单细胞蛋白表达定量分析技术在造血干细胞异质性检测中的应用

目的利用单细胞蛋白表达定量分析技术建立研究造血干细胞(HSC)异质性的方法.方法将不表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠HSC(HSC-GFP-)与表达绿色荧光蛋白的小鼠HSC(HSC-GFP+)按1∶1比例混合,采用单细胞蛋白表达定量分析技术:通过标准孔径芯片捕获HSC单细胞,在单细胞蛋白质分离模块(Milo系统)进行细胞裂解、蛋白电泳及紫外照射激活芯片内交联物质;芯片中的蛋白与相应抗体发生免疫反应,再与荧光标记的二抗结合;最后通过双荧光通道扫描模块采集荧光信号成像、运用Scout软件分析每个细胞中表达β微管蛋白(β-tubulin)和GFP的蛋白条带吸光度值,得到表达蛋白的细胞数及细胞中蛋白水平表达分布以分析细胞异质性.通过表达GFP及β-tubulin的细胞数计算转染GFP的细胞得率,与流式细胞术检测结果相比对验证.结果单细胞蛋白表达定量分析技术检测表达GFP的小鼠HSC比例为44.20%,流式细胞术检测结果为42.528%;细胞中GFP表达水平分布在(0.42~7.35)×10^(5)之间,表明存在细胞异质性.结论单细胞蛋白表达定量分析技术可用于HSC异质性的检测.

胆管癌Cyclin D1、p16蛋白表达的定量分析及临床意义

我们应用流式细胞技术对胆管癌及正常胆管组织中Cyclin D1、p16的蛋白表达进行定量分析。探讨它们在胆管癌发生、发展、浸润转移等生物学行为方面的作用以及它们之间的关系，试图提高胆管癌的临床诊治水平。

α-平滑肌肌动蛋白在臀肌挛缩症中的表达及意义

目的:观察α-平滑肌肌动蛋白(alphasmoothmuscleactin,α-SMA)在臀肌挛缩症的表达、分布。方法:利用免疫组化染色辅以计算机图像定量分析技术,对26例臀肌挛缩症及12例正常臀肌标本α-平滑肌肌动蛋白的表达进行检测。结果:α-SMA在对照组中未见明显表达。12例臀肌挛缩症组织中α-SMA染色阳性,14例臀肌挛缩组织中染色阴性,病变组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);7岁以上组臀肌挛缩症组织α-SMA表达明显减弱,与7岁以下组臀肌挛缩症组织(包括7岁)比较差异有显著性(t=2.364,P=0.028)。结论:①肌纤维母细胞是臀肌挛缩症发病的关键病理因素;②臀肌挛缩症中肌纤维母细胞的表达强度与病程有关,7岁以上组病程较长,表达明显减弱,这给临床治疗提供了新思路。

α-SMA在先天性肌性斜颈中的表达及意义

目的 :研究α 平滑肌肌动蛋白 (alpha smoothmuscleactin ,α SMA)在先天性肌性斜颈 (congen italmusculartorticollis,CMT)中的表达及意义。方法 :利用免疫组化辅以计算机图象定量分析技术 ,对2 1例先天性肌性斜颈及 10例正常肌肉腱性组织标本α SMA的表达进行观察和检测。结果 :α SMA在对照组中未见明显表达 ,3例先天性肌性斜颈标本α SMA染色阴性 ,18例病变标本中α SMA染色阳性 ,病变组与对照组两者差异有非常显著性意义 (P <0 0 0 1) ;α SMA在肌性斜颈中表达强度与年龄有关 ,6岁以上组表达明显减弱 ,与 6岁以下组 (包括 6岁 )比较差异有显著性意义 (P <0 0 0 1)。结论 :①肌纤维母细胞是先天性肌性斜颈发病关键病理因素。②先天性肌性斜颈中肌纤维母细胞的表达在 6岁以上组明显减弱 。

国外畜牧生物技术的一些成就

生物技术所以能成为引人注目的新领域,这是因为它可以利用基因重组技术、细胞融合技术、淋巴细胞杂交瘤技术、酶固定化技术、动物细胞大量培养技术、细胞分离分析技术等,结合发酵和生化工程原理和技术,定向地设计和组建新的物种。生物技术中尤以基因工程的魅力最大,为解决当今世界面临的农业、饲料、兽药、能源、环境等许多重大课题提供了新的希望,所取得的成就也是极其显著的。

简介生物工程技术

本文简要阐述生物工程技术的产生、类型及应用前景。