CT灌注成像辅助诊断单纯疱疹病毒1型脑炎一例

单纯疱疹病毒性脑炎又称急性坏死性脑炎,是由疱疹病毒感染引起的脑实质炎症。CT灌注成像(CTP)可快速显示脑部组织灌注异常及脑组织受损情况,常被用于脑卒中的诊断,而被用于辅助诊断脑炎的文献报道较少。该文报道了1例通过CTP辅助诊断单纯疱疹病毒1型脑炎的59岁男性患者。该例患者起病急,突发右侧肢体抽搐伴发热,且伴有精神症状,不能配合完成MRI,故急行头颅CTP,结果显示其左侧颞叶灌注较右侧增加,不排除病毒性脑炎的诊断,遂于入院12 h内泵注阿昔洛韦抗病毒治疗及予其他对症治疗,患者病情逐渐好转。入院后3 d脑脊液病原体二代测序结果回报,明确诊断为单纯疱疹病毒1型脑炎。

KIR MMP-9基因多态性与单纯疱疹病毒1型脑炎易感性的相关性

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因多态性与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)脑炎易感性的相关性。方法选取2018年1月至2020年3月河南省南阳市中心医院收治的HSV-1脑炎患儿75例为研究对象,并作为研究组。另选取经脑脊液检测为非病毒性脑炎的患儿75例为对照组,对比两组KIR等位基因(2DL1、2DL2、2DL3、2DL5、3DL1、3DL2、3DL3、2DL4、2DS1、2DS2、2DS3、2DS4、2DS5、3DS1)和MMP-9基因1562C/T多态性中野生型(CC)、杂合子突变型(CT)、突变纯合型(TT)的分布情况,采用logistic回归模型分析KIR、MMP-9基因多态性与HSV-1脑炎易感的关系。结果研究组KIR等位基因中的2DL1和3DL1基因频率高于对照组(P<0.05),研究组KIR等位基因中的2DS2、2DS4、2DS5和3DS1基因频率低于对照组(P<0.05);MMP-9基因1562C/T多态性中,CC基因频率低于对照组,TT基因频率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);logistic回归模型结果显示,2DL1(OR=6.25)、3DS1(OR=1.69)和TT(OR=2.68)能够增加HSV-1脑炎的易感性,而2DS2(OR=0.86)、3DL1(OR=0.57)、2DS4(OR=0.24)、2DS5(OR=0.19)和CC(OR=0.74)可能作为保护因素降低HSV-1脑炎的易感性。结论KIR等位基因和MMP-9基因1562C/T多态性与HSV-1脑炎的易感性相关。

抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测

目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.01560、0.03125、0.06250、0.12500、0.50000、和1.00000 g·L^(-1))作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力。结果:制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1024000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L^(-1);IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.50000g·L^(-1)及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变。结论:成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发。

家庭聚集性单纯疱疹病毒1型感染3例

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type,HSV)1型和2型(分别为HSV-1和HSV-2)引起多种疾病,包括唇疱疹、生殖器疱疹、疱疹间质角膜炎、脑膜炎和脑炎。HSV-1和HSV-2通过密切接触在个体之间传播。大多数人在生命早期通过口腔黏膜获得HSV-1,而HSV-2感染发生较晚,通常通过性传播;HSV与宿主之间的相互作用,特别是与免疫系统的相互作用,决定了感染的结果。HSV感染后可表现为无症状、轻微的亦或是危及生命的。感染病毒后潜伏期长短、何时再激活、及侵犯某一部位与宿主的免疫状态密切相关[1];HSV可通过飞沫、口腔、呼吸道等方式传播,HSV在家庭成员中传播、感染不少见,但在相近时间段发病却不常见,我们报道3例家庭聚集性HSV感染的病例,旨在提高对该病的认识,减少误诊和漏诊。

精神分裂症合并1型单纯疱疹病毒性脑炎个案报道及文献复习

单纯疱疹病毒性脑炎是病毒直接侵犯脑组织所致的中枢神经系统感染性疾病,病变脑组织可出现水肿、坏死、软化等改变。病毒通过嗅神经或三叉神经选择性侵犯额颞叶等部位,引起一系列的临床表现。弥漫性脑损害时,更易引起精神病样症状。约1/3~1/2病例以精神障碍为首发或唯一症状,早期易误诊为其他精神疾病。该病例病史长达几十年,突然出现精神行为异常加重,且伴有意识改变,在外院长期诊断为“精神分裂症”,病情变化前规律服用抗精神病类药物治疗,入院后完善腰椎穿刺获取脑脊液送检,最后经基因检测证实为HSE 1型感染,明确诊断精神分裂症合并1型单纯疱疹病毒性脑炎。

单纯疱疹病毒1型感染致Mollaret脑膜炎继发癫痫发作:1例报道并文献综述

目的:报告1例单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染致Mollaret脑膜炎(Mollaret’s meningitis)继发癫痫发作的病例,旨在提高临床医生对该病的认识。方法:回顾性分析我院确诊的1例Mollaret脑膜炎患者的临床资料,并结合相关文献进行总结。结果:患者临床以反复发热伴头疼,及继发癫痫发作为特点,脑脊液二代测序(next-generation sequencing, NGS)检查发现HSV-1核酸序列阳性,诊断为Mollaret脑膜炎,经抗病毒及对症治疗1周后症状完全缓解。结论:Mollaret脑膜炎是临床少见疾病,由HSV-1感染更是少见,易误诊、漏诊,应提高早期识别率,减少不必要的检查及治疗。

二代测序诊断幼儿单纯疱疹病毒1型脑炎一例

患儿女,8月龄.因＂发热12 d,间断抽搐8 d,睡眠增多6 d＂于2017年5月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊.入院12 d前出现发热,热峰2次/d,最高体温39.6℃,伴有轻微咳嗽,无抽搐,无呕吐、腹泻,无嗜睡.就诊于当地医院,血常规提示白细胞大致正常,淋巴细胞比例为主,予中成药口服4 d,热峰温度较前增高,每日热峰4~6次/d.入院前8d高热时抽搐1次,表现为呼之不应,双眼凝视,右下肢抖动,无牙关紧闭、口周发绀及大小便失禁等,数秒钟自行缓解,1h后再次出现抽搐1次,表现同前,于当地医院镇静后1 min缓解,复查血常规提示白细胞升高,中性为主,予＂头孢曲松＂静脉滴注2 d,发热情况无好转.入院6 d前出现嗜睡,奶摄入量较少,偶有烦躁,完善腰椎穿刺检查提示脑脊液常规：有核细胞0;脑脊液蛋白570 mg/L,糖和氯化物正常范围;予人免疫球蛋白5 g/d共2 d,患儿嗜睡同前,间断烦躁,仍有间断抽搐,发作形式同前,伴有间断肢体抖动.

阿昔洛韦治疗单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎小鼠血清一氧化氮、白细胞介素-1β水平变化及病理学观察

目的探讨阿昔洛韦治疗单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)小鼠血一氧化氮(NO)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平变化及病理学改变。方法建立单纯疱疹病毒-1(HSV-1)感染的小鼠病毒性脑炎模型,将模型分为未治疗和阿昔洛韦治疗组,同时设正常对照组,比较各组小鼠病死率、血清NO、IL-1β水平变化和电镜下小鼠神经细胞形态结构变化。结果模型组小鼠脑组织HSV-1DNA均为阳性,正常对照组为阴性;电镜下模型组神经细胞内可见HSV-1病毒颗粒;阿昔洛韦治疗组小鼠死亡率、血清NO及IL-1β水平均比未治疗组明显降低,差异有显著性(Pa<0.01);电镜下阿昔洛韦治疗组小鼠神经细胞,髓鞘病变均较轻。结论阿昔洛韦可能通过降低单纯疱珍病毒Ⅰ型脑炎小鼠血清NO、IL-Iβ水平,减轻神经细胞的炎症反应及细胞因子引起的神经毒性作用,达到对神经细胞的保护作用。

更昔洛韦治疗单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎小鼠血清一氧化氮、白细胞介素-1β的变化及病理学观察

目的:探讨更昔洛韦治疗单纯疱疹病毒性脑炎小鼠血一氧化氮、白细胞介素-1β水平变化及病理学改变。方法:建立单纯疱疹病毒-1感染的小鼠病毒性脑炎模型,将模型分为模型组、阿昔洛韦治疗组和更昔洛韦治疗组,同时设正常对照组,比较各组小鼠病死率、血清一氧化氮、白细胞介素-1β水平变化和电镜下小鼠神经细胞形态结构变化。结果:模型组小鼠脑组织单纯疱疹病毒-1DNA均为阳性,正常对照组为阴性;电镜下模型组神经细胞内可见单纯疱疹病毒-1病毒颗粒;阿昔洛韦治疗组和更昔洛韦治疗组小鼠死亡率、血清一氧化氮及白细胞介素-1β水平均比未治疗组明显降低,差异有显著性(P﹤0.01);更昔洛韦治疗组白细胞介素-1β下降水平较阿昔洛韦治疗组明显(P<0.01)。电镜下更昔洛韦治疗组小鼠神经细胞,髓鞘病变均较轻。结论:更昔洛韦可能通过降低单纯疱珍病毒-Ⅰ型脑炎小鼠血清一氧化氮、白细胞介素-1β水平,且降低白细胞介素-1β水平的作用较阿昔洛韦明显,减轻神经细胞的炎症反应及细胞因子引起的神经毒性作用达到对神经细胞的保护作用。

1例单纯疱疹病毒性感染合并抗神经元及胶质细胞抗体阳性脑炎报道

本文报道了1例10月龄男性患儿,该患儿以“肢体无力、反复抽搐、意识不清”起病,脑脊液病原高通量检查示Ⅰ型人类疱疹病毒阳性,诊断病毒性脑炎,经抗病毒、免疫支持、防治癫痫及综合康复等治疗好转出院;起病1个月后患儿症状加重,头颅磁共振示病灶范围较前扩大,查血清抗神经元及胶质细胞抗体阳性,增加诊断自身免疫性脑炎,予激素、丙种球蛋白免疫治疗及康复治疗后好转出院,随访病情无反复,头颅磁共振示病灶范围无继续扩大。

1型单纯疱疹病毒性脑炎患儿的炎性细胞因子水平

目的探讨1型单纯疱疹病毒(HSV-1)性脑炎患儿炎性细胞因子的表达情况。方法收集2014年5月至2015年4月因病毒性脑炎在郴州市儿童医院(郴州市第一人民医院北院)住院的183例患儿血液和CSF标本。使用PCR法检测患儿CSF标本中的HSV-1,并通过悬液芯片技术检测HSV-1脑炎患儿血液和CSF标本中的17种细胞因子。结果在183例病毒性脑炎患儿中检测出27例(14. 8%) HSV-1阳性。27例HSV-1脑炎患儿CSF中的IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达水平明显高于血浆中的表达水平; CSF中的IL-17和巨噬细胞炎症因子-1β(MIP-1β)表达水平明显低于血浆中的表达水平(均P <0. 05)。Pearson相关分析结果显示,血浆和CSF中干扰素-γ(IFN-γ)分别与HSV-1脑炎的病程呈正相关(r=0. 920,P=0. 000; r=0. 961,P=0. 039);血浆和CSF中IL-10分别与HSV-1脑炎的病程呈负相关(r=-0. 990,P=0. 029; r=-0. 816,P=0. 048)。结论 IL-6、IL-8、IL-17、GM-CSF、MCP-1和MIP-1β可能在HSV-1脑炎的免疫病理机制中起重要作用。Th1细胞因子(IFN-γ)、Th2细胞因子(IL-10)失衡可能对HSV-1脑炎的进展起重要作用。

余甘子提取物体外抗单纯疱疹病毒1型和2型的初步研究

目的从余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物3种提取物体外筛选抗单纯疱疹病毒1型和2型的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、空斑减数法,判断药物的毒性及其抗病毒效应。结果余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物对于单纯疱疹病毒1型的半数抑制浓度分别为25.28,66.17,100.94μg/ml;余甘子的3种提取物对于单纯疱疹病毒2型的半数抑制浓度分别为31.70,180.3,112.1μg/ml。结论余甘子3种提取物在体外对单纯疱疹病毒1型和2型均有一定的抑制作用。

千金藤素抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)初探

目的 :体外测定千金藤素抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用 ,为筛选新型抗病毒药物提供参考依据。方法 :用不同稀释度的千金藤素抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型对Vero细胞的感染作用 ,4 8h后观察细胞病变 (CPE)效应。结果 :千金藤素能明显抑制HSV 1对Vero细胞的致病变作用 ,使细胞存活率升高。结论 :千金藤素有较显著的抗HSV 1的作用 ,且抗病毒作用是多方面的 ,是一种具有潜在开发前景的药物。

白介素2基因佐剂协同单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗免疫诱导的特异性免疫应答

目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定其表达。动物实验分为pcDNA3.1空载体对照组、pgD单独免疫组和pgD+pIL-2联合免疫组3组,具体为通过肌肉免疫接种BALB/c小鼠3次,间隔2周,每次接种质粒100μg,第3次免疫后2周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体滴度并做亚型分析,利用3H-TdR掺入法进行Th细胞增殖实验,ELISA试剂盒检测Th细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓肿胀实验检测迟发型超敏反应(DTH)反应;HSV-1病毒角膜攻击后,裂隙灯显微镜观察角膜上皮病变。结果与pgD单独免疫组相比,pIL-2的协同免疫可以显著提高IgG2a抗体滴度、Th细胞增殖反应和DTH反应,Th细胞分泌IL-2和IFN-γ水平也显著提高,IL-10水平明显下降。在动物保护实验中,pIL-2的协同免疫明显增强了pgD疫苗在病毒攻击时对角膜的保护效果。结论IL-2cDNA的协同免疫可以显著提高pgD核酸疫苗诱导的体液免疫和细胞免疫应答水平,增加核酸疫苗的免疫保护效果。

单纯疱疹病毒1型糖蛋白B基因疫苗的构建

目的 :构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗 ,探讨单纯疱疹病毒 1型糖蛋白 B(HSV-1gp B)基因作为基因疫苗的可能性。方法 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4毒株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,定向插入真核表达质粒 pc DNA3载体中 ,构建出重组真核表达质粒 pc DNA- gp B,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。结果 :双酶切重组质粒 pc DNA- gp B,电泳可见两条带 ,分别为目的基因 (2 70 0 bp)和线性质粒 pc DNA3(5 4 0 0 bp) ;以重组质粒 pc DNA- gp B为模板进行 PCR扩增 ,在 2 70 0 bp位置扩增出特异的产物 ;测序结果表明 ,克隆基因插入方向正确 ,与 Gen Bank中登录的 HSV- 1F株 gp B基因序列比较 ,同源性达 99.5 %。结论 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,成功地构建了 HSV- 1基因疫苗pc DNA- gp B。

槟榔提取物体外抗柯萨奇病毒B3及单纯疱疹病毒1型和乙型肝炎病毒的研究

目的从槟榔9种提取物中体外筛选出抗柯萨奇病毒B3,单纯疱疹病毒1型活性成分,从其中3种提取物中体外筛选出抗乙型肝炎病毒的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、MTT法,判断药物毒性及药物抗病毒效应。结果槟榔9种提取物对Hela,Vero细胞具有一定的毒性,而无抗病毒活性,3种提取物不能有效地抑制HepG2.2.15细胞HBeAg的表达。结论槟榔9种提取物体外无抗柯萨奇病毒B3、单纯疱疹病毒1型的作用,3种提取物体外无抗乙型肝炎病毒的作用。

栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型细胞吸附的影响

采用负染技术,借助高倍电子显微镜观察栀子提取物ZG作用后,病毒颗粒及其病毒吸附蛋白(virus attach-ment protein,VAP)的变化,考察药物是否直接改变或破坏病毒包膜蛋白的结构,使其失去感染性;采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记病毒,以肝素钠为参照,借助冷却慢扫描电荷耦合器件荧光成象技术,用Aquacomos软件进行图象分析,以探讨栀子提取物ZG不同加药方式对HSV-1吸附量的影响。结果表明栀子提取物ZG对HSV-1包膜表面的VAP无直接破坏作用,不影响病毒对Hep-2细胞的感染性;先加入肝素钠再进行病毒吸附及肝素钠病毒同时加入培养细胞这两种用药方式可明显减少细胞表面病毒的吸附量;栀子提取物ZG各种不同加药方式均能阻止HSV-1对Hep-2细胞表面的吸附,使病毒吸附量减少。

单纯疱疹病毒脑炎的非典型临床表现

目的对临床表现和实验室检查结果不具典型特征的单纯疱疹病毒脑炎患者进行回顾性总结,以提高对本病的诊断水平。方法对142例单纯疱疹病毒脑炎患者的病史、临床表现、脑脊液细胞学检查、脑脊液及血清病毒学、脑电图及神经影像学资料进行分析。结果142例中38例(26.76%)为非急性起病,受损部位除常见的额、颞叶外,还可侵及脑干。50例(35.21%)脑脊液细胞学检查以中性粒细胞升高为主,而非淋巴细胞占优势。69例行脑脊液特异性1型单纯疱疹病毒IgM抗体检测,阳性者12例(17.39%),余57例(82.61%)均呈阴性。17例行双份血清和脑脊液标本特异性IgG抗体检测,其中恢复期标本1型单纯疱疹病毒IgG抗体水平增高4倍以上者5例,无明显变化者9例,恢复期抗体水平降低4倍者3例。68例中65例(95.59%)脑电图未见典型的局灶性尖、棘波。52例患者接受影像学检查(M RI检查10例,CT检查42例),其中28例未见典型影像学改变,分别占受检者的30.00%(3/10)和59.52%(25/42)。结论单纯疱疹病毒脑炎的起病、临床表现和实验室检查可呈不典型表现,明确诊断有赖于对各项资料进行综合分析。对于亚急性或慢性起病患者,建议检测双份血清和脑脊液标本中的特异性1型单纯疱疹病毒IgG抗体,以对病毒抗体水平进行连续和动态观察。

荔枝核黄酮类化合物对小鼠Ⅰ型单纯疱疹病毒性脑炎的作用及机制

目的探讨荔枝核黄酮类化合物(FLCS)对体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的作用及其可能机制,进一步验证该药对小鼠病毒性脑炎的治疗效果,从而为HSV-1感染的治疗提供新的手段。方法采用微量细胞培养法和MTT比色法观察FLCS对HSV-1感染细胞的保护作用,通过检测细胞病变效应(CPE)以及病毒抑制率确定该药体外抗病毒活性。进一步利用小鼠病毒性脑炎模型,设计治疗方案(FLCS 3个剂量组,疗程5 d),观察小鼠生存率、平均存活时间、组织中病毒滴度,评价FLCS对小鼠病毒性脑炎的治疗作用。结果 FLCS不仅对HSV-1有直接灭活作用,而且还可阻止HSV-1的生物合成,表现为各剂量组FLCS通过不同方式和病毒作用后,HSV-1感染细胞的PE则随药物浓度的增加而减少,病毒抑制率明显升高。FLCS对HSV-1直接灭活作用和抑制生物合成作用的细胞半数抑制有效浓度(IC50)分别为32.76μg/mL和12.72μg/mL,相应作用方式的治疗指数(TI)分别为7.3和18.8。但是FLCS不能阻止HSV-1吸附细胞,表现为各剂量组FLCS作用细胞后,HSV-1再感染细胞,均出现典型CPE。对于小鼠来说,其体征大多数都会从厌食、呆滞以及嗜睡等症状,逐渐转变为颤抖、抖毛、背弓、抽搐、打转、体重下降等神经系统感染症状,直至死亡,FLCS治疗组小鼠组织病变程度减轻。结论FLCS虽不能阻止病毒吸附与穿入易感细胞,但能直接杀灭病毒以及抑制HSV-1的生物合成或(和)以后环节发挥其抗病毒作用。FLCS能降低HSV-1感染小鼠死亡率,延长平均生存期,加快组织中病毒的清除,缓解小鼠脑炎症状。