单酯型生物碱类对CHF大鼠心肌细胞的保护作用及机制

目的 分析单酯型生物碱类对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法 将100只大鼠随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)和高剂量组(E组),每组20只。C、D、E组在慢性心力衰竭模型建模成功后给予附子浓缩液灌胃,剂量分别为2.79、5.57、11.14 g/kg。灌胃6周后检测各组大鼠病理组织学变化、超声心动图指标、心肌细胞凋亡率,心肌组织促凋亡蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶8(Caspase-8)表达量,心肌细胞自噬蛋白、BNP、AI、PO_(2)、IL-6、TNF-α水平及PI3K/AKT通路蛋白表达量。结果 B~E组超声心动图指标室间隔收缩末期厚度(IVSs)、室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左心室后壁收缩末期厚度(LVPWs)、左心室后壁舒张末期厚度(LVPWd)。心肌细胞凋亡率,Bax、Caspase-8表达量,IL-6、TNF-α水平,心肌细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ,BNP及AI水平均高于A组,LVEF、Bcl-2表达量、PO_(2)水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量均低于A组(P<0.05);C~E组IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率及Bax、Caspase-8表达量,IL-6、TNF-α水平、自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ、BNP及AI水平低于B组,LVEF、Bcl-2表达量、PO_(2)水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量高于B组(P<0.05);随着附子浓缩液剂量的增加,IVSs、IVSd、LVPWs、LVPWd、心肌细胞凋亡率、Bax、Caspase-8表达,IL-6、TNF-α水平、心肌细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/Ⅰ、BNP及AI水平降低,LVEF及Bcl-2表达、PO_(2)水平、心肌细胞自噬蛋白P62及p-PI3K、p-AKT表达量升高(P<0.05)。结论 单酯型生物碱类通过上调p-PI3K、p-AKT蛋白表达量,激活PI3K/AKT通路,缓解心力衰竭恶性进展,且呈剂量依赖性。

附子中单酯型生物碱类成分靶向ACE2-Ang1-7轴治疗慢性心力衰竭的研究进展

心力衰竭是指心脏无法泵血,除了心脏移植或心室辅助装置外,尚无更有效的治疗方法的一个公共卫生问题.肾素-血管紧张素系统(RAS)在调节正常生理和心血管疾病的发病机制中具有重要作用.血管紧张素转换酶2(ACE2)及其产物血管紧张素1-7(Ang1-7)被认为对其他已知的RAS成员的不良反应具有抵消作用.现代药理学研究发现,单酯型生物碱是附子二萜类双酯型生物碱的水解产物,具有明显降压,抑制心肌收缩力等作用,但其作用机制还有待研究.本文论述了慢性心衰中ACE2、Ang(1-7)的基本特性及其相互关系,探讨了通过靶向ACE2-Ang(1-7)-MAS受体轴从而产生心血管保护作用的机制,总结了近年来附子中单酯型生物碱靶向ACE2-Ang(1-7)-MAS轴的抗心衰作用研究进展,为深入研究心力衰竭以及药物的开发利用提供依据.

乌头属药材中单酯型乌头碱的ELISA法测定

以苯甲酰新乌头原碱合成人工半抗原3-戊二酰基苯甲酰新乌头原碱，并采用活泼酯法使其与牛血清白蛋白（BSA）结合，制得苯甲酰新乌头原碱免疫抗原。以此抗原免疫新西兰兔，获得苯甲酰新乌头原碱抗体，可特异性识别单酯型乌头碱类生物碱。由此建立了酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测乌头属药材中的单酯型乌头碱类生物碱。本法的线性范围为0．005～5gg／ml，检测限为139pg，定量限为575Pg，平均回收率97．31％（RSD≤1．68％）。ELISA法的灵敏度较HPLC法高约112倍。

HPLC分析不同蒸制温度下川乌化学成分的变化

目的:HPLC分析不同蒸制温度下川乌化学成分变化情况。方法:在100℃、110℃条件下分别蒸制川乌0、0.5、1、2、4、8 h,测定制川乌中双酯型生物碱和单酯型苯甲酰类生物碱含量,并通过指纹图谱结合主成分分析(PCA)对川乌蒸制过程中化学成分变化进行分析。结果:2种蒸制条件下,双酯型生物碱水解转化成单酯型苯甲酰类生物碱,110℃在1~2 h完成乌头碱的转化,达到炮制目的。结论:高温蒸制方法简单、可行而且易于控制,可作为代替川乌传统炮制工艺的新方法。