氨甲酰胆碱增加大鼠心室肌细胞收缩机制的初步研究

目的 :本文研究非选择性M受体激动剂氨甲酰胆碱 (Cch)对心肌细胞收缩的作用 ,并同时观察L—型钙流 ,探讨其机制。方法 :以分离大鼠的单个心室肌细胞为对象 ,采用膜片钳和单细胞收缩测量技术 ,在 35℃恒温 ,细胞外钙离子浓度 1.8mmol/L ,0 .2Hz,1.0Hz刺激下测量细胞收缩幅度和ICa(L) 、INa/Ca。结果 :①大鼠心肌细胞收缩与刺激频率呈负相关 ;②选择△L0 .2Hz/△L1.0Hz≥ 1.2 5 (n =6 )的细胞给予 1.0Hz的刺激 ,10 0 μmol/LCch增加大鼠心室肌细胞收缩 2 8%。③Cch作用能被非选择性M受体阻滞剂阿托品阻滞 ,选择性M1受体激动剂MCN A 34310 0 μmol/L对细胞收缩无影响。④ 10 0 μmol/LCch对ICa(L) 无影响 ,但增加从 +10mV复极到 - 4 0mV所产生的晚期尾电流 ,提示INa/Ca加大。结论 :Cch能加强大鼠心室肌细胞收缩 ,它的作用由M2 受体介导 ,其机制可能是通过加强INa/Ca,增加肌质网 (SR)内的钙内容和钙释放 ,导致细胞收缩加强 。

睾酮对实验性心肌缺血/复灌损伤的防护作用及机制研究

目的:探讨睾酮对实验性心肌缺血/复灌损伤的效应,并观察睾酮对心肌细胞氧化应激损伤的影响。方法:大鼠双侧输精管结扎,睾丸摘除,每天补充丙酸睾酮(200μg/100 g体重)。给药8周后,大鼠开胸取心脏,Langendorff装置上离体灌流,建立心肌梗死模型,测定冠脉流出液中LDH含量,和心肌梗死面积。酶解法分离大鼠心室肌细胞,复制H_2O_2应激模型,测定单个心肌细胞收缩力学指标,以及测定心肌细胞线粒体ROS生成量。结果:在去势模型中,丙酸睾酮处理显著地减少缺血/复灌后心肌梗死面积和冠脉流出液中LDH释放量。在分离的心肌细胞中睾酮预处理明显改善H_2O_2应激导致的±dL/dtmax和dL降低程度;睾酮(10^(-5)μmol/L)预处理能够减少H_2O_2应激引起的心肌细胞DCF荧光值增加,而此作用均能被ATP敏感性钾通道阻断剂5-HD和线粒体通透性转换孔(mPTP)开放剂atractyloside所取消。结论:睾酮具有对实验性心肌缺血/复灌损伤的防护作用,而这种保护作用可能与其抑制线粒体通透性转换孔开放或/和促进线粒体ATP敏感性钾通道开放有关。