单甲氧聚乙二醇/牛血清白蛋白/5-氟尿嘧啶的制备及其抑瘤活性初探

目的:制备单甲氧聚乙二醇/牛血清白蛋白/5-氟尿嘧啶(mPEG/BSA/5-FU)偶联物,以延长5-FU的半衰期并降低其达峰浓度,同时初步探讨偶联物的抑瘤活性。方法:通过在5-FU的N-1处引入乙酸基后再制成活性酯并与BSA偶联,用mPEG修饰偶联物而得mPEG/BSA/5-FU。60只小鼠皮下注射H22肝癌细胞腹水建立实体瘤模型后随机分为生理盐水组、5-FU(25 mg·kg-1.d-1)组、BSA/5-FU组(以5-FU计25 mg·kg-1·d-1)及mPEG/BSA/5-FU(以5-FU计50、25、12.5 mg·kg-1·d-1)剂量组共6组,分别腹腔注射相应试药10 d后处死,计算各组抑瘤率等。结果:得到了偶联率为32.89%的BSA/5-FU,修饰度为48.37%的mPEG/BSA/5-FU。同等5-FU剂量下mPEG/BSA/5-FU组、5-FU组、BSA/5-FU组的抑瘤率分别为40.51%、33.63%、20.54%(P<0.01)。结论:制备mPEG/BSA/5-FU偶联物的偶联反应及修饰反应的工艺简单,抑瘤实验显示所得目标产物的抑瘤率明显高于5-FU组和BSA/5-FU组。

化学修饰对嗜水气单胞菌弹性蛋白酶活性及稳定性的影响

用10ku的截流膜超滤、30％～60％的硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤层析和阴离子交换层析，获得纯化的嗜水气单胞菌胞外弹性蛋白酶。SDS-PAGE显示，该酶是分子量约为33ku的单体蛋白。用活化的右旋糖酐及单甲氧聚乙二醇（MPEG）分别对纯化的嗜水气单胞菌弹性蛋白酶进行化学修饰。修饰后的酶与原酶相比，修饰酶保留了天然酶的活性，两种修饰酶活性均能保留在60％以上，用MPEG修饰酶的保留活性更高（85．5％），而且两种修饰酶在耐热性、耐酸性等方面都优于天然酶，但修饰后酶的最适pH没变。修饰酶较天然酶稳定，具有较高的实用意义。

顺铂隐形纳米粒的制备及在小鼠体内靶向性研究

目的:制备顺铂聚氰基丙烯酸正丁酯隐形纳米粒(cisplatin polybutylcyanoacrylate stleath nanoparticles,CDDP-PBCA-mPEG),并研究其经小鼠尾静脉给药后在小鼠体内的生物分布差异。方法:复乳法制备CDDP-PBCA-mPEG,以单甲氧具乙二醇进行表面修饰,建立高效液相色谱分析法,流动相选择甲醇-水(55:45),210nm处检测。昆明种小鼠60只,随机分为游离CDDP组和CDDP-PBCA-mPEG组,每组30只,经小鼠尾静脉按5mg/kg的剂量分别注射上述CDDP-PBCAmPEG或游离CDDP。每组于给药后15,30 min,1,2,6,12 h各处死5只小鼠,分别提取肝、肾、脾、心、肺、血浆样品,以高效液相色谱法测定CDDP的浓度。结果:CDDP-PBCA-mPEG平均粒径为170.9nm,平均包封率为60.1%,平均载药量为3.88%。12h以内CDDP-PBCA-mPEG组小鼠肝脏中的CDDP浓度显著高于游离CDDP组(P<0.01),而在肾脏中CDDP浓度显著低于游离CDDP组(P<0.0 1)。CDDP-PBCA-mPEG组小鼠肝脏和血浆中CDDP浓度在各时间段缓慢释放。结论:CDDP-PBCA-mPEG具有良好的肝靶向性,并具有缓慢释药的特点,降低了肾脏等脏器的药物分布,是治疗肝癌较理想的给药系统。