单羧酸转运蛋白-1、基质金属蛋白酶-2在人脑胶质瘤的表达及相关性

脑胶质瘤是颅脑肿瘤中目前比较多见的，研究结果表明，单羧酸转运蛋白-1（MCT-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）对胶质瘤病程发挥促进作用，并与其关系密切。本研究旨在探讨两者在胶质瘤中的mRNA表达。

单羧酸转运蛋白-1磷酸酶抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因在脑胶质瘤中的表达及相关性

目的探讨单羧酸转运蛋白-1（MCT1）与同张力蛋白同源在人第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）在脑胶质瘤中的表达及相关分析。方法采用免疫组织化学二步法免疫组织化学技术（Envision）法及反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测52例脑胶质瘤织和16例正常脑组织标本中MCT1、PTEN蛋白及mRNA的表达。结果（1）对照组、低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组标本中MCT1、PTENmRNA的表达分别为依次增加和依次下降，差异有统计学意义（P=0．002、0．003）；（2）对照组、低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组标本中MCT1、PTEN蛋白表达的阳性率分别为依次增加、依次下降（MCTI：18．8％、61．8％、72．2％；PTEN：68．8％、44．1％、22．2％），差异有统计学意义（P=0．031，0．037）；（3）MCT1 PTEN mRNA在脑胶质瘤中的表达无明显相关性（r=0．06，P=0．041）。结论MCT1、PTEN的表达与脑胶质瘤的恶性分级关系密切，病理级别越高MCT1表达呈现显著增强趋势而PTEN则呈现下降趋势。MCT1在胶质瘤中的过表达及PTEN的表达缺失可能都对脑胶质瘤的病理进展起了促进作用，PTEN、MCT1在胶质瘤中的表达无明显相关。

人肺癌组织单羧酸转运蛋白—1基因的表达及其意义

目的：研究人肺癌组织中单羧酸转运蛋白－1（MCT1）基因的表达水平，探索肿瘤治疗新策略。方法：以寡聚脱氧核苷酸为探针，用原位分子杂交法探测人肺癌组织和人正常肺组织MCT1mRNA的表达水平。结果：人 肺癌组织的MCT1mRNA的表达显著强于正常肺组织，呈过表达。结论：MCT1基因的过表达可能是肺癌组织细胞的分子生物学特征之一。

CD147/HAb18G单克隆抗体对人脑胶质瘤细胞乳酸转运及细胞生长的影响

目的研究CD147/HAb18G基因工程单克隆抗体对体外培养U251细胞单羧酸转运蛋白-1(monoc arboxylatetransporter-1,MCT1)表达分布和糖酵解乳酸代谢的影响。方法体外培养U251细胞分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别加入不同剂量的CD147/HAb18G单抗封闭细胞表面CD147分子。免疫荧光法检测各组细胞膜上MCT1表达分布改变,分光光度计检测各组细胞内乳酸含量,分别绘制生长曲线并记录生长数据。结果低剂量组和高剂量组MCT表达分布改变,相比对照组其胞膜有效表达减少[随机计数500个细胞中胞膜完整表达细胞数:对照组(367.34±6.92),低剂量组(161.92±7.33),高剂量组(54.58±4.80),P<0.01],胞质无效表达增多[胞质表达细胞数:对照组(12.08±3.03),低剂量组(70.83±4.71),高剂量组(264.58±6.14),P<0.01];细胞内乳酸浓度在低、高剂量组明显增高[对照组(0.222±0.020)mmol/L,低剂量组(0.418±0.015)mmol/L,高剂量组(0.713±0.018)mmol/L,P<0.01],生长指标抑制,生长曲线低平[对照组最大细胞密度(5.24±0.37)×105/ml,低剂量组(4.23±0.48)×105/ml,高剂量组(3.19±0.46)×105/ml,P<0.01]。以上改变在低剂量组和高剂量组间差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论 CD147/HAb18G单抗通过干扰CD147对MCT1表达的引导使胶质瘤细胞膜上MCT1有效分布减少,影响其糖酵解产生乳酸的排出,具有抑制肿瘤生长作用。

MCT1 MMP-2mRNA在人脑胶质瘤的表达及相关性研究

目的探讨单羧酸转运蛋白-1(MCT1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA在人脑胶质细胞瘤中的表达及相关性。方法应用荧光定量qRT-PCR法,分别测定50例原发性人脑胶质细胞瘤和10例脑内减压术患者脑组织标本中MCT1、MMP-2mRNA表达水平。结果 (1)MCT1、MMP-2在人脑胶质细胞瘤组织中mRNA表达较对照组显著增强(P<0.05);(2)MCT1、MMP-2在高级别胶质瘤组较低级别胶质瘤组mRNA表达显著增加(P<0.05);(3)MCT1、MMP-2mRNA在胶质瘤中的表达可能具有正相关性(r=0.712,P=0.001),对照组标本中均未见明显MCT1、MMP-2mRNA表达。结论(1)MCT1、MMP-2mRNA的表达同胶质瘤恶性级别关系密切,且病理级别越高其表达强度明显增强;(2)MCT1、MMP-2mRNA表达可能协同参与了人脑原发性胶质瘤的病理发展过程;(3))MCT1、MMP-2mRNA关联检测有可能作为判断胶质瘤侵袭性及其预后的重要参考指标。

MCT1、CD147在人胶质瘤中的表达、相关性及其与预后的关系

目的探讨单羧酸转运蛋白-1(monocarboxylate transporter-1,MCT1)和CD147在不同级别人脑胶质瘤中的表达情况及其与胶质瘤预后的关系。方法采用免疫组化S-P法检测MCT1和CD147在28例低级别胶质瘤和32例高级别胶质瘤中的表达情况;建立前瞻性队列随访观察上述胶质瘤患者术后情况,使用生存曲线和COX多因素模型进行生存预后分析。结果MCT1和CD147在人脑胶质瘤中均有高表达;在高级别胶质瘤中,两者的阳性表达率(93.8%、90.6%)和强阳性表达率(73.3%、72.4%)显著高于低级别组(两者的阳性表达率为46.4%、50%,强阳性表达率为30.8%、35.7%,P<0.01,P<0.05),且两者表达呈正相关(r=0.671,P<0.05);MCT1和CD147表达相关生存曲线差异有统计学意义(P=0.021,P=0.001),COX分析CD147高表达对胶质瘤患者的术后生存预后具有明显影响(P=0.017)。结论MCT1和CD147与胶质瘤恶性程度有密切关系,两者的表达,尤其是CD147可作为胶质瘤预后判断的参考指标和治疗靶点。

MCT1表达位置改变对胶质瘤细胞能量合成、细胞内pH值及凋亡的影响

目的研究体外培养U251细胞单羧酸转运蛋白-1(MCT1)被CD147/HAb18G基因工程单克隆抗体改变表达位置后其乳酸外流障碍对细胞能量合成、细胞内pH值(pHi)和凋亡的影响。方法分别以低、高剂量的CD147/HAb18G单抗封闭体外培养U251细胞表面CD147分子,并设立对照组。免疫荧光法检测各组细胞膜上MCT1表达分布改变,分光光度计检测各组细胞内乳酸含量,生物发光法检测细胞内腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量,连续比色法检测细胞内磷酸果糖激酶(PFK)活性,2′,7′-二(羧乙基)-5(6)-羧基荧光黄(BCECF-AM)荧光探针法检测各组pHi,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果CD147/HAb18G单抗作用下,MCT1表达位置由胞膜有效表达转为胞质无效表达且细胞内乳酸浓度增高;细胞内ATP含量下降[对照组(0.831±0.036)×10-8 mmol/L,低剂量组(0.592±0.047)×10-8 mmol/L,高剂量组(0.332±0.042)×10-8 mmol/L,P<0.01];细胞PFK活性下降[对照组(0.855±0.076)mmol.min-1.L-1,低剂量组(0.602±0.057)mmol.min-1.L-1,高剂量组(0.382±0.049)mmol.min-1.L-1,P<0.01];pHi下降(对照组7.27±0.03,低剂量组6.77±0.04,高剂量组6.31±0.02,P<0.01);细胞凋亡率增加[对照组(8.45±1.26)%,低剂量组(16.87±3.26)%,高剂量组(28.92±3.01)%,P<0.01]。结论通过改变MCT1的表达位置,可有效抑制细胞糖酵解乳酸清除、降低糖酵解能量合成,酸化细胞内环境,促进肿瘤凋亡。

ICAM-1、MCT1在脑胶质瘤中的表达及其相关性分析

目的 研究细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和单羧酸转运蛋白-1（MCT1）在脑胶质瘤中的表达及二者的相关性。方法选取郑州大学第五附属医院神经外科自2012年3月12日至2015年10月30日手术切除并经病理确诊的脑胶质瘤标本58例，其中低级别胶质瘤（WHO分级Ⅰ-Ⅱ级）31例、高级别胶质瘤（WHO分级Ⅲ-Ⅳ级）27例。另外收集同期行第三脑室底造瘘术的患者的正常脑组织10例为对照组。应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学染色（SP法）分别检测3组标本ICAM-1、MCT1 mRNA和蛋白的表达。结果 对照组、低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组标本中ICAM-1、MCT1 mRNA的表达均依次增加，差异均有统计学意义（P〈0.05）；对照组、低级别胶质瘤组、高级别胶质瘤组标本中ICAM-1、MCT1蛋白表达的阳性率依次增加（ICAM-1：20%、64.5%、74.1%；MCT1 ：30%、58.1%、70.4%），差异均有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析显示ICAM-1 mRNA和MCT1 mRNA的表达存在正相关关系（r=0.701 ，P=0.002）。结论脑胶质瘤的病理级别越高，ICAM-1、MCT1 mRNA及蛋白的表达越强；二者可能协同促进脑胶质瘤的病理进展。