汕头市部分人群单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体检测

人类单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)主要感染腰部以下部位,在性传播疾病(下简称性病)中占有重要地位.为了解汕头市人群中HSV-Ⅱ感染情况,收集了部分人群做了HSV-Ⅱ抗体检测,报告如下.

2015～2016年天津地区新生儿TORCH血清学筛查及感染特点

目的探讨天津地区新生儿感染弓形体(Toxoplasma gondii,TOX)、风疹病毒(Rubella virus,RV)、巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)和单纯疱疹病毒Ⅱ型(Herpes simplex virusⅡtype,HSV-Ⅱ)(TORCH)状况及特点。方法利用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测2015~2016年2 273例出生后28天内新生儿血清中TOX-IgM/AgG,RV-IgM/AgG,CMV-IgM/IgG和HSV-Ⅱ-IgM/IgG。结果在2 273例新生儿中TOX-IgM,RVIgM,CMV-IgM和HSV-Ⅱ-IgM的阳性率分别为0.00%(0/2 273),0.0.0%(0/2 273),0.88%(20/2 273)和0.00%(0/2273),TOX-IgG,RV-IgG,CMV-IgG和HSV-Ⅱ-IgG的阳性率分别为3.65%(83/2 273),86.45%(1 965/2 273),95.82%(2178/2 273)和8.27%(188/2 273),未感染TORCH病原体的新生儿占0.66%(15/2 273);TOX-IgG,RV-IgG,CM、V-IgG和HSV-Ⅱ-IgGP阳性率之间差异有统计学显著性意义(X^2=6.747,P=0.000),检出率最高的为CMV-IgG;2016年新生儿血清中TOX-IgG和CMV-IgMP阳性率均明显低于2015年(X^2=5.789~7.505,P=0.006~0.016),而2015年男性新生儿中CMV-IgM阳性率明显高于2016年(X^2=5.054,P=0.025);总体上TOX-IgG,RV-IgG,CMV-IgG和HSV-Ⅱ-IgG(TORCH-IgG)阳性率在各年度和不同性别受检者之间差异均无统计学意义(X^2=2.23~6.963,P=0.073~0.526),而2015年度女性新生儿TORCH-IgGP阳性率与2016年相比差异有统计学意义(X^2=8.247,P=0.041);2015年女性受检者TOX-IgG阳性率高于2016年女性新生儿(X^2=6.992,P=0.008);TORCH检测结果中存在单一病原体感染和多种病原体感染共六种感染模式,各年度之间以及不同性别之间TORCH感染模式差异均无统计学显著性意义(P>0.05)。结论天津地区新生儿TORCH既往感染以RV和CMV为主,新近感染皆为CMV,TORCH在不同年份及不同性别受检者中阳性率有明显变化,该研究为新生儿TORCH的流行病学以及防治提供实验资料和依据。

HSV-2gD、gBCTL表位及Hsp70融合DNA疫苗的免疫效果观察

目的研究多表位重组DNA疫苗pc(pcDNA3.1-)-P6-gBCTL-Hsp70的免疫原性。方法将构建的真核表达质粒pcP6-gBCTL-Hsp70转染CHO细胞表达,采用间接免疫荧光和Western blotting检测P6抗原的表达情况。将重组质粒肌肉注射免疫接种Balb/c小鼠3次,每次间隔2周。末次免疫后1周采集眼眶静脉血,末次免疫后1月无菌分离小鼠脾脏。采用ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量,MTT法测定脾淋巴细胞增殖率,LDH法检测CTL活性。结果重组质粒pc-P6-gBCTL-Hsp70具有一定的免疫原性,可刺激机体产生特异性抗体,诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18,促进小鼠脾淋巴细胞的增殖,CTL杀伤病毒感染细胞活性增强。结论重组核酸疫苗pc-P6-gBCTL-Hsp70能诱导较强的细胞免疫和体液免疫。

HSV-2gD、HBsAg和IL18多表位基因疫苗的构建方法

目的研究多表位串联重组核酸疫苗中IL18与HBsAg(S)抗原、P6(NP6)抗原在质粒中所处位置的差异对抗原表达是否有影响。方法分别将IL18连接在融合蛋白P6-S(NP6-S)的氨基端和羧基端,即构建4种质粒:pc-IL18-P6-S、pc-IL18-NP6-S、pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18。采用DNAstar软件分析4种质粒表达的融合蛋白的抗原性。将重组质粒分别转染CHO细胞进行瞬时表达,通过间接免疫荧光和Western blotting检测S、P6(NP6)抗原的表达情况,以确定最佳的连接方式。结果应用DNAstar软件分析可知IL18在融合蛋白的氨基端的抗原性高于在羧基端。间接免疫荧光检测结果发现IL18位于融合蛋白羧基端的质粒表达的抗原性优于氨基端,即:质粒pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18的S、P6(NP6)抗原的表达情况均优于质粒pc-IL18-P6-S和pc-IL18-NP6-S,故选用质粒pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18作为优势质粒。结论成功构建了4种质粒,并确定了优势质粒,此项技术将为新一代多基因核酸疫苗的研制提供实验依据,从而为构建更加有效的多价DNA疫苗奠定了良好的基础。

异叶青兰提取物抗病毒作用及挥发油成分分析

目的:探讨藏药异叶青兰挥发油、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物抗腺病毒(ADV)、流感甲型病毒A/汉防/359/95(H3N2)及单纯疱疹病毒II型(HSV-2)的作用。方法:细胞病变法测定提取物的半数有毒浓度及对病毒的半数效应浓度,以治疗系数(TI)为指标评价药效。采用气相色谱-质谱联用分析挥发油成分。结果:石油醚提取物抗A/汉防/359/95(TI=12.99)、抗单纯疱疹病毒II(TI=6.48)活性最强。挥发油抗腺病毒(TI=7.77)活性最强。挥发油对单纯疱疹病毒II型有较强的直接灭活作用(TI=3.1)。挥发油主要成分为桉油精(22.18%),桃金娘烯醇(11.28%),顺式松油醇(11.11%)等。结论:异叶青兰挥发油、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物具有一定的抗腺病毒、流感甲型病毒A/汉防/359/95(H3N2)及单纯疱疹病毒II型的作用。