视觉发育关键期单眼剥夺对小鼠大脑不同区域星形胶质细胞的影响

目的研究视觉发育关键期单眼剥夺(MD)对小鼠上丘、海马、视皮层星形胶质细胞表达的影响。方法选取C57BL/6J小鼠18只,随机分为正常对照组(CON组)和MD组,每组各9只,在12 h/12 h昼夜循环环境中饲养。CON组不做处理,MD组小鼠在生后27 d右眼行MD,7 d后取材。逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测两组小鼠上丘、海马、视皮层胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达情况。Western blot检测两组小鼠上丘、海马、视皮层GFAP蛋白表达的变化。免疫荧光染色检测两组小鼠上丘、海马、视皮层GFAP和中枢神经特异性蛋白(S100β)共定位标记的星形胶质细胞数量。结果RT\|qPCR和Western blot检测结果显示,与CON组相比,MD组小鼠上丘、海马(锥体细胞1区、锥体细胞3区、齿状回区)、视皮层GFAP mRNA和蛋白表达均减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,与CON组相比,MD组小鼠上丘、海马(锥体细胞1区、锥体细胞3区、齿状回区)、视皮层GFAP和S100β共定位标记的星形胶质细胞数量均减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论视觉发育关键期对小鼠进行MD导致其上丘、海马、视皮层星形胶质细胞数量减少。

电针对单眼剥夺大鼠外侧膝状体Nogo-A/NgR表达的影响

目的 探讨电针对单眼剥夺大鼠外侧膝状体Nogo-A和NgR蛋白表达的影响。方法 从40只SPF级新生SD大鼠中随机选取28只,于出生14d行右眼睑缝合方法建立单眼剥夺模型,其中造模成功的24只随机分为剥夺组和电针组。电针组在左、右两侧“攒竹”、“风池”实施电针治疗。P-VEP检测各组大鼠P-VEP的P100波振幅及潜时值差异;HE染色观察LGN中神经元的病理学形态改变;免疫组化和Western blot方法检测LGN中Nogo-A和NgR蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,剥夺组细胞固缩;缝合眼P100波振幅显著降低、潜时值显著升高、LGN中的Nogo-A和NgR平均阳性细胞数增多、平均灰度值降低、相对表达量增加(P<0.01)。电针组与剥夺组比较,细胞形态明显改善;缝合眼P100波振幅显著升高(P<0.05),潜时值显著降低(P<0.01);LGN中Nogo-A和NgR蛋白的平均阳性细胞数减少、平均灰度值增加(P<0.05),相对表达量降低(P<0.01)。结论 电针可改善单眼剥夺后LGN中损伤的神经元细胞形态,其机制可能与抑制Nogo-A及NgR蛋白的过表达相关。

针刺特定穴位对单眼剥夺大鼠闪光视诱发电位的影响

目的:采用单眼剥夺大鼠模型作为低视力模型,探讨针刺特定穴对其闪光视诱发电位的影响。方法:将14日龄大鼠36只分为3组:正常发育组、剥夺对照组和剥夺针刺组。两剥夺组大鼠缝合其单侧眼睑31d后,建立单眼视觉剥夺大鼠模型,其中剥夺针刺组用电针刺激大鼠双侧的太阳穴、臂臑穴,检测3组大鼠不同时期的F-VEP,观察其变化。结果:发现针刺太阳穴、臂臑穴对单眼剥夺大鼠的F-VEP有一定改善。结论:针刺特定穴位后单眼剥夺大鼠的F-VEP的各值都有不同程度的改善,可以认为针刺对视力障碍的功能康复有一定客观的作用,但其作用机制有待做进一步研究。

NEP1-40对成年单眼剥夺弱视大鼠视皮层可塑性的再激活作用

目的:探讨NEP1-40对成年单眼剥夺弱视大鼠视皮层结构及功能可塑性的再激活作用及意义。方法:60只新生SD大鼠随机分为6组:正常对照组(Nor)、正常+PBS治疗组(Nor+PBS)、正常+NEP1-40治疗组(Nor+NEP)、模型对照组(MD)、模型+PBS治疗组(MD+PBS)及模型+NEP1-40治疗组(MD+NEP)。模型组大鼠于出生后21d缝合右侧眼睑建立单眼剥夺弱视模型,于45日龄时打开剥夺眼,对各组大鼠行闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测,确定单眼剥夺模型建立成功后,对需给药的各组大鼠按组别给予NEP1-40或PBS侧脑室注药治疗7d。于52日龄时对各组大鼠再次行F-VEP检测后处死动物,取左侧视皮层进行透射电镜观察突触超微结构变化。结果:45日龄时F-VEP检测示,MD组、MD+PBS组及MD+NEP组与Nor组比较,P波潜伏期延长,波幅降低(P<0.05);52日龄时F-VEP检测示,MD+NEP组与MD组、MD+PBS组大鼠比较,右眼F-VEP的P波潜伏期及波幅差异有统计学意义(P<0.05),而与Nor组比较差异无统计学意义(P>0.05);MD+PBS组与MD组大鼠比较,右眼F-VEP的P波潜伏期及波幅差异无统计学意义(P>0.05),而与Nor组比较差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察视皮层神经元突触界面结构参数:与Nor组比较,MD组大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元突触间隙增大,突触活性区长度缩短,突触界面曲率减小,突触后致密物厚度变薄(P<0.05)。MD+NEP组大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元突触界面结构参数的各项指标均较MD组、MD+PBS组明显改善(P<0.05),与Nor组相比除突触间隙外(P<0.05),其余各项参数差异无统计学意义(P>0.05)。MD+PBS组与MD组大鼠比较剥夺眼对侧视皮层神经元突触界面结构参数的各项指标差异均无统计学意义(P>0.05),而与Nor组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NEP1-40可使成年单眼剥夺弱视大鼠剥夺眼对侧视皮层神经元的突触界面结构参数得以恢复,F-VEP的P波潜伏期及波幅恢复至正常水平,重新"激活"被抑制的视皮层结构及功能可塑性,为成年弱视患者提供新的治疗途径奠定了理论基础。

细胞外信号调节激酶系统(ERKs)在正常发育和单眼剥夺大鼠视皮层蛋白表达的研究

为了研究正常发育和单眼视觉剥夺大鼠视皮层 ERK1/ ERK2基因蛋白质表达的变化 ,本研究建立了 SD大鼠单眼视觉剥夺模型 ,以多克隆抗 ERK1/ ERK2抗体和单克隆抗双磷酸化 ERK抗体检测出生后第 1、14、2 1、2 8、45 d和成年 (90 d)正常发育和单眼视觉剥夺 (14～ 45 d)视皮层 ERK1/ ERK2蛋白表达和活性改变。结果表明 ,出生后大鼠视皮层 ERK1/ ERK2蛋白表达逐渐增加 ,至 45 d达到高峰 ,此后下降至成年达稳定水平。磷酸化 ERK蛋白表达仅见于成年大鼠视皮层。单眼视觉剥夺导致ERK1/ ERK2蛋白表达减少。提示 ERK的蛋白表达依赖于正常的视觉输入信号的刺激 ,异常的视觉经验造成表达的明显下调 ,阻断正常的发育进程。说明 ERK1和

神经生长因子对单眼剥夺大鼠外侧膝状体nNOS表达的影响

目的观察单眼剥夺大鼠神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)治疗前后外侧膝状体背核(dorsal lateral geniculate nucleus,dLGN)神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)阳性神经元表达的改变。方法健康雄性SD大鼠,随机分为正常组(N)、单眼剥夺组(MD)、单眼剥夺脑室内注射NGF组(MD+NGF)和注射生理盐水组(MD+NS),每组随机分为2个亚组。剥夺自14 d龄开始,分别于28、42 d龄处死,脑室注射分别于14、28 d龄开始。采用SABC免疫组织化学染色法观察dLGNnNOS阳性神经元的表达。结果nNOS阳性神经元在dLGN散在分布,单眼剥夺和年龄增长可致其阳性神经元数密度降低。N组及MD+NGF组分别与MD组和MD+NS组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。42 d龄处死大鼠dLGN阳性神经元数密度N组与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4组42 d龄与28 d龄比较,dLGN阳性神经元数密度均有显著下降(P<0.05)。结论视觉发育具有可塑性,弱视治疗具有时效性。在视觉发育敏感期内,外源性提供NGF,可以促进dLGNnNOS增多,从而拮抗剥夺效应。

早期单眼剥夺对大鼠视网膜中BDNF及受体TrkB表达的影响

目的:探讨早期单眼剥夺对大鼠视网膜中脑源性神经生长因子(BDNF)及受体TrkB表达的影响。方法:40只新生SD大鼠随机分为6组:28日龄正常组、35日龄正常组、42日龄正常组、28日龄模型组、35日龄模型组及42日龄模型组,模型组大鼠于出生后21d缝合右侧眼睑建立单眼剥夺弱视模型,采用免疫印迹及免疫组织化学法检测视网膜中BDNF及受体TrkB的表达。结果:正常大鼠在出生后视觉发育关键期内,随年龄增长视网膜中BDNF及受体TrkB蛋白表达无明显变化。早期单眼剥夺后,模型组大鼠视网膜中BDNF及受体TrkB蛋白表达在28日龄立即呈现显著上升趋势,然而随着剥夺时间延长35日龄时表达剧烈下调,并持续至42日龄。BDNF表达在视网膜神经节细胞层、内核层及外核层,而TrkB受体仅表达在视网膜神经节细胞层。早期单眼剥夺可使28日龄大鼠视网膜神经节细胞层中BDNF及受体TrkB阳性细胞数目显著增多,但随着视觉剥夺时间延长,35日龄至42日龄时两者的阳性细胞数目呈现逐渐减少的趋势。结论:BDNF及受体TrkB的表达呈现一定的视觉经验依赖性,其参与了单眼剥夺弱视的发病。

P物质在单眼剥夺性弱视猫外侧膝状体中的表达

目的 检测 SP在单眼剥夺弱视猫 L GN中的表达 ,并探讨其在弱视发病中的意义。方法 采用免疫组化 APA法 ,对 7例正常猫和 8例单眼剥夺弱视猫 L GN SP免疫阳性神经元及神经纤维进行定位并定量研究其变化。结果 在单眼剥夺猫剥夺侧 L GN的A1层 SP表达显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 单眼剥夺可造成剥夺侧 L GN剥夺眼相应输入层次的 SP表达下降 。

小鼠视皮层发育过程中常规蛋白激酶Cγ亚型的动态表达及单眼剥夺对其表达的影响

背景弱视的发生与中枢神经系统可塑性变化有关，我们先前的研究发现synapsin参与视皮层的突触可塑性过程，而神经元特异性蛋白——常规蛋白激酶C1亚型（cPKC-γ）可能是synapsin的上游激酶之一，其在视觉发育可塑性中是否发挥或如何发挥作用尚未明确。目的观察随着小鼠发育其视皮层中cPKC-γ表达水平的动态变化以及异常视觉经验对cPKC-γ表达水平的影响。方法选取清洁级C57BL／6小鼠36只，分别于出生后（P）7、14、21、28、35、42d各选6只小鼠，取其两侧视皮层用于研究正常小鼠随鼠龄增加视皮层中cPKC-γ表达水平的变化。另外选取清洁级C57BL／6小鼠24只以随机数字表法随机分为发育期组和成年期组，每组12只。发育期组取6只P14小鼠行右眼上下睑缝合术以制备单眼剥夺（MD）模型，其余6只小鼠不进行干预作为对照，至P28取小鼠左右两侧视皮层；成年期组取6只P60小鼠以同样方法制备MD模型，其余6只不作干预作为对照，至P74取小鼠两侧视皮层。采用Westernbolt法检测小鼠两侧视皮层内cPKC-γ蛋白的表达变化。结果正常P7小鼠可见左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的微弱表达，表达量的相对值分别为（39．74＋11．22）％和（40．78±10．37）％，随鼠龄增加cPKC-γ蛋白的表达量逐渐增加；P21小鼠左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的表达量达峰值，分别为（138．68±15．73）％和（138．47±23．48）％，此后随鼠龄增加cPKC-γ蛋白的表达量逐渐减少并稳定。不同鼠龄正常小鼠视皮层中cPKC-γ表达量的总体比较差异有统计学意义（F鼠龄=57．174，P=0．000），各组小鼠左侧与右侧视皮层中cPKC-γ蛋白表达量的总体比较差异无统计学意义（F左事=0．059，P=0．809）。发育期组MD小鼠与成年期组MD小鼠间左右侧视皮层中cPKC-γ表达量的总体比较差异无统计学意义（F鼠龄=1．798，P=0．159），各组MD小鼠与正常对照小鼠间左右侧视皮层中cPKC-γ蛋白的表达量总体比较差异无统计学意义（F分组=0．104，P=0．749）。结论正常小鼠视皮层中cPKC-γ表达量的变化趋势与视觉发育可塑性关键期相一致；MD对小鼠视皮层中cPKC-γ蛋白表达量无明显影响，但是否对cPKC-γ蛋白的活性产生影响仍需进一步研究。

神经生长因子对单眼剥夺大鼠视觉中枢nNOS表达的影响

目的观察单眼剥夺（monocular deprivation，MD）大鼠神经生长因子（nerve growth factor，NGF）治疗前后视中枢神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）阳性神经元表达的改变。方法健康雄性SD大鼠，随机分为正常组（N组）、MD组、MD脑室内注射NGF组（MD＋NGF组）和MD脑室内注射生理盐水组（MD＋NS组）。剥夺自14d龄开始，每组随机分为2个亚组，分别于28d、42d龄处死，MD＋NGF组和MD＋NS组中的2个亚组分别于14d、28d龄开始行脑室内注射B—NGF或NS。采用免疫组织化学染色法观察视中枢nNOS阳性神经元的表达。结果nNOS阳性神经元在视皮层V1区Ⅱ～Ⅵ层和外侧膝状体背核散在分布。28d龄时，MD组Vl区nNOS阳性神经元数密度（除Ⅳ层外）、胞体截面积和树突总长度分别为（1．47±1．14）mm^-2、（201．84±37．00）μm2、（423．86±105．86）μm，较N组明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）；MD＋NGF组上述表达较MD组及MD±NS组明显增强，差异有统计学意义（P〈0．05），与N组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。42d龄时，MD组V1区胞体截面积减小、外侧膝状体背核nNOS阳性神经元数密度降低，与N组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；MD＋NGF组上述表达与MD组及MD4-NS组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论视觉发育具有可塑性，NO是影响视觉发育的一个环节。在视觉发育敏感期内，外源性提供NGF，可以促进视觉中枢nNOS增多，从而拮抗剥夺效应。

牛磺酸对单眼剥夺大鼠视觉中枢nNOS表达的影响

目的:观察牛磺酸喂养对单眼剥夺大鼠视觉中枢神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元表达的影响,探讨牛磺酸是否具有拮抗单眼剥夺所致的弱视效应。方法:新生健康雄性大鼠随机分成正常对照组、单眼剥夺组和单眼剥夺牛磺酸喂养组。免疫细胞化学染色观察剥夺眼对侧视觉中枢nNOS阳性神经元表达的变化。结果:①nNOS阳性神经元散在分布于视皮质V1区Ⅱ～Ⅵ层和外膝体背核,形态学均表现为中间神经元。②单眼剥夺2周后,剥夺对侧视觉中枢阳性神经元表达减弱,和单眼剥夺组比较,牛磺酸喂养组阳性神经元表达增强,但仍达不到正常。结论:在中枢神经系统发育中起重要作用的牛磺酸经由一氧化氮(NO)介导可以拮抗大鼠单眼剥夺性弱视,因此作为弱视治疗的可行药物有待深入研究。

单眼剥夺幼猫眼球轴长和屈光度的动态变化

目的研究视觉发育关键期单眼剥夺幼猫眼轴轴长及屈光状态的变化。方法动态计录了１５只健康和１８只单眼眼睑缝合幼猫眼轴长度和屈光状态的变化。结果剥夺眼较伴随眼眼轴增长。剥夺时间越长，眼轴增长越明显。１６周龄猫剥夺眼平均眼球轴长１６．２７±２．２８ｍｍ，与伴随眼比较（Ｐ＝０．００３）。屈光状态趋于正视，但眼轴增长与屈光值间无一致关系。结论形觉剥夺导致眼球眼轴增长和近视。结果进一步支持视觉剥夺影响眼球发育的学说。

单眼剥夺对金黄地鼠视觉中枢GABA神经元分布的影响

用免疫细胞化学技术观察了单眼剥夺后金黄地鼠视觉中枢GABA神经元分布的变化。结果表明:单眼剥夺后,金黄地鼠视皮层和上丘的GABA阳性神经元暂时性增多,但剥夺后六个月,其数目显著减少。在单眼剥夺前和剥夺后侧膝体中GABA阳性神经元数目没有明显差异。剥夺眼对侧视皮层GABA阳性神经元数比剥夺眼同侧视皮层GABA神经元数目少。单眼剥夺后视觉中枢GABA神经元类型及形态与剥夺前没有差别。晚期单眼剥夺也能引起视觉中枢GABA神经元数量和分布的变化。以上结果表明,单眼剥夺后视觉中枢抑制神经元的结构发生了变化。

AMPK-SIRT1通路介导的热量限制对成年单眼剥夺弱视小鼠视皮层可塑性的再激活作用

目的 探讨热量限制对成年单眼剥夺（MD）弱视小鼠视皮层可塑性的调节作用及对弱视治疗的促进作用,并探讨其可能的分子机制.方法 采用随机数字表法将50只清洁级健康新生昆明小鼠随机分为正常对照组（n=14）、MD＋自由进食组（n=18）和MD＋热量限制组（n=18）.选取MD＋自由进食组和MD＋热量限制组小鼠建立MD弱视模型,分别以自由进食和热量限制的方式进行饲养.检测各组小鼠视敏度和闪光视觉诱发电位（F-VEP）,透射电子显微镜下观察视皮层神经元突触超微结构,Western blot法检测视皮层中磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶α（p-AMPKα）、沉默信息调节因子1（SIRT1）蛋白的表达. 结果 从第1周开始,MD＋热量限制组小鼠体质量增加的百分比明显低于MD＋自由进食组.与MD＋自由进食组比较,MD＋热量限制组小鼠视敏度明显恢复,F-VEP示P100波潜伏期缩短、振幅增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.与正常对照组相比,MD＋自由进食组小鼠视皮层神经元突触间隙明显增宽,差异有统计学意义（P＜0.05）;MD＋热量限制组视皮层神经元突触间隙明显窄于MD＋自由进食组,差异有统计学意义（P＜0.05）.MD＋自由进食组视皮层神经元突触后致密物厚度明显薄于正常对照组和MD＋热量限制组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.Western blot检测结果显示,正常对照组、MD＋热量限制组和MD＋自由进食组p-AMPKα蛋白表达水平分别为0.89±0.03、0.94±0.02和0.74±0.02,SIRT1蛋白的表达水平分别为0.97±0.11、0.95±0.14和0.58±0.13,差异均有统计学意义（F=14.57,P=0.00;F=23.91,P=0.00）,其中MD＋热量限制组较MD＋自由进食组小鼠视皮层中p-AMPKα及SIRT1蛋白的表达显著升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）. 结论 热量限制能重塑成年MD小鼠视皮层神经元突触的超微结构,重新激活视皮层结构可塑性,改善其视觉功能,其机制可能与激活AMPK-SIRT1通路有关.

重复性眶周交流电刺激对单眼剥夺小鼠视皮层眼优势移动的影响

目的观察单眼剥夺小鼠视皮层对重复性眶周交流电刺激(r PACS)的反应,探讨r PACS对弱视小鼠眼优势移动的影响。方法将30只小鼠分为正常组、模型组、电刺激组,每组各10只。模型组、电刺激组采用单眼剥夺法建立单眼(右眼)弱视模型。造模后电刺激组右眼行r PACS 3 d;模型组及正常组不行r PACS。测定各组双眼图形视觉诱发电位(PVEP)、双眼PVEP信号P100波的振幅和潜伏期,计算对侧眼振幅/同侧眼振幅(C/I)值。结果模型组右眼PVEP P100波振幅低于电刺激组及正常组,亦低于左眼(P均<0.05);右眼PVEP P100波潜伏期长于电刺激组及正常组,亦长于左眼(P均<0.05);右眼C/I低于电刺激组及正常组(P均<0.01)。结论单眼剥夺后可使视觉发育敏感期内的眼优势柱从剥夺眼转移至对侧眼,r PACS可使眼优势柱从对侧眼转移回剥夺眼。

P物质在单眼剥夺性弱视猫视皮层中的表达

目的 检测 P物质 (SP)在单眼剥夺弱视猫视皮层中的表达 ,并探讨其在弱视发病中的意义。方法 采用免疫组化 APA法 ,对 7例正常猫和 8例单眼剥夺弱视猫视皮层17区 SP免疫阳性神经元及神经纤维进行定位并定量研究其变化。结果 在单眼剥夺猫剥夺侧视皮层 17区 SP表达显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 单眼剥夺可造成剥夺侧 17区剥夺眼相应输入层次的 SP表达下降 ,从而促进弱视的发生发展。

Neuritin基因在单眼剥夺成年大鼠视皮层中的表达

目的研究单眼剥夺(MD)视皮层neuritin mRNA的表达。方法35只Wistar大鼠分为正常对照组、MD组和反缝合(RS)组,缝合14日龄大鼠右眼睑建立MD模型,RS组大鼠缝合单眼至90日龄时进行反缝合,并持续暴露于灯光中6、12、24、48 h和1周,其余2组大鼠至90日龄时直接取左侧大脑视皮层,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测所有大鼠视皮层neuritin mRNA的表达情况。结果不同组大鼠视皮层中neuritin mRNA表达量的总体差异有统计学意义(F=19.235,P<0.05)。MD组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(t=-0.097,P<0.05);RS 6 h组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量明显高于MD组,差异有统计学意义(t=-0.028,P<0.05)。RS12、24、48 h组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量明显高于MD组,差异均有统计学意义(t=-0.046,t=-0.064,t=-0.065;P<0.05)。Neuritin mRNA的表达在实验24 h达到高峰,然后逐渐下降,但RS1周组与MD组neuritin mRNA的表达比较,差异有统计学意义(t=-0.037,P<0.05)。结论Neuritin mRNA在MD成年大鼠和RS不同时间大鼠视皮质表达呈动态变化,提示年龄超过视觉发育敏感期的MD成年大鼠的视皮层仍具有一定程度的可塑性。

氟西汀对单眼剥夺弱视大鼠视皮质神经细胞突触可塑性的影响及相关机制

目的探究氟西汀对单眼剥夺弱视大鼠视皮质神经细胞突触可塑性的影响与机制。方法60只SPF级雄性SD大鼠取10只为对照组,余50只构建单眼剥夺弱视大鼠模型。建模成功的50只大鼠依据随机数字表法分为阳性药组,模型组,低、中、高剂量组,每组10只。低、中、高剂量组分别腹腔注射5、10、20 mg/(kg·d)氟西汀;阳性药组灌胃左旋多巴80 mg/(kg·d);模型组、对照组腹腔注射等量生理盐水,各组给药28 d。检测各组大鼠P_(100)潜伏期、P_(100)幅值;观察各组大鼠视皮层神经元细胞突触超微结构变化;检测各组大鼠视皮层组织中ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB蛋白水平。结果模型组大鼠P_(100)潜伏期、突触间隙与突触致密厚度高于对照组,P_(100)幅值和视皮层组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-CREB/CREB低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。低、中、高剂量组大鼠P_(100)潜伏期、突触间隙与突触致密厚度低于模型组,P_(100)幅值和视皮层组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-CREB/CREB高于模型组;中、高剂量组大鼠P_(100)潜伏期、突触间隙与突触致密厚度低于低剂量组,P_(100)幅值和视皮层组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-CREB/CREB高于低剂量组;高剂量组大鼠P_(100)潜伏期、突触间隙与突触致密厚度低于中剂量组,P_(100)幅值和视皮层组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-CREB/CREB高于中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠视皮层神经元突触和髓鞘板层结构稍清晰。结论氟西汀能重塑单眼剥夺弱视大鼠视皮质神经细胞突触超微结构,激活视皮层结构可塑性,改善大鼠视觉功能,可能是通过激活ERK/CREB通路实现。

电针干预对单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮层突触结构及视觉诱发电位的影响

目的探讨电针刺激对单眼形觉剥夺Long Evans大鼠视皮层中蛋白激酶C zeta(protein kinase C zeta,PKCζ)、突触素(synaptophysin,Syn)及突触后致密蛋白95(postsynaptic density-95,PSD-95)表达影响,观察电针干预对弱视眼视觉电生理功能改变及初级视皮层中星形胶质细胞数量的改变。方法选取48只Long Evans大鼠新生幼鼠,随机分为正常对照组、弱视模型组、电针治疗组、假穴治疗组。正常对照组不做任何处理,弱视模型组、电针治疗组及假穴治疗组对幼鼠右眼单眼缝合建立弱视模型,电针治疗组和假穴治疗组在生后30 d开始电针刺激。采用闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,F-VEP)对各组大鼠右眼视觉电生理功能进行检测;应用蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)检测大鼠左侧初级视皮层V1M中PKCζ、Syn及PSD-95的表达量;借助免疫荧光技术和星形胶质细胞特异性标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)观察大鼠左侧初级视皮层V1M区中星形胶质细胞数量的变化。结果F-VEP结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组P2波幅明显降低(P<0.01),P2潜伏期可见延长(P<0.05),电针治疗组P2波幅略低(P<0.05),P2潜伏期差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组的P2波幅增加(P<0.05),P2潜伏期变短(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组PKCζ表达量减少(P<0.05),Syn及PSD-95表达均明显降低(P<0.01),电针治疗组PKCζ、Syn及PSD-95表达差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组PKCζ、Syn及PSD-95表达均明显增加(P<0.05);免疫荧光结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组中GFAP阳性面积显著减少(P<0.01),而电针治疗组中GFAP阳性面积差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组中GFAP阳性面积明显增加,但差异无统计学意义。结论电针刺激可以促进单眼形觉剥夺弱视大鼠初级视皮层中PKCζ、Syn及PSD-95的表达,增加弱视眼对侧初级视皮层V1M区的星形胶质数量,调节突触可塑性,改善大鼠弱视眼视觉电生理功能。