应用单细胞凝胶电泳测定人血痕淋巴细胞降解的实验研究

目的探讨血痕形成时间与其DNA降解的淋巴细胞出现率的关系。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合荧光显微镜和专业的计算机图像分析技术,测定离体72h内不同时间段的血痕中彗星样淋巴细胞出现率。结果获得人离体血液经不同放置时间间隔后,经LUC IA图像分析系统采集得到荧光图像,并获得体现DNA降解趋势的二项式回归方程y=-0.0178X2+2.4623X+8.1098,r2=0.9522,具有高度的统计学意义。结论72h内的人血DNA降解的淋巴细胞出现率与血痕形成时间之间具有高度的线性相关。

单细胞凝胶电泳技术在胚胎毒性实验中的应用

目的 :探讨和分析单细胞凝胶电泳技术 ( SCGE)的影响因素和实验中应该注意的环节。方法 :通过对实验方法和操作技术的总结 ,对 Singh提出的碱性 SCGE进行适当的补充。结果 :完善了 SCGE的操作 ,获得了典型的彗星图像。结论 :在实验中避免非特异性因素的影响 ,注意实验操作细节 ,能够增加

单细胞凝胶电泳技术在环境毒理学实验教学中的应用

介绍了植物细胞核DNA损伤的单细胞凝胶电泳的检测方法,依次包括载玻片的预处理和编号、细胞核的分离、包埋、解旋、电泳、中和、脱水、染色、摄像及其结果的软件分析等过程。并应用该方法检测了暴露于镉离子污染后的蚕豆幼苗叶片组织细胞核的DNA损伤程度。结果表明,该方法简单、易行,适合在环境毒理学的实验教学和科研中推广和应用。

单细胞凝胶电泳技术

单细胞凝胶电泳 (singlecellgelelectrophoresisassay ,SCGE)也叫彗星试验 ,是一种快速、敏感、简便的细胞DNA损伤检测技术。文章简要介绍了SCGE的原理、主要技术流程及其注意事项、存在问题与发展前景。

重金属诱导拟南芥原生质体DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

以拟南芥原生质体为实验体系,研究不同浓度的3种重金属离子对拟南芥原生质体的毒性和DNA损伤的差异。结果表明,用1-5mmol.L-1的Zn2+、Cd2+和Cu2+分别处理的拟南芥原生质体,2小时内活力逐渐下降,并表现出明显的浓度依赖性;与相同浓度的Cd2+和Cu2+相比,Zn2+对拟南芥原生质体活力的影响程度较小,表现出较低的毒性。单细胞凝胶电泳检测发现,用0.1-0.8mmol.L-1的Zn2+、Cd2+和Cu2+分别处理拟南芥原生质体30分钟,以OTM值表示的原生质体DNA损伤量随重金属离子浓度的增加而递增;相同浓度(0.5mmol.L-1)的3种重金属离子相比,Zn2+对原生质体的遗传毒性明显低于Cu2+和Cd2+。综合原生质体活力和DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测结果,发现Zn2+对拟南芥原生质体的遗传毒性较低,而Cd2+和Cu2+的遗传毒性较高。本研究建立的拟南芥原生质体实验体系,结合运用单细胞凝胶电泳技术,能够快速、灵敏地检测重金属对植物细胞的遗传毒性。

用单细胞凝胶电泳检测砷、汞、铅致DNA损伤的研究

应用ＳＣＧＥ方法体外检测ＮａＡｓＯ２、ＨｇＣｌ２、Ｐｂ（ＮＯ３）２对人外周血淋巴细胞造成的ＤＮＡ损伤。结果表明，ＳＣＧＥ方法非常灵敏，能检测到很低剂量的ＮａＡｓＯ２和ＨｇＣｌ２所引起人外周血淋巴细胞的ＤＮＡ断裂，而且该法还具有快速、花费少等优点。

应用蝌蚪快速检测环境变异的两种方法——微核试验和单细胞凝胶电泳

本文介绍了应用无尾两栖类动物的蝌蚪进行环境监测的两种方法———微核试验和单细胞凝胶电泳。此两种环境检测的方法与其他环境检测方法相比具有快速 ,简便 ,易操作 ,适于检测现场应用 ,可大面积推广等优点。

紫外辐射诱导牡蛎细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

以牡蛎为研究对象,建立了水产动物DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测方法.分别以20W紫外灯距离30 cm照射牡蛎血液细胞30、60和120 s,然后用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA的损伤.结果表明:未照射的细胞未受损伤,在电场中核DNA几乎不泳动,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象.紫外照射后细胞核DNA均不同程度受损,且拖尾率、尾长、尾矩、Olive尾矩等指标值均随着照射时间加长而增加,DNA损伤程度与紫外照射时间之间存在明显的时间效应关系.研究结果为我国海洋环境中辐射防护研究和辐射毒理学检测提供新的研究方法和思路.

单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤的方法及进展

单细胞凝胶电泳技术是一种常见的检测DNA损伤的技术,它具有灵敏度高、经济、简便、快速等优点。近30年来,这种技术被广泛地应用于遗传毒理、环境监测、医学诊断、营养研究上。单细胞凝胶电泳技术不单单能检测DNA断裂损伤,在加入断裂剂或者特异性内切酶后,可以检测到DNA交联和紫外线诱导的嘧啶二聚体,氧化碱基和烷基化损伤。近些年单细胞凝胶电泳与荧光原位杂交技术相结合后更是拓宽了它的应用范围,对常规和非常规的单细胞凝胶电泳技术及其操作方法进行了归纳总结,并讨论了它的发展前景。

单细胞凝胶电泳检测大鼠死后肝细胞核DNA降解

目的应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠死后肝细胞核DNA降解规律,分析与死亡时间的关系,为早期死亡时间的推断提供新的方法.方法在大鼠死后30h内,每隔3h取肝组织样本进行单细胞凝胶电泳,用共聚焦显微镜摄取彗星图像,应用彗星图像分析软件(IMI1.0)进行图像分析,并作统计学分析.结果死后大鼠的肝细胞在电泳图像上出现明显的彗星形拖尾,其尾长(TL)、尾矩(TM)在一定的时间范围内(0～18h)随死亡时间的延长而逐渐增大,二者均与死亡时间(PMI)呈现一定的相关回归关系.结论单细胞凝胶电泳技术可应用于早期死亡时间的推断.

应用微核试验和单细胞凝胶电泳技术检测农药对蜘蛛的遗传毒性

应用蜘蛛血细胞微核试验和单细胞凝胶电泳试验研究了两种杀虫剂——吡虫啉和阿维菌素对蜘蛛头胸部和腹部的遗传毒性。结果表明:各供试浓度吡虫啉和阿维菌素对蜘蛛血细胞微核率均有明显影响,与对照组相比有显著性差异(P<0.05,P<0.01);且随着两种农药浓度升高,血细胞微核率显著增加,存在明显的剂量效应关系(吡虫啉浓度与星豹蛛头胸部血细胞微核率相关系数r=0.672 8,腹部为r=0.800 6;阿维菌素与星豹蛛头胸部血细胞微核率相关系数r=0.989 9,腹部为r=0.985 8)。吡虫啉和阿维菌素对星豹蛛血细胞DNA损伤有明显的剂量效应关系(吡虫啉浓度与星豹蛛头胸部血细胞DNA损伤相关系数r=0.948 2,腹部为r=0.970 4;阿维菌素与星豹蛛头胸部血细胞DNA损伤相关系数r=0.978 1,腹部为r=0.975 6)。两种农药在同一浓度下,对星豹蛛腹部血细胞微核率和DNA损伤程度明显大于头胸部。

单细胞凝胶电泳技术在运动医学中的应用

单细胞凝胶电泳（single cell gel electrophoresis．SCGE）又称彗星实验（comet assay），是近年来发展起来的一种在单细胞水平上检测DNA损伤与修复的新技术。SCGE实验最初由Rydbery和Johanson（1978）提出．以后经Ostling和Johanson（1984）及Singh（1988）等对实验条件进行改良．使其具有简便快速、灵敏性高、重复性好、无需放射性标记等优点，目前已被广泛应用于临床药物筛选、肿瘤诊断与治疗、衰老和细胞凋亡机制的探讨以及遗传毒理学和生物监测等研究领域。

碱性单细胞凝胶电泳技术

目的 总结碱性单细胞凝胶电泳技术实验方法 ,探讨其影响因素。方法 以Singh等提出的碱性SCGE为基础 ,结合实验条件加以改进。结果 获得了典型的彗星图像 ,实验效果良好。结论 碱性SCGE简便易行 ,应用前景广泛 。

单细胞凝胶电泳技术在传染病诊断和预后中的应用

单细胞凝胶电泳是一种检测哺乳动物单个细胞DNA损伤和修复的方法,此项技术方法在不断改进,包括铺胶技术的改进、非荧光染色剂的开发、分析系统的逐步完善等,其应用范围也在扩展。本文仅其目前在一些传染病中的应用进行简要综述。

单细胞电泳法检测肿瘤患者化疗后淋巴细胞DNA损伤

应用单细胞电泳 (SCGE)检测肿瘤患者环磷酰胺化疗后外周血T淋巴细胞DNA损伤。在标准SCGE条件下应用彗星图象分析系统定量分析人T淋巴细胞DNA的损伤程度。彗星图象分析研究结果显示 ,肿瘤患者外周血T淋巴细胞DNA损伤明显强于正常对照组 ,肿瘤患者外周血T淋巴细胞拖尾动量为 10 42± 1 98,正常人群为 1 2 6± 0 77;两者差异极显著 (P <0 .0 1)。肿瘤患者化疗后T淋巴细胞的拖尾长度为 3 3 69± 7 56μm ,DNA损伤的百分比为 3 1 5± 5 46% ;正常人群T淋巴细胞的拖尾长度和DNA损伤的百分比分别为 16 2± 1 5μm和7 46± 1 15% ;两组数据相比差异极显著 (P <0 .0 1)。结论 :单细胞电泳可快速灵敏地检测细胞DNA损伤 ,能用于肿瘤化疗患者的流行病学观察。