束缚应激与单程长时应激致小鼠焦虑障碍的应激参数比较与优化

目的通过比较与优化束缚应激(restraint stress,RS)和单程长时应激(single-prolonged stress,SPS)法致小鼠焦虑障碍的应激参数,筛选一种重复性好、用时少且操作简易的方法建立小鼠焦虑障碍模型,为深入研究焦虑障碍的发病机制提供可靠的实验动物模型建立方法。方法①将C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白对照组、RS 14 d组和SPS 14 d组。RS造模方法为:每天给予RS 2 h,连续应激14 d;SPS造模方法为:每天先给予小鼠2 h RS,之后立即强迫游泳20 min,休息15 min后用异氟烷麻醉放回原笼,连续应激14 d。②将C57BL/6J雄性小鼠分为空白对照组和不同时长RS(2、4、6或8 h/d)7 d组;RS造模方法为:每天分别给予RS 2、4、6或8 h,连续应激7 d。造模期间每天观察小鼠体质量的变化。造模结束后,通过旷场实验检测小鼠自主活动和在中心区域停留时间,高架十字迷宫实验检测小鼠进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间,观察小鼠的焦虑样行为变化。结果①与空白对照组相比,RS 14 d组和SPS 14 d组小鼠在应激第7~14天期间体质量均显著降低(P<0.01),其他各项行为学指标无明显变化;②在2、4、6或8 h/d不同时长RS连续应激7 d实验中,与空白对照组相比,RS 8 h组小鼠应激第7天的体质量显著降低(P<0.01),RS 2、4、6和8 h组小鼠应激第7天的自主活动和在旷场中心区域停留时间无明显变化,RS 2、4和6 h组小鼠在应激第7天高架十字迷宫内停留时间显著下降(P<0.05)。结论每天RS 2、4或6 h连续应激7 d可能成功建立小鼠焦虑障碍模型,其中每天RS 2 h用时少、重复性好、稳定性高,是理想的建立焦虑障碍模型的应激参数。

内质网应激与创伤后应激障碍

内质网应激启动非折叠蛋白反应,使处于结合状态的内质网三条通路PERK,IRE1及ATF6与内质网伴侣蛋白分离,从而活化三条通路,启动细胞凋亡路径。利用创伤后应激障碍动物模型单程长时刺激(single-prolonged stress,SPS),研究发现SPS早期,内质网应激启动内质网伴侣蛋白,对神经细胞起到保护作用。但是在中后期,随着内质网伴侣蛋白对非折叠蛋白纠正能力的下降,加速活化三条径路,启动细胞凋亡。

PRE-084上调BDNF-TrkB改善PTSD大鼠焦虑样行为

目的探讨腹腔注射Sigma 1受体激动剂PRE-084对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠焦虑样行为及额叶BDNF和TrkB表达的影响。方法利用单程长时应激(SPS)制备PTSD大鼠模型,将PTSD大鼠分为4组:vehicle、PRE-084、SPS+vehicle和SPS+PRE-084组;通过旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组大鼠焦虑样行为;取材各组大鼠额叶,利用免疫荧光染色和Western Blot检测BDNF和p-TrkB蛋白及m RNA表达情况。结果行为学检测结果显示,腹腔注射PRE-084可以改善PTSD大鼠焦虑样行为;免疫荧光染色和Western Blot结果显示,SPS使大鼠额叶BDNF及p-TrkB蛋白表达水平降低,此作用可被PRE-084逆转。结论腹腔注射Sigma-1受体激动剂PRE-084改善PTSD大鼠焦虑样行为可能与上调BDNF-TrkB信号通路相关。

腹腔注射PRE-084对PTSD大鼠额叶神经元损伤的影响

目的探讨腹腔注射Sigma-1受体激动剂PRE-084对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠额叶神经元损伤的影响。方法利用单程长时应激(SPS)制备PTSD大鼠模型,将PTSD大鼠分为4组:vehicle、PRE-084、SPS+vehicle和SPS+PRE-084组;连续注射PRE-084 7d后,取材各组大鼠额叶,利用免疫荧光染色检测各组大鼠额叶Neu N表达情况,免疫荧光染色、Western blot检测p-ERK蛋白表达情况。结果免疫荧光染色结果显示,PTSD大鼠额叶神经元数量降低,腹腔注射PRE-084可以显著改善PTSD引起的神经元损伤;Western blot结果显示,PTSD大鼠额叶p-ERK表达水平降低,PRE-084可以显著升高p-ERK蛋白水平。结论腹腔注射Sigma-1受体激动剂PRE-084改善PTSD大鼠额叶神经元损伤可能与上调ERK信号通路相关。