三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析法

用三聚氰胺半抗原(MEL)与异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)反应合成了荧光示踪物MEL-EDF,示踪物与三聚氰胺抗体反应得到稳定的单试剂免疫复合物,考察了其结合动力学和置换动力学过程,建立了一种三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析方法(SR-FPIA).该方法的检出限(LOD)为3.2 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为157.1 ng/mL,检测范围(IC20～IC80)为12.2～1012.4 ng/mL,能够满足国家标准和国际食品法典委员会(CAC)对于食品中三聚氰胺最高残留限量的检测要求.整个检测过程在15 min内完成,并且单试剂免疫复合物在4℃下至少可稳定保存30 d以上.本研究对开发三聚氰胺新型免疫检测方法具有重要意义.

对比胶体金免疫层析法与荧光偏振法诊断布鲁氏菌病准确性的Meta分析

目的应用诊断性试验Meta分析,定量评价胶体金免疫层析法(GICA)与荧光偏振法(FPA)诊断布鲁氏菌病的准确性。方法通过检索中文数据库(CNKI、万方、CBM)、英文数据库(PubMed、Embase、Cochrane),分别收集GICA和FPA诊断布鲁氏菌病的相关文献,检索截至2021年12月。按照纳入标准及排除标准筛选文献、提取数据,采用RevMan5.3对入选文献进行质量评价,应用Stata12.0与SAS9.4拟合双变量随机效应模型评价GICA与FPA诊断布鲁氏菌病准确性的结果。结果纳入符合标准的文献29篇,共22914个样本。诊断布鲁氏菌感染的合并灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、DOR值和AUC,GICA法分别为95%(95%CI:90%~97%)、96%(95%CI:93%~98%)、25.20(95%CI:13.34~47.58)、0.06(95%CI:0.03~0.10)、418.30(95%CI:170.98~1027.03)和0.99(95%CI:0.97~0.99),FPA法分别为96%(95%CI:94%~97%)、99%(95%CI:96%~100%)、72.29(95%CI:24.03~217.51)、0.04(95%CI:0.03~0.06)、1821.75(95%CI:516.42~6426.52)和0.99(95%CI:0.97~0.99),且两种方法合并DOR值的差异有统计学意义(P<0.001)。Deek’s漏斗图检验显示两种方法均无明显发表偏倚。结论在布鲁氏菌病的实验室检测中,GICA与FPA均有良好的诊断价值,FPA的综合诊断效能更高。

荧光偏振免疫分析方法快速检测沙拉沙星残留

以异硫氰酸荧光素(FITC)标记沙拉沙星合成荧光标记物,采用薄层色谱法提纯,优化了反应时间、标记物和抗体的工作浓度,建立了沙拉沙星的快速荧光偏振免疫分析法(FPIA)。本方法测定沙拉沙星在缓冲液中的半数抑制浓度(IC50)为43.2μg/L;检测范围为5.7～327μg/L,可以达到国家规定的动物性食品中兽药最高残留限量(80μg/kg)的要求。本研究考察了FPIA测定沙拉沙星的动力学过程及对其它4种喹诺酮类药物的交叉反应。结果表明,环丙沙星、恩诺沙星、加替沙星及氧氟沙星的交叉反应率分别为3.3%,1.8%,1.7%和0.7%。在牛奶和猪尿中沙拉沙星的回收率分别在71%～94%和74%～102%之间。本方法操作简单快捷,整个检测过程只需5 min、而且灵敏度较高、特异性强,适用于动物性食品中沙拉沙星残留的快速筛选检测。

荧光偏振免疫分析技术的研究进展

对荧光偏振免疫分析技术的研究进展作了详细的评述。介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理和研究热点 ,评述了它在临床检验、环境与食品监测和农药残留量分析等领域中的应用 ,对荧光偏振免疫分析方法的优缺点作了总结 ,引文献 4

荧光偏振免疫分析检测粮食及其制品中的真菌毒素研究进展

及时、快速和准确地检测粮食中真菌毒素的污染,从而对其进行严格、科学的控制和处理是保障中国粮食安全和人民身体健康的重要途径。基于特异性分子识别的均相荧光偏振免疫分析技术(Fluorescence Polarization Immunoassay,FPIA)兼具高通量、高速度、高灵敏和易于实现自动化等优点,特别适用于大批量粮食样本的快速筛选。文章综述了近10年来荧光偏振免疫分析检测粮食中真菌毒素的研究进展,并着重讨论了荧光偏振免疫分析的发展方向。

荧光偏振免疫分析在农药和兽药残留检测中的研究进展

荧光偏振免疫分析技术是以免疫竞争原理和荧光偏振原理为基础的一种以快速筛选为目的的分析技术,主要用于测定小分子量物质(抗原),就是检测荧光标记抗原在结合特异性的抗体前后,荧光偏振值的变化,是均相的竞争免疫分析方法,反应系统完全在溶液中,不需要分离结合的和未结合的抗体,不受溶液颜色、仪器灵敏度变化的影响,该技术最显著的特点是操作简单和检测时间短,适用于大量样本的快速筛选检测。目前该技术在农药和兽药残留分析中已经得到了应用,但是国内的相关研究尚未见报道。文章综述了荧光偏振免疫分析的历史背景,发展历程和主要原理,概括了荧光偏振免疫分析方法在农药和兽药残留分析中的研究进展。

荧光偏振免疫分析方法分析磺胺二甲基嘧啶

建立了检测磺胺二甲基嘧啶的荧光偏振免疫分析方法.合成了3种结构不同的荧光标记物,并用薄层色谱法提纯.研究了不同结构的荧光标记物对FPIA方法灵敏度的影响.该FPIA方法在缓冲液中的检出限为1.6 μg/L,半数抑制量（IC50）为41 μg/L,检测范围为5～458 μg/L,可以达到食品中SMZ最低残留限量的要求.研究了FPIA的动力学过程及对其它16种磺胺类药物的交叉反应,结果显示,SMZ、磺胺甲基嘧啶和磺胺二甲基恶唑的交叉反应率分别为100%、8.7%和2.4%,其它磺胺类药物的交叉反应率均低于1%.

荧光偏振免疫分析法在小分子药物小鼠血药浓度检测中的应用

目的:建立应用荧光偏振免疫分析法(FPIA)测定小鼠血药浓度的实验方法,探讨该方法测定庆大霉素、地高辛和丙戊酸钠3种常见小分子药物小鼠血药浓度的可行性。方法:选用庆大霉素、地高辛和丙戊酸钠标准品,采用荧光偏振(FP)值非线性拟合法确定药物检出限及线性范围,在线性范围内分别设置低、中和高3个浓度组,检测质控偏差、日间精密度和小鼠血清干扰水平。选用30只KM小鼠进行药物代谢曲线测试,分为庆大霉素组(肌肉注射5μg·g-1)、地高辛组(灌胃20ng·g-1)和丙戊酸钠组(灌胃15μg·g-1),每组10只,给药后24h内取5个时间点(1、3、6、12和24h)测定小鼠血药浓度。结果:FPIA法检测3种药物的检出限均在50μg·L-1以下,线性范围较宽(大于10倍检出限),检测质控误差小于5%,日间精密度较高[中和高浓度组变异系数(CV)<5%],小鼠血清对庆大霉素和地高辛的检测效果无明显影响[误差百分比(ER)<5%],高浓度血清对丙戊酸钠的检测效果有一定的负向影响(50%血清组ER为-12.84%)。小鼠给药1h后庆大霉素达到血药浓度峰值,半消期3h;1h后地高辛达到血药浓度峰值,半消期>24h;3h后丙戊酸钠达到血药浓度峰值,半消期6~12h。结论:FPIA法测定小分子药物小鼠血药浓度所需样本量小,精确度高,前处理简单,具有高通量和快速检测的优势特点,可广泛应用于药理学、药剂学和临床检测研究中。

荧光偏振免疫分析技术研究进展

荧光偏振免疫分析技术是一种均相荧光免疫分析法,具有快速、灵敏和环保等优点。本文对这一技术的研究进展作了评述,介绍了荧光偏振免疫分析技术的基本原理、优越性、示踪物结构设计、制备、及其应用。

荧光偏振免疫分析法研究17种磺胺类药物与抗体亲和力的构效关系

应用4株磺胺二甲基嘧啶(SMZ)多克隆抗体和5种不同结构的荧光标记物(Tracer)建立了荧光偏振免疫分析(FPIA)检测SMZ的方法.讨论了4株多抗对SMZ的检测灵敏度和对17种磺胺类药物(SAs)的相对亲和力趋势,从药物分子二维结构上探讨了多抗对小分子抗原的识别能力.结果表明,3号多抗对SMZ的灵敏度最高,但是4株多抗对17种SAs的相对亲和力趋势相似,说明抗体对抗原的结合力大小与抗原的化学结构有关.

人血清中庆大霉素浓度的荧光偏振免疫分析法

本文通过制备荧光素标记庆大霉素和抗庆大霉素兔血清，建立了人血清中庆大霉素的荧光偏振免疫分析技术。方法的灵敏度0．3mg/L,批内、批间误差CV均小于6％，平均回收率104％，合用其它抗生素不干扰测定结果，与微生物法及放射免疫法比较相关系数γ分别为0．9687和0．9544。荧光偏振免疫法的建立，为临床测定床大霉素浓度提供了一种快速、精确和灵敏的新方法。

荧光偏振免疫分析在农药残留检测中的研究进展

荧光偏振免疫分析技术是一种将荧光偏振原理和小分子竞争免疫原理相结合的免疫分析方法,主要通过检测荧光标记小分子抗原与抗体结合前后荧光偏振值的变化来间接反映样本中目标分析物的含量。该分析方法用时短,无需洗涤,稳定性较好,适用于样本的快速大量筛选,目前在一些常见农药上有应用报道。本文主要总结了荧光偏振免疫分析技术的发展历程、方法原理以及目前在农药残留检测中的研究现状。

荧光偏振免疫分析法监测丙戊酸血药浓度的结果分析

丙戊酸钠（sodium valproate，VPA）是治疗癫痫的一线药物，具有疗效高，安全性好，对患者认知功能影响少等药效特点。但是，VPA的药动学和药效学个体差异很大，剂量难以掌握，给药剂量和血药浓度相关性不稳定，而毒性反应与血药浓度相关^[1]。

荧光偏振免疫分析测定磺胺甲基嘧啶研究

磺胺甲基嘧啶(sulfamerazine,SMR)的芳伯胺基与荧光素异硫氰酸钠异构体Ⅰ(fluorescein isothio-cyanate,FITC)的异硫氰基在常温下可以发生偶联反应,经薄层色谱分离之后,可以得到SMR的FITC荧光标记物(Tracer)SMR-FITC。应用荧光偏振免疫分析(fluorescence polarization immunoassay,FPIA),以SMR单克隆抗体为竞争免疫试剂,优化了检测条件,建立了SMR的FPIA检测方法。在选定的条件下,SMR的半数抑制量(IC50)为23.4ng·mL-1,最低检测限量为2.3ng·mL-1,检测范围为5.4到218.8ng·mL-1,可以达到食品中SMR的最高残留限量要求。同时对16种磺胺类药物的交叉反应做了初步研究,结果显示对SMR、磺胺二甲基嘧啶(sulfamethazine,SMZ)、磺胺嘧啶(sulfadiazine,SDZ)交叉反应率分别为100%,25%和8.6%,对其他磺胺类药物的交叉反应率均低于5%。

血清中茶碱荧光偏振免疫测定试剂盒的研制

本文报道一种新的茶碱ＦＰＩＡ试制盒的研制工作，包括７－氨基丁基－茶碱－ＤＴＡＦ轭合物的设计合成，兔抗茶碱血清的制备、方法学考核及与进口同类试剂盒和紫外法作相关性研究等。实验结果表明，国产茶碱ＦＰＩＡ试剂盒的各项分析指标已能满足药物监测的要求，而且，在茶碱血清浓度监测和药代动力学研究中有较好的推广价值。

大田软海绵酸荧光偏振免疫分析方法研究

设计使用荧光试剂PDAM与大田软海绵酸单（OA）反应合成了荧光标记物,并在OA单克隆抗体的基础上建立了OA荧光偏振免疫（FPIA）检测方法。该FPIA方法检测限为4.6 ng/mL,检测范围为7.0-88.7 ng/mLI,C50为24.9 ng/mL。本方法操作简单、稳定,有望应用于高通量筛查牡蛎样品中OA含量。

丁草胺荧光偏振免疫分析——示踪物的合成与鉴定

【目的】为建立除草剂丁草胺的荧光偏振免疫检测方法,对关键试剂示踪物进行合成与鉴定。【方法】以异硫氰酸荧光素、乙二胺和己二胺为原料,合成了异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)和异硫氰酸荧光素己二胺(HDF)两种中间体,薄层层析法分离出目标产物,电喷雾电离质谱法鉴定;然后将5-氨基荧光素(AF)、EDF、HDF分别与丁草胺半抗原(BMPA)连接,得到3种不同间隔臂的示踪物(BMPA-AF,BMPA-EDF和BMPA-HDF),利用抗血清稀释曲线测定抗血清效价,竞争抑制曲线测定不同示踪物检测灵敏度。【结果】3种示踪物合成成功,抗血清稀释曲线和竞争抑制曲线显示3种示踪物的抗血清效价分别为1/600、1/1500和1/600,半抑制浓度分别为1292、433和298ng·ml-1。【结论】合成出3种不同间隔臂的丁草胺示踪物,对示踪物的性质进行初步研究,为下一步建立丁草胺荧光偏振免疫分析方法奠定了基础。

荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定人血浆茶碱浓度

目的比较荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法测定茶碱血药浓度的结果,以指导临床合理用药。方法用荧光偏振免疫分析法与化学发光酶免疫法平行测定18例老年慢性阻塞性肺疾病患者的茶碱血药浓度。结果两种方法之间有良好的线性关系,比较线性回归方程为Y=0.830 5X+0.875 7,相关系数r=0.991 3;144例次茶碱血药浓度测定结果表明,荧光偏振免疫分析法比化学发光酶免疫法测得值低,平均低(1.81±0.62)mg.L-1(P<0.05),18例患者茶碱药时数据经计算机拟合,均呈单室开放模型,两法所得药动学参数均差异无显著性。结论两法均准确、灵敏、稳定,且均具特异性,但从经济学角度考虑,化学发光酶免疫法更适用于茶碱的临床血药浓度监测。