一种新颖的棉铃虫单粒包埋核多角体病毒表达系统

将含有低拷贝数的mini Freplicon、一个卡那霉素抗性基因和一个lacZα基因 8.6kb的DNA片段经同源重组置换到棉铃虫核型多角体病毒基因组中的多角体蛋白基因内 ,构建了既能在E .coli内复制又可在昆虫细胞内复制形成完整的病毒粒子棉铃虫核型多角体病毒Bacmid(HaBacmid HZ8)。另外将HaSNPV的多角体蛋白基因和P10启动子序列取代 pFastBacDual质粒上的AcMNPV的多角体启动子序列和P10启动子序列 ,构建插入HaSNPV多角体蛋白基因和P10启动子序列的HapFastBacPhP10供体质粒。利用HapFastBacPhP10供体质粒将eGFP基因转位至HZ8的Tn7附着位点上 ,随后将含有eGFP基因的重组HaBacmidDNA转染至HZAm1细胞内。转染 5d后 ,细胞核内能形成典型的多角体 ,在萤光显微镜下观察到细胞内显示出强烈的绿色萤光。

一株单粒包埋类型的红缘灯蛾NPV

发现一株新的ＡＩＮＰＶ，与已报道的明显不同。其多角体呈三角形，直径１．０～１．２４μｍ，单粒包埋型，每多角体内含５２～７８个大小为２９８～３７５×４１～５６ｕｍ的病毒粒子。核衣壳大小为２８０～３５８×３６～４５ｕｍ。该病毒株具较强毒力，以２×１０６～２×１０７ＰＩＢ／ｍｌ的浓度感染３龄幼虫，６ｄ死亡率达８４．２～９２％，ＬＣ５０为１×１０４ＰＩＢ／ｍｌ，浓度与死亡率的回归方程为ｙ＝３．２８＋０．４３ｘ。

棉铃虫核型多角体病毒基因型体内分离

用作杀虫剂的棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒的基因型存在着异质现象。采用体内纯化基因型的方法，从低剂量ＨａＳＮＰＶ感染的单条棉铃虫死虫中分离到两株具有纯基因型的病毒，其ＤＮＡ限制性内切酶图谱彼此存在差异，但都没有亚克分子带。实验结果表明，该两株病毒为纯基因型病毒。

泡桐灰天蛾颗粒体病毒形态结构的初步研究

应用电子显微镜技术对泡桐灰天蛾颗粒体病毒进行观测,结果表明,其包涵体呈椭圆形或卵圆形,大小较均匀,为224～276nm×373～522nm;病毒粒子呈香蕉状,大小约为66nm×269nm;包涵体蛋白结构呈晶格状点线型,病毒粒子单粒包埋。病毒粒子直接释放的核酸呈开环或闭环状分子,为双链DNA,平均长度约为23.86×10^(-6)m,分子量约为47×10~6道尔顿。