单克隆抗体间接免疫荧光试验检测生殖器单纯疱疹病毒感染

目的 :评价间接免疫荧光试验 (IFA)在生殖器疱疹(GH)诊断中的应用价值 .方法 :采用以单纯疱疹病毒 (HSV)型共同性单克隆抗体为夹心的IFA方法 ,检测了 1 2 0例临床诊断为GH患者皮疹中的HSV ,并与病毒培养法进行比较 .结果 :IFA检测HSV的总阳性率为 85 .8% ,高于病毒培养法的阳性率 (70 .8% ,χ2 =1 2 .0 4 ,P <0 .0 1 ) .两种方法检测GH患者皮肤水疱内的HSV阳性率分别为 93.3%和 90 .0 % ,无明显差异 (χ2 =1 .96 ,P >0 .0 5 ) ;而检测糜烂和结痂性皮疹内的HSV时 ,IFA的阳性率分别为 92 .6 %和 6 9.4 % ,均分别高于病毒培养法 (75 .9% ,χ2 =5 .82 ,P <0 .0 5 ;4 7.2 % ,χ2 =1 4 .1 7,P <0 .0 1 ) .结论 :IFA法具有简单、快速、敏感性高的优点 ,适用于检测GH患者皮疹内HSV 。

单纯疱疹病毒性角膜炎潜伏期HSV-1 LATs功能研究

【目的】研究单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpes si mplex virus type 1,HSV-1)感染兔眼球以后潜伏相关转录体(Latency associated transcript,LATs)在兔角膜中的表达,探讨LATs的表达与单纯疱疹性角膜炎之间的关系。【方法】将25μL滴度为1×106 U/mL HSV-1 stockek病毒株接种于健康新西兰白兔的角膜上建立单纯疱疹性角膜炎动物模型,分别于角膜接种病毒后的d10、d60、d110取角膜片及患侧三叉神经节作PCR检测,分析潜伏期内HSV-1基因表达模式。【结果】未感染HSV-1的兔角膜中不表达LATs,HSV-1感染兔的早期即可诱导LATs在角膜中的表达,并且表达持续存在。【结论】HSV-1上调LATs在兔角膜中的表达,LATs在兔角膜中的表达与角膜炎的发生和发展密切相关。

230例性病门诊患者单纯疱疹病毒检测结果分析

【目的】探讨性病门诊患者生殖器部位单纯疱疹病毒(HSV)感染情况。【方法】应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对本院230例性病门诊患者生殖器部位皮损进行HSV和其他性病病原体检测。【结果】在230例病例中,HSV阳性率为43.9%(101/230),其中男性患者阳性率为50.0%(75/150),80例女性患者阳性率为32.5%(26/80),两者相比较,差异有显著性(P<0.05)。不同临床标本中以水疱检出HSV阳性率最高为71.4%(65/91)。同时并发其他性病病原体阳性82例,阳性率35.7%(82/230)。【结论】男性HSV发生率高于女性,不同临床标本HSV检出阳性率不同,且常常发其他性病病原体感染。

先天性心脏病与弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒及单纯疱疹病毒感染的关系

目的探讨先天性心脏病(先心病)与弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)及单纯疱疹病毒(HSV)感染的关系。方法选取80例先心病患者(先心病组)和32例非先心病者(对照组)。采用聚合酶链反应(PCR)荧光定量方法检测两组受检者心肌组织、血清和白细胞中的TOX、RV、CMV及HSV4种基因并进行比较。结果先心病组心肌组织中TOX、RV、CMV、HSV的基因检出率分别为16.2%、18.8%、28.8%和7.5%,对照组分别为0、0、18.8%和6.2%,两组TOX、RV基因检出率间差异有统计学意义(P<0.05),CMV、HSV基因检出率间差异无统计学意义(P>0.05)。先心病组与对照组心肌组织中CMV、HSV阳性者的CMV〔(5.50±1.30)copies/ml和(5.30±0.33)copies/ml〕、HSV〔(4.51±0.87)copies/ml和(4.32±0.17)copies/ml〕基因定量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);先心病组与对照组白细胞中CMV阳性者的CMV〔(5.23±1.20)cop-ies/ml和(5.02±0.79)copies/ml〕基因定量比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论先心病的发生与TOX、RV、CMV、HSV感染有关,但与病原体感染的数量无关。

自然流产孕妇外周血染色体着丝粒点变异与单纯疱疹病毒感染的关系研究

目的研究单纯疱疹病毒(HSV)感染与孕妇外周血淋巴细胞染色体着丝粒点变异的关系,分析染色体着丝粒点变异导致胚胎发育异常的机制。方法选择早期自然流产孕妇59例,抽取静脉血,采用ELLASA法检测单纯疱疹病毒抗体,阳性患者(IgG-/IgM+或IgG+/IgM+)以常规方法制作外周血淋巴细胞染色体,并采用同步银染法观察染色体着丝粒点变异情况,采用SAS. P9.0统计软件分析单纯疱疹病毒感染与染色体着丝粒点变异率的相关性。另选择10例为健康对照组。结果共有21例早期流产孕妇外周血单纯疱疹病毒抗体阳性,其外周血染色体着丝粒点变异几率显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论单纯疱疹病毒可引起外周血染色体着丝粒点变异,导致体细胞有丝分裂时染色体复制错误或丢失而形成非整倍性畸变,由此可以推断单纯疱疹病毒同样可影响生殖细胞减数分裂或胚胎细胞正常分裂,是引起孕妇于孕早期胚胎异常的原因之一。

单纯疱疹病毒Ⅰ型心肌炎心肌细胞凋亡的研究

目的:观察单纯疱疹病毒1型(HSV-1)病毒性心肌炎(VMC)心肌细胞凋亡,探讨VMC发病机制。方法:将120只小鼠随机分成感染组(60只),病毒稀释液RPMI组(30只),自然组(30只)。给感染组每只小鼠接种滴度TCID50为10-4HSV-1vero细胞液0.1mL,给病毒稀释液RPMI组每只小鼠接种RPMI-1640液0.1mL,自然组小鼠不做任何接种。然后分批分期处死小鼠,取心肌组织做光镜、TUNEL、电镜检查。结果:感染组小鼠全程VMC占38%,心肌细胞凋亡阳性鼠占33%;第6-8dVMC达60%,心肌细胞凋亡阳性鼠达47.4%;第6d心肌细胞凋亡阳性率达高峰。病毒稀释液RPMI组、自然组未发现VMC和心肌细胞凋亡。结论:心肌细胞凋亡可能是HSV-1VMC的发病机制之一。

单纯疱疹病毒性脑炎患者相关抗体滴度分析及意义

目的研究单纯疱疹病毒性脑炎患者血液及脑脊液中单纯疱疹病毒抗体(抗-HSV)滴度的改变。方法收集45例单纯疱疹病毒性脑炎患者的血液和脑脊液,稀释成不同滴度,用ELISA双抗原夹心法进行抗-HSV检测。结果采用多滴度稀释后,血液抗-HSV-IgG阳性率由20.0%上升到26.7%;脑脊液抗-HSV-IgM阳性率由6.7%上升到93.3%,抗-HSV-IgG阳性率由6.7%上升到13.3%。脑脊液中抗-HSV-IgM的阳性率显著高于血液,差异有统计学意义(P<0.05),而两者抗-HSV-IgG阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论ELISA法检测抗-HSV需要进行多个滴度稀释检测,避免钩状效应,提高阳性检出率。此法简便快速,有望成为辅助诊断单纯疱疹病毒性脑炎的重要指标。

PCR-RFLP法对单纯疱疹病毒感染诊断和分型的研究

目的建立单纯疱疹病毒的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法,为生殖器疱疹的诊断及分型提供可靠而特异的方法。方法以特异性引物法为对照,用一对单纯疱疹病毒外层通用引物扩增出长度为438bp的片断,并进行酶切以分型。结果PCR-RFLP法可特异性检测出单纯疱疹病毒并进行分型,同特异性引物法比较,两种方法无显著性差异。结论PCR-RFLP法是一种准确、特异的对单纯疱疹病毒感染进行诊断和分型的方法。

Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒感染的抗病毒治疗

目前，在有效的抗Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-Ⅰ）和Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）的药物中，除膦甲酸（fosarnet）和西多福韦（cidofovir）外，其他所有抗病毒药物均为核苷类似物。其中阿昔洛韦（acvclovir）、泛昔洛韦（ramciclovir）和伐昔洛韦（valaciclovir）均为适用于大多数单纯疱疹病毒感染的一线抗病毒药物，而西多福韦、膦甲酸、更昔洛韦（ganciclovir）、缬更昔洛韦（valganciclovir）等二线抗单纯疱疹病毒药物对仪疱疹病毒亚科病毒也有效，尤其是治疗抗阿昔洛韦的单纯疱疹病毒分离株。

单纯疱疹病毒型特异性的鉴别诊断

单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)分为HSV-1、HSV-2两个型别。两型的DNA有50%的同源性。目前血清学检测无法区分HSV型别。有效地鉴别HSV两型对疾病的诊断治疗和患者的身心健康至关重要。现对Ⅰ、Ⅱ型单纯疱疹病毒的鉴别诊断方法作一综述。

大黄素体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的药效学研究

【目的】探讨大黄素在体外对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)和Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的抑制作用。【方法】采用细胞病变抑制法,观察大黄蒽醌类衍生物(大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄、大黄酚)对HSV-Ⅰ型和HSV-Ⅱ型病毒感染兔肾细胞的抑制作用。【结果】大黄素在无毒浓度3.75μg/mL时能抑制HSV-Ⅰ致细胞病变;在无毒浓度15.0μg/mL时能抑制HSV-Ⅱ致细胞病变。【结论】大黄素在体外能抑制HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ病毒,而其他大黄蒽醌类衍生物则无抑制作用。

化学发光法与PCR法联合检测孕妇单纯疱疹病毒感染率分析

目的对化学发光法与聚合酶链反应(PCR)联合检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)的感染率进行分析,为临床诊断提供依据。方法采集该院孕期常规建卡的孕妇血清,用化学发光法检测血清HSV IgM与IgG抗体水平;对其中任一项结果阳性者取宫颈分泌物进行HSV DNA定性检测。结果HSV1DNA阳性率为0.5%(7/1 422),HSV2DNA阳性率为1.1%(16/1422)。HSV IgM和IgG同时阳性者HSV1DNA阳性率为0.4%(4/1 008),HSV2DNA阳性率为0.6%(6/1 008);仅HSV IgM阳性者HSV1DNA阳性率为0.8%(1/130),HSV2DNA阳性率为3.1%(4/130);仅HSV IgG阳性者HSV1DNA阳性率为0.7%(2/284),HSV2DNA阳性率为2.1%(6/284)。3种情况HSV抗体阳性者HSV1DNA阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),而HSV2DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在孕期对HSV抗体进行常规检查,对抗体阳性者进行DNA检测,能提高诊断准确率。尽量做到早期筛查、早期发现、及早对孕妇进行治疗。

单纯疱疹病毒性脑炎小鼠脑组织中IL-10的表达

目的通过检测白细胞介素10(IL-10)在单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)小鼠脑组织中的表达,探讨IL-10在HSE发病中可能的免疫学机制。方法采用颅内接种法建立HSE小鼠模型。设置正常对照组、病毒感染组、阿昔洛韦组和地塞米松组。通过神经症状评分观察HSE小鼠的发病情况,应用免疫组化法测定各组小鼠脑组织中IL-10的表达,并采用Pearson相关分析分析神经症状评分与IL-10表达的相关性。结果病毒感染组神经症状评分最高,生存率最低,阿昔洛韦组次之,地塞米松组神经症状评分最低,生存率最高(F=30.20,χ2=23.20,P<0.05)。IL-10在HSE小鼠脑组织中的表达较正常对照组明显上调,病毒感染组较阿昔洛韦组增高,病毒感染组和阿昔洛韦组较地塞米松组增高(F=10.65,P<0.05)。神经症状评分与IL-10的表达呈正相关(r=0.83,P<0.05)。结论 IL-10可能通过抑制小胶质细胞炎性因子的产生,减轻神经细胞损伤等介导宿主在HSE中的免疫应答作用。

2013-2016年性病门诊单纯疱疹病毒血清学检测结果分析

目的:分析性病门诊就诊者HSV-1和HSV-2的感染情况。方法:用ELISA法分别检测性病门诊就诊者2911例血清中HSV-1、Ⅱ型的IgM和IgG抗体。结果:2911例中,HSV-1、HSV-2,以及HSV-1和HSV-2混合感染率的95%可信区间分别为(65.04%~69.20%)、(0.20%~6.94%)、(14.01%~20.61%),HSV-1感染率高于HSV-2感染率和HSV-1和HSV-2混合感染率;HSV-1和HSV-2各年度检出率无统计学差异;男、女性HSV-1感染率分别为70.73%、55.07%,女性低于男性(χ~2=57.267,P=0.00);而HSV-2男、女性感染率分别为2.20%、5.07%,女性高于男性(χ~2=7.805,P=0.005);男、女性HSV-1和HSV-2混合感染率分别为13.16%、31.20%,女性高于男性(χ~2=117.127 P=0.00)。HSV-1和HSV-2既往/复发病例分别占83.68%和19.72%,HSV-1既往感染者相对较多。HSV-1和HSV-2的新发病例分别占1.38%和4.65%,HSV-2型新发感染者相对较多。结论:HSV在本地区性病门诊就诊者中具有较高感染率,应进一步在性病高危人群中采取干预措施,防止HSV通过性行为在本地蔓延流行。

单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析

目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性。方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21。PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后,IPTG诱导表达融合蛋白GST-gD,并进行免疫学鉴定。结果:获得了gDDNA。测序鉴定表明,该序列与Gen Bank中的序列一致,gD基因已正确插入到pGEX-4T-1中。重组融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD经IPTG诱导后能在大肠杆菌中高效表达,Western Blotting证实,该蛋白具有天然gD抗原性。结论:成功构建了融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD,在大肠杆菌中获得了有效表达,并证实融合蛋白具有gD免疫原性。为进一步研究gD蛋白的免疫学特性,制备gD亚单位疫苗和单克隆抗体奠定了基础。

潜伏相关转录体在单纯疱疹病毒中的作用

潜伏相关转录体是单纯疱疹病毒潜伏期间大量存在和被转录的RNA,也是目前研究单纯疱疹病毒潜伏-复发机制的热点。通过近30年的研究,对潜伏相关转录体在单纯疱疹病毒潜伏-复发中所起的作用有了更进一步的认识,但对其作用机制了解甚少。在这一未知领域,不断有新的假说提出,但其科学性有待进一步考证。为此,总结近年来对单纯疱疹病毒潜伏相关转录体作用机制的研究成果,为开展相关研究提供理论基础。

单纯疱疹病毒潜伏感染的分子基础

单纯疱疹病毒在体内的生存策略是建立潜伏感染,一定条件下被激活而致病情复发。虽然近年来在分子水平对潜伏感染和再激活进行了相当的研究,但确切机制尚不十分清楚。目前受到关注的主要有潜伏相关转录体、立即早期基因、病毒蛋白16、组蛋白修饰以及CD8+T细胞。进一步研究有助于寻找和发现针对性预防和治疗HSV感染的新方法或药物。

单纯疱疹病毒耐药的流行趋势及其耐药机制的研究进展

单纯疱疹病毒是引起单纯疱疹和生殖器疱疹的主要病原体。近年来关于单纯疱疹病毒的耐药时有报道。大量研究证明,胸苷激酶和DNA聚合酶缺陷是导致单纯疱疹病毒耐药的主要机制。就近年来对HSV耐药的相关研究初步探讨单纯疱疹病毒耐药的流行趋势及其耐药机制。

儿童单纯疱疹病毒性脑炎40例分析

对我院1997～2003年收治的儿童单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)40例分析如下. 1临床资料 本组男24例,女16例,其中1岁以下5例,1～3岁10例,4～7岁14例,7岁以上11例.本组中发热24例,抽搐24例,昏迷19例,头痛、呕吐8例,四肢乏力4例,精神症状7例,单侧肢体抽搐2例,颅神经症状3例,继发癫痫8例.