氨酸羟化酶对大鼠帕金森病模型的干预研究

目的利用携带大鼠酪氨酸羟化酶(TH)基因的重组慢病毒,对大鼠帕金森病模型进行基因治疗,评估基因疗法对帕金森病症状缓解和黑质神经元恢复的影响。方法 2014年11月—2015年12月,分离、培养和鉴定胎鼠原代神经元,抽提胎鼠原代神经元RNA、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)克隆大鼠TH(r TH)基因,将r TH基因构建至慢病毒质粒,包装r TH重组慢病毒。采用实时荧光定量RT-PCR、免疫荧光实验和Western blotting法体外检测大鼠成纤维细胞REF中r TH基因表达。通过脑内立体定位注射6羟多巴胺(6-OHDA)建立大鼠帕金森病模型,给予Lv-r TH重组慢病毒(Lv-r TH治疗组)、未携带基因的慢病毒Lv-NC(Lv-NC治疗组)及0.9%氯化钠溶液(对照组)注射大鼠纹状体和黑质。通过阿扑吗啡诱发旋转实验进行行为学评分,免疫组化进行神经元恢复评分。结果成功分离、培养了胎鼠原代神经元,成功克隆了r TH基因,并将r TH基因构建至慢病毒质粒,实时荧光定量RT-PCR、免疫荧光实验和Western blotting法检测大鼠成纤维细胞REF中均表达r TH基因。3组大鼠治疗前1周自发旋转速率比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组大鼠治疗0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周自发旋转速率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中治疗0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周,Lv-NC治疗组和Lv-r TH治疗组大鼠自发旋转速率较对照组增快(P<0.05);治疗2、3、5、6、8、9、10周,Lv-r TH治疗组大鼠自发旋转速率较Lv-NC治疗组减慢(P<0.05)。Lv-NC治疗组和Lv-r TH治疗组大鼠中脑黑质TH阳性神经元所占比例较对照组降低,Lv-r TH治疗组大鼠中脑黑质TH阳性神经元所占比例较Lv-NC治疗组升高(P<0.05)。结论通过脑内立体定位注射,将表达r TH基因的重组慢病毒递送至帕金森病大鼠纹状体和黑质能缓解帕金森病症状并恢复TH阳性神经元。

酪氨酸羟化酶缺乏症致多巴反应性肌张力不全1例

患儿,男,7个月,因“抬头不稳3月余”来院。患儿3月龄可抬头,稳定性欠佳,肘部支撑可,发作性震颤。近1月来,患儿自主活动减少,抬头不稳较前明显,翻身次数减少,四肢震颤较前明显,活动后易疲乏。体格检查:意识清,眼神交流可,前囟1 cm×1 cm大小,张力不高。双侧膝腱反射阳性,双侧巴氏征阳性,四肢肌张力高,余未见明异常。

复方地黄对AD大鼠脑组织中MAO、GS、r-GT活力的影响

目的 研究复方地黄对AD大鼠脑组织中MAO、GS、r-GT活力的影响。方法 D -半乳糖皮下注射 8周拟衰老 ,然后喹啉酸 (QA)海马CA1区定位注射制作AD模型 ;用复方地黄治疗 ,西药对照给予脑复康 ;采用Morris水迷宫法测试行为学 ;检测脑组织中单氨氧化酶MAO、谷氨酰胺合成酶GS、r-L -谷氨酰转肽酶r-GT活力变化。结果 两治疗组大鼠空间记忆能力较模型组大鼠有明显改善 ,两治疗组r -GT活力明显下降 ,GS活力明显升高 ,MAO活力也相应提高。结论 治疗AD大鼠复方地黄有明显的疗效。

次声刺激诱导大鼠延髓内儿茶酚胺能神经元FOS的表达

实验用抗ＦＯＳ蛋白和酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的免疫组织化学方法，观察大鼠暴露于８Ｈｚ，１２０ｄＢ的次声２ｈ后，延髓ＦＯＳ的表达情况及其与儿茶酚胺能神经元的关系。结果显示，在延髓内出现大量ＦＯＳ样免疫反应阳性神经元（ＦＬＮ），主要分布在延髓中尾段的孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构内；在抗ＦＯＳ和抗ＴＨ的双重免疫染色切片上，见到大约５０％的ＴＨ阳性神经元的胞核同时呈ＦＯＳ样免疫反应阳性，主要分布在腹外侧网状核和孤束核内侧亚核，说明在延髓内脏带有半数儿茶酚胺能神经元参与对次声刺激的反应。

平颤颗粒治疗帕金森病的药效学研究

目的:观察平颤颗粒对帕金森病(PD)模型鼠的行为及多巴胺能神经元的影响并探讨其治疗PD的作用机制.方法:运用6-羟基多巴胺两点注射法损毁大鼠右侧黑质致密部(SNC)和腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元,制备PD模型,将模型成功大鼠随机分为模型组、美多芭组、平颤颗粒低、中、高剂量3组以及联合用药组,另设正常对照组,每组10只,分别给予相应处理,连续5wk观察各组大鼠处理前及处理后3,4,5wk行为学的变化,通过脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色观察多巴胺(DA)能神经元的损伤程度,并采用高效液相色谱法观察脑黑质DA及3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)含量变化.结果:平颤颗粒高、中剂量组大鼠的旋转次数多于美多芭组及联合用药组(P<0.05),但均少于模型组(P<0.05或P<0.01),模型组大鼠与治疗前比较旋转次数有显著增加(P<0.05),正常组大鼠行为则无变化;免疫组化检测显示平颤颗粒高、中剂量组黑质TH阳性神经元数目高于模型组,但低于正常组(P<0.05);高效液相色谱-电化学检测结果表明,各组大鼠中脑DA及DOPAC含量均低于正常组,平颤颗粒高、中剂量组低于联合用药组及美多芭组(P<0.05),而平颤颗粒低剂量组与模型组比较差异无显著性.结论:平颤颗粒能部分改善PD大鼠旋转行为,并减轻黑质细胞的受损程度,提高下降的DA水平,从而对PD起到治疗作用.

COX-2对帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的毒性作用

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)对帕金森病(PD)模型小鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元的损害作用.方法:采用Lau法制作PD小鼠模型,通过行为学观察,免疫组织化学和免疫蛋白印记法,观察PD小鼠模型的行为学表现,黑质致密部COX-2免疫反应阳性细胞,DA能神经元数量和腹侧中脑(包括VTA和SN)COX-2,酪氨酸羟化酶(TH)表达水平的变化,并观察给予COX-2抑制剂后对上述变化的影响.结果:与对照组小鼠相比,PD组小鼠出现PD典型的行为学表现,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量分别下降约63%和77%.同时,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量有大幅升高.经COX-2抑制剂处理的PD小鼠行为表现较轻,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量仅下降约37%和41%.与单纯PD小鼠比较,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量明显下降.结论:COX-2对PD模型小鼠黑质内DA能神经元有毒性作用.

转基因烟草中过量生长素对叶片生长发育的影响

分别构建了iaaM、iaaM和ipt共表达植物转化载体,农杆菌介导转化烟草,RT-PCR鉴定转基因株系,ELISA方法分析叶片IAA、IPA和ZR含量.结果表明:叶片IAA含量高低依次为株系iaaM10、iaaM_ipt3和野生型;而细胞分裂素含量高低依次为iaaM_ipt3、野生型和iaaM10.随着内源IAA水平升高,气孔密度减小、保卫细胞长度增加、栅栏组织细胞增大和叶片厚度增加.讨论了生长素和细胞分裂素含量对叶片细胞生长发育的影响.

司来吉兰对帕金森病模型大鼠黑质纹状体TH及GDNF表达的影响

目的观察司来吉兰对帕金森病(PD)模型大鼠黑质纹状体内酪氨酸羟化酶(TH)及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响,探讨司来吉兰对多巴胺能神经元的保护作用及机制。方法 72只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和司来吉兰组,每组均设4 d和8 d 2个亚组,各12只。模型组和司来吉兰组采用颈背部皮下注射鱼藤酮制备PD模型,对照组皮下注射等体积葵花油。之后司来吉兰组每日灌胃咪多吡0.5 mg/kg,模型组和对照组每日灌胃等体积生理盐水,4 d和8 d组分别连续灌胃4 d和8 d。采用免疫组化法和Western blotting法检测黑质纹状体TH和GDNF表达水平。结果免疫组化法和Western blotting法检测结果均显示,对照组大鼠黑质纹状体可见多量TH阳性细胞表达和少量GDNF阳性细胞表达,8 d和4 d组差异均无统计学意义。模型组TH和GDNF阳性细胞表达均明显低于对照组(均P<0.05),8 d和4 d组差异均无统计学意义。司来吉兰组TH阳性细胞表达低于对照组而高于模型组,GDNF阳性细胞表达高于对照组和模型组(均P<0.05),且8 d组均高于4 d组(均P<0.05)。结论司来吉兰可减轻PD模型大鼠黑质纹状体多巴胺能神经元的损伤,其作用机制可能与增加GDNF表达有关。

胰岛素对大鼠脑缺血后记忆力损害的保护

目的:观察胰岛素对大鼠脑缺血后酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达及学习记忆能力的影响。方法:实验于2001-01/2003-05在解放军第四军医大学完成。①选用纯种健康雄性SD大鼠54只,随机数字表法分为3组:假手术组6只、缺血对照组24只、胰岛素治疗组24只。Y型迷宫箱(张家港生物医学仪器厂制造,MGM-2型)。②缺血对照组、胰岛素治疗组采用改良四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型。假手术组仅暴露双侧翼孔及颈动脉,各血管不行闭塞。③各组大鼠在麻醉状态下钻开颅骨,于前囟后1.2mm、左旁1.5mm处用微量加样器进针3.5mm穿刺脑室。成功后胰岛素治疗组于开放动脉夹行再灌注后立即注入1×105U/L的速效基因合成人胰岛素10μL,假手术组、缺血对照组注入等量生理盐水。④分别于全脑缺血再灌注1,3,5d,假手术组(1只/时相点)、缺血对照组(6只/时相点)、胰岛素治疗组(6只/时相点)大鼠断头取脑,行免疫组化染色,光镜下观察海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达的变化。⑤全脑缺血再灌注8周后,用Y型迷宫箱对假手术组(3只)、缺血对照组(6只)、胰岛素治疗组(6只)大鼠的学习记忆能力进行检测,以其测试时达到连续10次中9次正确反应所需的电击次数表示。并计数海马CA1区正常神经元。结果:实验选用纯种健康雄性SD大鼠54只,全部进入结果分析。①全脑缺血再灌注后不同时间点各组脑海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶的表达:假手术组海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶呈阴性表达。缺血对照组于缺血再灌注1d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达阴性;3,5d时均呈阳性表达。而胰岛素治疗组于缺血再灌注1,3,5d海马CA1区神经元酪氨酸羟化酶和多巴胺-β-羟化酶表达均呈阴性。②全脑缺血再灌注8周后各组大鼠学习记忆能力的变化:胰岛素治疗组记忆力损害较轻,达到9/10正确反应所需电击次数明显少于缺血对照组[(9.4±1.8),(18.6±2.7)次,P<0.01]。③全脑缺血再灌注8周后各组大鼠脑海马CA1区正常神经元计数结果:假手术组神经元形态正常,细胞核无固缩或溶解,正常神经元计数为(174.6±10.7)个/mm。缺血对照组神经元大部分死亡,正常神经元计数为(10.6±0.6)个/mm。胰岛素治疗组可见部分神经元死亡,死亡神经元胞体缩小或脱失,正常神经元计数为(113.4±9.1)个/mm,明显高于缺血对照组(P<0.01)。结论:胰岛素可通过调节儿茶酚胺合成与分解酶系的活性及含量来影响脑组织中单胺类神经递质的成分,纠正其代谢紊乱,减少神经元的凋亡,减轻脑缺血造成的学习记忆能力损害,从而发挥中枢的直接保护作用。

高铁饮食致C57BL/6小鼠黑质DA多巴胺能神经元选择性损伤的研究

目的研究高铁饮食对C57BL/6小鼠黑质(SN)和中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺能神经元的不同损伤。方法将C57BL/6小鼠随机分为高铁饮食组和正常对照组,利用免疫组织化学染色法及铁染色技术检测两组小鼠SN和VTA的酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数及铁水平的变化。结果高铁饮食组SN的TH阳性细胞数较正常对照组明显减少(t=16.31,P<0.001),铁染色阳性细胞数较对照组明显增高(t=13.01,P<0.001)。而两组小鼠VTA的TH阳性细胞数及铁染色阳性细胞数均无明显差别。结论铁在SN的选择性聚积参与了SN多巴胺能神经元的选择性损伤。