寒喘祖帕单煎配方与配伍合煎对16HBE细胞抗炎活性及非靶向代谢组学差异的研究

目的考察寒喘祖帕按照传统配伍合煎及单煎配方的抗炎活性,并采用UPLC-Q-TOF/MS研究非靶向代谢组学差异。方法通过体外脂多糖诱导16HBE炎症细胞,使用CCK-8法筛选出单煎配方组和配伍合煎组的剂量;采用逆转录酶聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术测定细胞中炎症因子IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达水平,并采用UPLC-TOF/MS技术对细胞进行非靶向代谢组学分析:分为正常组(16HBE细胞+培养基)、模型组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS)、寒喘祖帕单煎配方组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS+50μg/mL单煎配方)、寒喘祖帕配伍合煎组(16HBE细胞+培养基+0.1μg/mL LPS+50μg/mL配伍合煎)。以此探究寒喘祖帕颗粒发挥抗炎活性的相关代谢通路,寻找寒喘祖帕颗粒抗炎活性相关的差异代谢物。结果与正常组比较,模型组在给药浓度为0.1μg/mL时细胞生长存活率未受到限制,差异无统计学意义(P>0.05);配伍合煎组在给药浓度为0~400μg/mL范围内时,细胞存活率未受影响,浓度>800μg/mL时,细胞生长存活率下降,差异具有统计学意义(P<0.01);而单煎配方组在浓度<50μg/mL时,细胞生长存活率未受到限制,浓度≥100μg/mL时,细胞生长存活率下降,差异具有统计学意义(P<0.01);RT-PCR实验结果显示:与正常组比较,模型组的IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达上升,差异具有统计学意义(P<0.001),50μg/mL单煎配方较100μg/mL,IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达下降,差异具有统计学意义(P<0.001);在相同药物浓度干预下,与正常组比较,模型组的IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达上升,差异具有统计学意义(P<0.001),与模型组比较,单煎配方组和配伍合煎组可同时降低IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达,差异具有统计学意义(P<0.001);配伍合煎组与单煎配方组比较,配伍合煎组IL-6、IL-8 mRNA的表达较单煎配方低,差异具有统计学意义(P<0.05)。代谢组学分析结果筛选出模型组与配伍合煎组间的内源性差异代谢物68个,主要与色氨酸代谢、甘油磷脂代谢和嘧啶代谢等有关;模型组与单煎配方组间识别出内源性差异代谢物62个,主要与甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等有关。结论寒喘祖帕单煎配方与配伍合煎对LPS诱导的炎症细胞模型抗炎效果存在差异,非靶向代谢组学分析结果表明两种方式通过不同的代谢通路发挥抗炎活性。

舒肺压方单煎与合煎的成分差异及对肺动脉高压的影响

目的:探讨舒肺压方单煎、合煎成分特征及对肺动脉高压的改善作用。方法:通过超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)对舒肺压方单煎及合煎的成分进行定性、定量分析,明确不同煎煮法对舒肺压方成分特征的影响,并基于野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,观察舒肺压方单煎及合煎对肺动脉高压的改善作用。结果:舒肺压方单煎液及合煎液中均检出707种成分,单煎液与合煎液成分种类一致;其中644种成分含量无明显差异,63种成分含量具有显著差异;与单煎液比较,合煎液中有46种成分含量明显上调,17种成分含量明显下调;舒肺压方合煎较单煎可明显降低大鼠平均肺动脉压,改善肺部组织病理学损伤。结论:舒肺压方不同煎煮方式可影响其成分特征,合煎较单煎对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的改善作用更显著。

基于指纹图谱及多成分含量测定的泽泻汤单煎及共煎差异性研究

目的基于指纹图谱及多成分含量测定探讨泽泻汤各药味单煎及共煎的差异。方法建立HPLC指纹图谱,对共有峰进行归属与指认,同时测定3种指标性成分含量,并结合特征峰峰面积,分析白术单煎、泽泻单煎及共煎时化学成分的变化。结果15批样品共有14个共有峰,其中12个峰归属于泽泻,2个峰归属于白术,共指认了3个色谱峰,分别为白术内酯Ⅲ、23-乙酰泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇C;单煎、共煎23-乙酰泽泻醇B含量差异不大,单煎时23-乙酰泽泻醇C、白术内酯Ⅲ含量分别为共煎的1.5、3.0倍;共煎时仅有2个特征峰峰面积大于单煎。结论建立的指纹图谱和含量测定方法准确、稳定、可行,可用于泽泻汤的质量控制。泽泻汤各药味单煎、共煎前后无新物质生成,从总体上看各成分含量单煎优于共煎,可为该方配方颗粒的开发提供数据参考。

白虎汤单煎、合煎化学成分差异研究

目的考察白虎汤单煎、合煎化学成分差异。方法该药物冻干粉的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析采用Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.25 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子模式。建立化学成分数据库,采用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析鉴定差异性成分。结果合煎、单煎化学成分组成相同,但含量存在差异,新芒果苷、芒果苷、甘草苷、薤白苷J、异甘草苷、知母皂苷BⅡ、甘草皂苷A3、22-乙酰氧基-甘草皂苷、甘草皂苷G2、羟基甘草酸、甘草酸异构体是差异性成分。结论该方法可用于评价白虎汤传统汤剂、配方颗粒汤剂的化学一致性,为其临床合理应用提供参考依据。

基于UPLC指纹图谱的大承气汤单煎液与合煎液对比研究

目的建立大承气汤单煎液与合煎液UPLC指纹图谱,比较大承气汤单煎液与合煎液的差异。方法采用UPLC法,以Waters ACQUITYHSS T3柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm)为色谱柱,柱温为30℃,以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.25 mL/min,检测波长为225 nm,测定20批次大承气汤单煎液与合煎液指纹图谱,并采用相似度评价软件、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别(OPLS-DA)对结果进行分析。结果建立了大承气单煎液与合煎液UPLC指纹图谱,标定了19个共有峰,指认了其中11个峰;20批大承气汤单煎液、合煎液相似度均在0.90以上,PCA分析出4个主成分反映了19个共有色谱峰的信息;OPLS-DA分析筛选出影响大承气汤单煎液与合煎液差异的5个成分峰。结论本研究为大承气汤中药复方配方颗粒的制备工艺及质量标准的提高研究提供参考。

加减温经汤单煎与合煎颗粒治疗寒凝血瘀型功能性月经病的临床有效性及安全性研究

探析加减温经汤单煎与合煎颗粒治疗寒凝血瘀型功能性月经病的临床有效性及安全性。方法 统计研究者医院在2021-11至2023-2月时间段内,88例寒凝血瘀型功能性月经病病人看诊治疗纳入样本,依据病人就诊尾号随机盲目法分为2组,所有病人均给予加减温经汤药物进行治疗,其中对比组采取单煎颗粒治疗方式,创新组则给予合煎颗粒进行治疗,观察病人干预效果。结果 在中医症状评分方面,创新组各项指标较对比组康复更优,有一定距离差异(P<0.05)。结论 对于寒凝血瘀型功能性月经病病人,分别给予温经汤单煎与合煎颗粒治疗,其中合煎颗粒效果更加,可明显改善病人痛经以及月经不调等体征,减轻疼痛感,促进机体血流循环,取得令病人肯定和满意的效果,具有推荐价值。

川芎当归单煎共煎液中有效成分含量的变化

目的 比较川芎当归单煎共煎液中有效成分川芎嗪和阿魏酸含量的变化，初步探索二味中药配伍的变化规律。方法 采用RP—HPLC法。Waters symmetry C18色谱柱（4．6mm×150mm，5μm），枉温25℃；梯度洗脱，流动相A（1％冰醋酸），B相为甲醇；流速1mL·min^-1，检测波长298nm处检测。结果 川芎嗪回归方程Y=58.401ρ＋3.9318，r=0.9997，在0．25—25mg·L^-1范围内相关性良好，平均加样回收率91.00％，RSD为2.7％；阿魏酸回归方程Y=76．976ρ-12.375，r=0.9999，在0.35～35mg·L^-1范围内相关性良好，平均加样回收率98．17％，RSD为1.3％。结论 川芎当归共煎液中川芎嗪和阿魏酸含量比各单煎液中含量要高。本法简便，灵敏准确，可用于测定川芎嗪和阿魏酸的含量。

寿胎丸加味方合煎与单煎混合浓缩颗粒的临床等效性研究

传统的中药饮片能适应中医学的辨证施治,随证加减的治疗要求,使中医治疗学上的因人、因时、因地制宜的治疗大法在临床医疗中得以实施.但传统的中药饮片汤剂也存在着因煎煮技术不规范,致使有效成分未必得到,而挥发性成分容易丢失,汤剂质量不稳定或不能满足应急用药或体积较大,携带、贮存不方便等缺点.单味中药浓缩颗粒是在传统的中药饮片的基础上,用现代科学技术提取制成的新剂型,它既保留了中药饮片在临床医疗中能辨证施治,随证加减的特点,又保持了中药饮片原有的药性和药效,且具有配制简单,用量准确,服用量少,不需煎煮,携带方便,可随时应急使用等优点,有利于临床应用.但是,单味中药浓缩颗粒与中药饮片在临床疗效上有没有差异?单味中药混合浓缩颗粒能否代替传统的中药饮片汤剂在临床上应用?尚需要临床研究的依据.

大黄甘草汤单煎液与合煎液中蒽醌类化合物和甘草酸煎出量的变化

目的:比较大黄甘草汤单煎与合煎过程中蒽醌类化合物、甘草酸的含量变化,考察中药复方合煎与分煎的差异。方法:采用RP-HPLC法分别测定大黄甘草汤单煎液与合煎液中蒽醌类化合物和甘草酸煎出量。结果:蒽醌类化合物在单煎与合煎液中的含量无明显变化,甘草酸在合煎液中含量均明显高于单煎液。结论:大黄甘草汤使用时或制成颗粒剂时应采用大黄与甘草合煎的方式制备,否则会降低甘草酸的含量,影响大黄甘草汤的药效。

HPLC法研究当归-红花单煎及共煎液中有效成分含量的变化

目的研究和探讨当归-红花单煎及共煎液中有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化,初步探索两味中药配伍应用的变化规律。方法采用Phenomenex C18柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-0.05%磷酸水溶液p(H=2.45,25∶75)为流动相;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样温度:5℃;检测波长分别为320nm、403nm,测定追踪当归-红花共煎液与单煎液中主要有效成分阿魏酸和羟基红花黄色素A含量的变化。结果阿魏酸回归方程为Y=3.8372X+0.0219(r=0.9998),在0.5～10.0μg mL/范围内线性关系良好,平均加样回收率为92.68～101.13%,RSD小于3.2%;羟基红花黄色素A回归方程为Y=1.3647X-0.3714(r=0.9999),在5.0～100.0μg mL/范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.17～102.97%,RSD小于2.8%;当归红花共煎液中阿魏酸含量比当归单煎液中平均升高142.64%,羟基红花黄色素A含量比红花单煎液中平均升高145.37%。结论当归-红花共煎液中阿魏酸和羟基红花黄色素A的含量高于各单煎液中含量,两者配伍具有一定的合理性。该法快速、简便、准确,可为评价提取物中阿魏酸和羟基红花黄色素A的质量提供依据。

归脾汤单煎与合煎药理作用比较研究

归脾汤单煎和合煎可明显抑制小鼠自发活动次数，延长小鼠睡眠时间，两种煎剂的作用比较单煎优于合煎；两种煎剂可明显抑制由大黄所致脾虚小鼠胃排空作用，表现为甲基橙残留率上升，合煎优于单煎；对失血性贫血小鼠，两种煎剂均明显提高Ｈｂ含量，单煎优于合煎；对小鼠网状内皮系统吞噬功能无明显影响。

黄连与吴茱萸药对配方颗粒、单煎与共煎对幽门螺杆菌抑制作用的研究

目的比较黄连-吴茱萸药对配方颗粒、单煎与共煎体外抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)的作用,探讨药对配方颗粒与传统煎煮的等效性。方法采用麦氏比浊仪测定细菌浓度,绘制细菌生长曲线;采用琼脂稀释法制备含药血平板,测定黄连-吴茱萸不同配比(6∶1、5∶2、4∶3、3∶4、2∶5、1∶6)的配方颗粒剂和共煎液、黄连配方颗粒剂、吴茱萸配方颗粒剂、黄连单煎液及吴茱萸单煎液对H.pylori的最小抑菌浓度(MIC)。结果分别作用H.pylori 48 h后,琼脂稀释法测得黄连颗粒剂对Hp SS1的MIC是0.900 mg·mL^(-1),单煎液为0.869 mg·mL^(-1);吴茱萸配方颗粒剂对Hp SS1的MIC为1.140mg·mL^(-1),单煎液为1.118 mg·mL^(-1);黄连、吴茱萸配方颗粒剂与单煎(传统煎煮)对H.pylori生长的抑制作用差异没有统计学意义(P> 0.05);黄连∶吴茱萸=6∶1的配方颗粒剂对Hp SS1的MIC为0.810mg·mL^(-1),相应共煎液的为0.396 mg·mL^(-1);1∶6配方颗粒剂的MIC为1.800 mg·mL^(-1),相应共煎液的为0.818 mg·mL^(-1),提示黄连、吴茱萸不同配比的配方颗粒剂与共煎液中,黄连∶吴茱萸=6∶1对H.pylori的抑制作用最强,且共煎液抑制H.pylori的作用明显优于相应的配方颗粒剂,差异有统计学意义(P <0.01)。结论黄连-吴茱萸不同配比颗粒剂、单煎液和共煎液均能有效抑制H.pylori的生长,黄连∶吴茱萸=6∶1的抑制作用最强,共煎液抑制作用明显优于相应配比的颗粒剂,本实验为配方颗粒剂与共煎的等效性研究和临床应用提供了一定的实验依据。

RP-HPLC法测定生化汤单煎液与共煎液中阿魏酸的含量

目的比较生化汤单煎液与共煎液中阿魏酸的含量。方法采用反相高效液相色谱法,InertsilODS-3C18柱(250mm×4.6mm,5μm);甲醇-水(含1%乙酸)(45∶55,v/v)为流动相;流速1.0mL/min;检测波长为321nm;外标法定量。结果阿魏酸在0.6～180.0mg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为102.65%。结论共煎液中阿魏酸的含量明显高于单煎液(P<0.01)。

羌活胜湿汤单煎与合煎抗炎、镇痛作用比较研究

对比研究羌活胜湿汤单煎与合煎在相同剂量对抗炎、镇痛的作用，结果表明此方在蛋清性足肿胀实验中合煎高剂量比单煎高剂量效果占优，在其余指标上，合煎、单煎数值虽上下浮动。

四君子汤合煎液与单煎液中总黄酮的测定

目的 :对比四君子汤不同煎煮液中的总黄酮含量。方法 :采用聚酰胺柱色谱—紫外分光光度法 ,测定波长为 4 11nm,方法中芦丁在 4 0～ 2 0 0μg之间呈良好线性关系 (r=0 .9998) ,平均回收率为 89.35 % (RSD=2 .74 % ,n=5 )。结果 :四君子汤不同煎煮液的总黄酮含量有差异 ,合煎液中的含量较高。结论

当归补血汤、四物汤单煎与共煎提取物中化学成分的比较研究

当归补汤和四物汤单煎与共煎提取物中薄层定性分析和阿魏酸提取量比较，两者无明显差异，而单味颗粒剂的制备，应严格控制工艺条件。

地黄与白芍合煎及单煎对有效成分梓醇溶出量的影响

目的比较地黄单煎及其与白芍合煎液中有效成分梓醇含量的变化,初步探索2味中药配伍的变化规律。方法采用高效液相色谱法,选用Waters symmetry C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.01%磷酸水等度洗脱系统,流速1.0 m L/min,检测波长210 nm,柱温25℃。结果梓醇的回归方程为Y=270 054X-57 724,r=0.999 6,在0.225-7.2μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为101.15%,RSD=0.39%。地黄-白芍合煎液中梓醇含量比地黄单煎液平均升高18.66%。结论地黄-白芍合煎液中梓醇含量比单煎液高,合煎更有助于有效成分的溶出,二者配伍具有一定的合理性。

小柴胡汤单煎与合煎药理作用比较研究

小柴胡汤单煎和合煎均能显著抑制四氯化碳引起的小鼠血清SGPT增高 ,显著抑制蛋清引起的大鼠足肿胀 ,显著抑制酵母所致大鼠的体温升高 ,显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加 ,显著延长热板法测得的小鼠痛阈 ,单煎和合煎的作用无显著差别。

酸枣仁汤单煎与合煎中菝葜皂甙元含量的比较

用薄层色谱扫描法测定了酸枣仁汤单煎与合煎中菝葜皂甙元的含量,以苯-丙酮(9:1)为展开剂,香草醛-硫酸显色,测定波长为457nm,线性回归方程Y=1059.97+254.09x,r=0.9953,精密度RSD=2.27％,加样回收率98.5％,色斑最低检出限0.1μg。分析结果表明:酸枣仁汤单煎与合煎中菝葜皂甙元的含量变化不明显。

黄连与吴茱萸1∶1药对配方颗粒、单煎和共煎成分对比分析

目的通过考察黄连与吴茱萸药对配方颗粒与单煎液、共煎液的关键成分含量差异,探索药对配方颗粒与传统煎法的等效性。方法采用高效液相色谱法测定不同制法下6种生物碱含量,包括小檗碱、黄连碱、巴马汀、表小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱,并利用SPSS18.0进行统计检验。结果黄连生物碱存在明显差异,与共煎相比,单煎小檗碱含量显著升高100.52%,共煎(0.64±0.07)%/单煎(1.29±0.17)%(P<0.001),黄连碱[共煎(0.45±0.05)%/单煎(0.33±0.04)%]、巴马汀[共煎(0.48±0.03)%/单煎(0.36±0.03)%]和表小檗碱[共煎(0.30±0.03)%/单煎(0.23±0.03)%]则明显降低(P=0.020、0.002、0.017),而配方颗粒除了巴马汀(0.42±0.03)%略有降低(P=0.038),其他3种黄连生物碱没有明显差异(P>0.05);吴茱萸碱和吴茱萸次碱在共煎、单煎、配方颗粒3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄连和吴茱萸配方颗粒与共煎液差异不显著;与共煎液相比,单煎液黄连生物碱含量明显不同。