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木瓜凝乳蛋白酶的单链单甲氧基聚乙二醇修饰产物的检测与分析 被引量:7
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作者 舒薇 郭勇 +1 位作者 贺丽苹 温宏睿 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期64-68,共5页
在底物保护下,采用三聚氰氯活化的单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,反应混合物经毛细管电泳(CE)分析及SephadexG75分离纯化获得修饰度为平均每分子Cp偶联3~4个mPEG1长链的修饰纯酶(mPEG1Cp).以三硝基... 在底物保护下,采用三聚氰氯活化的单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)对木瓜凝乳蛋白酶(Cp)进行了共价修饰,反应混合物经毛细管电泳(CE)分析及SephadexG75分离纯化获得修饰度为平均每分子Cp偶联3~4个mPEG1长链的修饰纯酶(mPEG1Cp).以三硝基苯磺酸(TNBS)法与CE法作对比测定了该修饰酶的平均氨基修饰度;以ELISA法检测mPEG1Cp的抗原性;用紫外吸收光谱和荧光发射光谱对mPEG1Cp进行了结构的测定分析.结果表明:Cp的mPEG1修饰产物经毛细管电泳检测为多组分体系,最大产物峰为平均每分子Cp偶联3~4个mPEG1的低修饰度修饰酶,其相对分子质量为40712~46044;该修饰酶抗原抗体结合能力完全消失,体内活性半衰期是原酶的1.6倍,同时酶活力保持在36.5%;紫外吸收光谱和荧光发射光谱分析表明:mPEG1Cp结构有轻度的改变. 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 单链甲氧基乙二醇(mpeg1) 化学修饰 修饰产物 检测分析
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木瓜凝乳蛋白酶的单甲氧基聚乙二醇化学修饰及其对酶活力和抗原性的影响 被引量:4
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作者 舒薇 房师松 +1 位作者 崔堂兵 郭勇 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期304-307,共4页
目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰对酶活力和抗原性的影响,为该酶的修饰改性提供实验依据。方法在底物保护和无底物保护下,分别以单甲氧基聚乙二醇的两种活化产物mPEG1和mPEG2对木瓜凝乳蛋白酶进行共价修饰... 目的研究木瓜凝乳蛋白酶(Cp)的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)化学修饰对酶活力和抗原性的影响,为该酶的修饰改性提供实验依据。方法在底物保护和无底物保护下,分别以单甲氧基聚乙二醇的两种活化产物mPEG1和mPEG2对木瓜凝乳蛋白酶进行共价修饰,以三硝基苯磺酸法测定各修饰酶的平均氨基修饰度;以大分子酪蛋白和小分子BAEE为底物分别测定各修饰酶的酶活性;以ELISA法检测各修饰酶的抗原性。结果①mPEG1和mPEG2修饰均能降低及消除酶的抗原性,其中mPEG2的效果更为明显。②二者的化学修饰均使酶活力有所下降,其中mPEG1修饰酶的酶活力(分别以酪蛋白和BAEE为作用底物,下同)均高于mPEG2修饰酶的酶活力(尤其是当底物为大分子蛋白质时)。③底物保护下的修饰酶酶活力均显著高于无底物保护的酶活力。结论以mPEG1为修饰剂,在底物保护下的Cp修饰能在消除抗原性的同时,获得仍具较高酶活力的修饰酶。 展开更多
关键词 木瓜凝乳蛋白酶 甲氧基乙二醇(mpeg) 化学修饰 酶活力 抗原性
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用活化的单甲氧基聚乙二醇修饰L-天冬酰胺酶 被引量:6
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作者 史凌洋 魏东芝 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期601-604,共4页
使用活化的单甲氧基聚乙二醇 ( m PEG2 )对 L -天冬酰胺酶进行修饰 ,修饰过程中加入底物 L-天冬酰氨保护酶的活性中心。得到的修饰酶抗体结合能力消失 ,保留酶比活力 32 .8% ,酶的常温稳定性和热稳定性均有显著提高。荧光胺法分析残余... 使用活化的单甲氧基聚乙二醇 ( m PEG2 )对 L -天冬酰胺酶进行修饰 ,修饰过程中加入底物 L-天冬酰氨保护酶的活性中心。得到的修饰酶抗体结合能力消失 ,保留酶比活力 32 .8% ,酶的常温稳定性和热稳定性均有显著提高。荧光胺法分析残余氨基数目得出酶分子的 92个自由氨基中有5 展开更多
关键词 mpeg2 L-天冬酰胺酶 修饰 荧光胺法 甲氧基乙二醇 抗癌药物 酶活力
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胰高血糖素样肽-1在乙醇中的聚乙二醇修饰 被引量:1
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作者 王友傲 翟艳琴 +2 位作者 雷建都 马光辉 苏志国 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期593-597,共5页
以乙醇为溶剂,单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯(mPEG-SC)为修饰剂,对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)进行了修饰反应条件的优化,同时对单修饰产物Mono-PEG-GLP-1进行分离纯化,并考察了其体外稳定性和体内活性.得到的优化反应条件为:GLP-1浓度... 以乙醇为溶剂,单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯(mPEG-SC)为修饰剂,对胰高血糖素样肽-1(GLP-1)进行了修饰反应条件的优化,同时对单修饰产物Mono-PEG-GLP-1进行分离纯化,并考察了其体外稳定性和体内活性.得到的优化反应条件为:GLP-1浓度1mg/mL,mPEG-SC与GLP-1摩尔比1:1,37℃下反应24h,该产物最高转化率达77%.采用冷冻离心方式对Mono-PEG-GLP-1进行初步分离和浓缩,然后经反相液相色谱进一步高效纯化,纯度可达97%以上.体外实验表明,Mono-PEG-GLP-1在血清中具有更好的稳定性及更强的抗胰蛋白酶消化能力.体内动物实验表明,Mono-PEG-GLP-1具有更好的降血糖作用. 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-1 甲氧基乙二醇琥珀酰亚胺碳酸酯 乙二醇修饰 乙醇
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聚乙二醇修饰重组人粒细胞集落刺激因子反应过程的优化
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作者 杨瑞娥 贠强 +3 位作者 陈婷 谭天伟 马光辉 苏志国 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期86-89,共4页
采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰重组人粒细胞集落刺激因子rhG-CSF,考察了各因素对蛋白质平均修饰度及体外生物活性的影响,并对修饰产物的稳定保存条件进行了初步探讨.通过四因素四水平正交法和单因素实验结合,优化修饰条件为:PEG与G-CS... 采用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰重组人粒细胞集落刺激因子rhG-CSF,考察了各因素对蛋白质平均修饰度及体外生物活性的影响,并对修饰产物的稳定保存条件进行了初步探讨.通过四因素四水平正交法和单因素实验结合,优化修饰条件为:PEG与G-CSF摩尔比为25:1,pH7.6的硼酸盐缓冲环境,反应时间40min,反应温度22℃.在此条件下,PEG-G-CSF的平均修饰度为50%,活性可保留40%左右.研究还发现,不同的添加剂影响PEG-G-CSF的保存稳定性,人血清白蛋白和甘露醇是两种效果最好的保护剂,在它们的存在下,PEG-G-CSF溶液在4℃放置一个月后活性保留92%,三个月后保留51%. 展开更多
关键词 粒细胞集落刺激因子(G—CSF) 甲氧基乙二醇(mpeg) 化学修饰 生物活性
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壳聚糖-mPEG温敏水凝胶载药系统的制备及释药行为 被引量:11
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作者 孙佳丽 蒋国强 丁富新 《清华大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期909-912,931,共5页
壳聚糖-mPEG亲水性好,可制成适合生物大分子药物递送的反向温敏水凝胶给药系统。为改善壳聚糖(CS)在中性条件下水溶性和亲水性,用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰壳聚糖,得到带有mPEG支链的改性材料——CS-mPEG)。通过修饰方法优化,得到聚... 壳聚糖-mPEG亲水性好,可制成适合生物大分子药物递送的反向温敏水凝胶给药系统。为改善壳聚糖(CS)在中性条件下水溶性和亲水性,用单甲氧基聚乙二醇(mPEG)修饰壳聚糖,得到带有mPEG支链的改性材料——CS-mPEG)。通过修饰方法优化,得到聚乙二醇(PEG)取代率为21%~25%的CS-mPEG。该CS-mPEG水溶性好,37℃溶胶-凝胶转变时间小于10 min。体外释药结果显示:该CS-mPEG水凝胶对生物大分子溶菌酶及小分子纳曲酮均有较好控释作用,且mPEG支链的亲水作用能保护蛋白活性,显著提高了活性蛋白的累积释放率。 展开更多
关键词 甲氧基乙二醇(mpeg) 凝胶给药系统 溶菌酶 反向温敏
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Injectable Supramolecular Hydrogels via Inclusion Complexation of m PEG-grafted Copolyglutamate with α-Cyclodextrin 被引量:2
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作者 Lian-ying Wu Lei Yu +1 位作者 Xiao-hui Fu 李志波 《Chinese Journal of Polymer Science》 SCIE CAS CSCD 2015年第8期1140-1149,共10页
A series of monomethoxy poly(ethylene glycol)(m PEG) grafted copolyglutamates(Pm PEGs) were synthesized through ring-opening polymerization(ROP) followed by click chemistry.Supramolecular hydrogels based on polymer in... A series of monomethoxy poly(ethylene glycol)(m PEG) grafted copolyglutamates(Pm PEGs) were synthesized through ring-opening polymerization(ROP) followed by click chemistry.Supramolecular hydrogels based on polymer inclusion complexes(ICs) between Pm PEG and α-cyclodextrin(α-CD) were prepared in aqueous solution.The rheological measurements indicated their gelation properties were affected by several factors including the m PEG length,graft density and the sample concentration.These hydrogels displayed thermo-sensitive gel-sol transition under appropriate conditions due to the reversible m PEG and α-CD inclusion complexation.These hydrogels also showed p H-sensitive behavior due to the deprotonate of carboxylic acid side groups.The ICs formation of a channel-type crystalline structure induced gelation mechanism was verified by various techniques.In vitro cytotoxicity assays demonstrated that the supramolecular hydrogels are nontoxic and cytocompatible. 展开更多
关键词 mpeg 包合配合物 水凝胶 超分子 Α-环糊精 接枝 甲氧基乙二醇 注射
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