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铂电极表面生物素-亲和素固载单链脱氧核糖核酸的电化学传感器 被引量:8
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作者 王保珍 杜晓燕 +1 位作者 郑晶 金滨锋 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期789-792,共4页
通过直接吸附将亲和素固定在Pt电极表面,联于生物素标记的脱氧核糖核酸(DNA)探针,制备了电化学基因传感器,建立了Pt电极表面修饰单链脱氧核糖核酸(ssDNA)的方法。修饰电极与待测溶液中人工合成的转基因食品中常有的花椰菜花叶病毒35S启... 通过直接吸附将亲和素固定在Pt电极表面,联于生物素标记的脱氧核糖核酸(DNA)探针,制备了电化学基因传感器,建立了Pt电极表面修饰单链脱氧核糖核酸(ssDNA)的方法。修饰电极与待测溶液中人工合成的转基因食品中常有的花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)或根癌农杆菌终止子(NOS)DNA片段进行杂交,以邻菲罗林钴络合物[Co(phen)3+3]为杂交指示剂,循环伏安法测量,通过杂交前后指示剂峰电流的变化检测DNA杂交的量。研究了电极修饰、杂交反应及测量的适宜条件,在优化实验条件下,峰电流的差值与DNA杂交量之间有良好的线性关系,相关系数r=0.9996。杂交后的电极经热变性再生,可重复使用多次。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸 电极表面 电化学传感器 亲和素 单链 花椰菜花叶病毒 DNA杂交 固载 35S启动子 生物素标记 基因传感器 DNA片段 根癌农杆菌 转基因食品 循环伏安法 可重复使用 表面修饰 PT电极 人工合成 修饰电极 钴络合物
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不同材料制备的各种脱氧核糖核酸
2
作者 克航 《上海化工》 CAS 1985年第3期59-59,共1页
脱氧核糖核酸这类核酸,是由脱氧核糖核苷酸构成的生物高分子聚合物;分子极为庞大,分子量一般至少在百万以上。脱氧核糖核酸是生命的最基本物质之一,在染色体中与蛋白质相结合,是储藏、复制和传递遗传信息的主要物质基础。
关键词 脱氧核糖核酸 精子 生殖细胞 细球菌 单链
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铈离子及其配合物对寡聚脱氧核苷酸的水解断裂作用 被引量:1
3
作者 沈鹤柏 夏静芬 +1 位作者 吴庆锋 康玉专 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期381-384,共4页
报道了铈离子及其配合物对人工设计合成的 2 6个碱基的单链寡聚脱氧核糖核酸 (ODN)的水解断裂作用。Ce3+ 需要有氧气存在的条件下 ,氧化生成Ce4 + 后才能切断ODN。研究了各种条件下Ce4 + 与ODN的切断反应 ,在酸性和弱碱性条件下都能水... 报道了铈离子及其配合物对人工设计合成的 2 6个碱基的单链寡聚脱氧核糖核酸 (ODN)的水解断裂作用。Ce3+ 需要有氧气存在的条件下 ,氧化生成Ce4 + 后才能切断ODN。研究了各种条件下Ce4 + 与ODN的切断反应 ,在酸性和弱碱性条件下都能水解切断ODN ,在近中性时切断作用最强。随着反应温度的升高 ,Ce4 + 浓度的增大 ,反应时间的延长 ,切断反应越来越明显。Ce4 + 与氮三乙酸生成配合物以后也能切断ODN。Ce4 + 可作为切断ODN的分子剪刀。 展开更多
关键词 稀土 单链寡聚脱氧核糖核酸 水解切断反应 电泳 DNA
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脱氧核糖核酸单链序列的预测 被引量:4
4
作者 江绍钏 章林溪 +1 位作者 夏阿根 陈宏平 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期4337-4342,共6页
利用Langevin动力学方法模拟了脱氧核糖核酸(DNA)单链在电场力作用下穿越纳米孔道的动力学过程.研究表明,不同种类的单体对应着不同的居留时间,相邻单体的居留时间随着孔道长度的增大而减小.在简化模型的基础上,可以从居留时间图中一次... 利用Langevin动力学方法模拟了脱氧核糖核酸(DNA)单链在电场力作用下穿越纳米孔道的动力学过程.研究表明,不同种类的单体对应着不同的居留时间,相邻单体的居留时间随着孔道长度的增大而减小.在简化模型的基础上,可以从居留时间图中一次性地推测出一条DNA链的嘌呤和嘧啶的分布.应用该方法对17条不同序列的DNA链进行了预测,平均准确率为95.1%.在此方法的基础上做一些改进,可以为DNA链的测序提供一种高效的低成本方法. 展开更多
关键词 Langevin动力学 脱氧核糖核酸单链 序列预测
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金电极上巯基修饰单链DNA对[Fe(CN)_6]^(3-/4-)的电催化作用 被引量:1
5
作者 郝青丽 王安子 +3 位作者 程荣恩 杨绪杰 陆路德 汪信 《南京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期388-392,398,共6页
为研制简易非标记脱氧核糖核酸(DNA)电化学传感器,制备了固定在金电极上的DNA探针。研究了铁氰化钾在裸金电极、巯基化单、双链DNA(HS-ssDNA,HS-dsDNA)修饰金电极上的电化学行为,探讨了铁氰化钾浓度和离子强度对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学... 为研制简易非标记脱氧核糖核酸(DNA)电化学传感器,制备了固定在金电极上的DNA探针。研究了铁氰化钾在裸金电极、巯基化单、双链DNA(HS-ssDNA,HS-dsDNA)修饰金电极上的电化学行为,探讨了铁氰化钾浓度和离子强度对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为的影响。结果发现:在低离子强度下,HS-ssDNA对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为有电催化作用,导致[Fe(CN)6]3-/4-在HS-ssDNA修饰的金电极(HS-ssDNA/Au)上的峰电流远远大于在裸电极上的峰电流;而HS-dsDNA则没有这种电催化活性;电极上的DNA杂交后阻碍了电子的传递,导致HS-dsDNA修饰金电极(HS-dsDNA/Au)上的[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为消失;巯基修饰的单链DNA对[Fe(CN)6]3-/4-的电催化具有特异性。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸 金电极 巯基化单链脱氧核糖核酸 [Fe(CN)6]3-/4- 电催化 电化学
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多发性骨骺发育不良患者软骨寡聚物基质蛋白基因突变的研究 被引量:3
6
作者 刘晓梅 麻宏伟 +3 位作者 姜俊 王阳 王岳平 王立 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期143-145,共3页
目的:探讨我国多发性骨骺发育不良患者中软骨寡聚物基质蛋白(COMP)基因的突变情况。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)结合DNA直接测序对我国临床诊断为多发性骨骺发育不良的10例患者,其10名父母及30名正常对照进行C... 目的:探讨我国多发性骨骺发育不良患者中软骨寡聚物基质蛋白(COMP)基因的突变情况。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性技术(PCR-SSCP)结合DNA直接测序对我国临床诊断为多发性骨骺发育不良的10例患者,其10名父母及30名正常对照进行COMP基因第10,13和14外显子区域突变分析。结果:正常对照SSCP分析均表现为相同带型。1例散发重型患者COMP基因外显子14区检测到单链泳动变位,测序结果显示第14内含子的近5’端存在纯合性G→A变异。结论:该变异可能是一种新型点突变,与患儿临床表型有关,也可能是COMP基因第14内含子中的一种单核苷酸多态。 展开更多
关键词 多发性骨骺发育不良 软骨寡聚物基质蛋白 聚合酶链反应 单链构象多态性 基因突变
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富G寡聚核苷酸修饰的金纳米粒子与细胞相互作用的研究 被引量:1
7
作者 孙艳红 魏佳 +1 位作者 王振新 孟宪瑛 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1357-1362,共6页
通过Au-S键将两种链长一致、序列不同的富鸟嘌呤(G)单链寡聚核苷酸PolyG_1和PolyG_2分别修饰到13 nm金纳米粒子(GNPs)表面,合成了两种单链寡聚核苷酸(ssDNAs)与GNPs复合物(PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs)。所合成的PolyG_1-GNPs和PolyG_2-... 通过Au-S键将两种链长一致、序列不同的富鸟嘌呤(G)单链寡聚核苷酸PolyG_1和PolyG_2分别修饰到13 nm金纳米粒子(GNPs)表面,合成了两种单链寡聚核苷酸(ssDNAs)与GNPs复合物(PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs)。所合成的PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs在复杂分散介质中具有良好的胶体稳定性。采用紫外-可见吸收光谱、细胞透射电镜和电感耦合等离子体质谱等分析方法,考察ss DNA序列对PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs与细胞相互作用的影响。结果表明,PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs均具有较低的细胞毒性,并表现与能量相关的细胞内吞行为,ssDNA的序列决定PolyG_1-GNPs和PolyG_2-GNPs的细胞吞噬量及其在细胞内的分散状态,具有G4二级结构的PolyG_2能够显著增加细胞对其所修饰的GNPs的吞噬量和GNPs在细胞中的稳定性。 展开更多
关键词 富G单链寡聚核苷酸 活细胞 金纳米粒子 相互作用
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利用电喷雾质谱研究单链寡聚核苷酸与人参皂苷的相互作用 被引量:3
8
作者 宋凤瑞 闫存玉 +2 位作者 刘宁 刘志强 刘淑莹 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1103-1108,共6页
选择与SARS病毒相关的寡聚核苷酸片段作为靶分子,利用电喷雾质谱研究人参皂苷与靶分子形成的非共价复合物.探讨了实验条件对单链寡聚核苷酸靶分子与皂苷类化合物相互作用的影响;发现非共价作用强度的大小与人参皂苷苷元、糖链的结构有关... 选择与SARS病毒相关的寡聚核苷酸片段作为靶分子,利用电喷雾质谱研究人参皂苷与靶分子形成的非共价复合物.探讨了实验条件对单链寡聚核苷酸靶分子与皂苷类化合物相互作用的影响;发现非共价作用强度的大小与人参皂苷苷元、糖链的结构有关,包括人参皂苷苷元的类型、羟基的数目、糖链的长短.发现人参皂苷与单链寡聚核苷酸靶分子相互作用的强度具有如下规律:三醇型苷元>二醇型苷元,三醇型皂苷>二醇型皂苷;在三醇型皂苷中,三糖>二糖>四糖,一糖>苷元,具有相同糖单位的二醇型皂苷的四糖苷中,分子量小的皂苷>分子量大的皂苷,同分异构体中,同为木糖末端的Rb2>Rc,即吡喃型>呋喃型.上述研究结果将有助于阐述人参皂苷的药理活性、构效关系. 展开更多
关键词 单链寡聚核苷酸 人参皂苷 非共价复合物 影响因素 电喷雾质谱
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姬松茸多糖抗肿瘤的实验研究 被引量:15
9
作者 李兴玉 王非凡 +1 位作者 张星星 韩西群 《中国食用菌》 北大核心 2004年第4期42-44,共3页
应用细胞培养技术 ,观察了姬松茸多糖对K5 6 2和HL - 6 0细胞系的影响。研究结果表明 ,实验组活细胞数、集落形成明显减少 ,荧光显微镜下所见凋亡细胞显著增加。提示姬松茸多糖具有抗肿瘤效果。为了探讨姬松茸多糖抗肿瘤的机理 ,本实验... 应用细胞培养技术 ,观察了姬松茸多糖对K5 6 2和HL - 6 0细胞系的影响。研究结果表明 ,实验组活细胞数、集落形成明显减少 ,荧光显微镜下所见凋亡细胞显著增加。提示姬松茸多糖具有抗肿瘤效果。为了探讨姬松茸多糖抗肿瘤的机理 ,本实验还应用反义寡聚脱氧核糖核酸技术 ,进一步观察了姬松茸多糖与人端粒酶反义核酸协同诱导HL - 6 0细胞系凋亡的作用 ,实验结果表明 ,姬松茸多糖与反义寡核苷酸联合使用 ,可促进HL- 6 0细胞凋亡。 展开更多
关键词 姬松茸多糖 抗肿瘤作用 细胞培养技术 反义寡聚脱氧核糖核酸技术 细胞凋亡
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人源性天然抗体库的构建及淀粉样蛋白Aβ_(1-42)寡聚体单链抗体的筛选和鉴定 被引量:2
10
作者 包福祥 何金生 +5 位作者 曹贵方 尹凡 王鑫 庞思媛 张莹 洪涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1195-1203,共9页
本研究旨在利用噬菌体展示技术构建人源性天然抗体库,以可溶性Aβ1-42寡聚体对抗体库进行筛选获得针对低分子量Aβ1-42寡聚体的特异性单链抗体。利用RT-PCR法从10个健康人外周血淋巴细胞中得到全套人抗体VH和VL基因,经过重叠延伸PCR将VH... 本研究旨在利用噬菌体展示技术构建人源性天然抗体库,以可溶性Aβ1-42寡聚体对抗体库进行筛选获得针对低分子量Aβ1-42寡聚体的特异性单链抗体。利用RT-PCR法从10个健康人外周血淋巴细胞中得到全套人抗体VH和VL基因,经过重叠延伸PCR将VH和VL连接得到scFv片段,将scFv片段酶切后克隆至pCANTAB5E噬菌体载体,电转化TG1感受态菌,获得库容为2.5×109单链抗体库。经辅助噬菌体M13K07拯救,以可溶性Aβ1-42寡聚体为抗原,对抗体库进行4轮筛选,ELISA法筛选特异性识别Aβ1-42寡聚体的阳性克隆,将筛选到的阳性克隆B19转化至E.coli HB2151菌,诱导表达可溶性scFv抗体。SDS-PAGE及Western blotting分析结果显示可溶性scFv抗体获得了正确表达,且能够与Aβ1-42三聚体及纤维特异性结合,亲和力(Kd)为9×10-6 mol/L。Aβ1-42寡聚体特异性单链抗体的获得为老年性痴呆(AD)的治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人源性天然抗体库 Aβ1-42寡聚 单链抗体 老年性痴呆
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Toll样受体-9在肾小球肾炎进展中的作用 被引量:2
11
作者 罗萍 卢雪红 +1 位作者 吴曼 顾华 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1005-1008,F0003,共5页
目的:通过观察CpG-ODN对肾小球肾炎刺激后Toll样受体-9(TLR9)的变化,探讨TLR9在肾小球肾炎发生、发展中的变化及作用。方法:Wistar雄性大鼠,随机分为正常组(N组)、抗-thy1.1肾炎模型组(M组)、模型+CpG-ODN注射组(CpG组)、模型+GpC-ODN... 目的:通过观察CpG-ODN对肾小球肾炎刺激后Toll样受体-9(TLR9)的变化,探讨TLR9在肾小球肾炎发生、发展中的变化及作用。方法:Wistar雄性大鼠,随机分为正常组(N组)、抗-thy1.1肾炎模型组(M组)、模型+CpG-ODN注射组(CpG组)、模型+GpC-ODN注射组(GpC组)。各组大鼠分别于用药后2、4、6和8周留取24 h尿;实验第8周留取24 h尿,心脏采血、留取肾脏后处死。用考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量;血清学方法检测血清白蛋白和肾功能;肾脏组织用于肾脏病理检查、NF-κB p65免疫组化染色,RT-PCR法检测肾脏组织内TLR9、INF-γ及IL-6 mRNA的表达。结果:TLR9在M组轻度表达,在给予CpG-ODN刺激后,TLR9、IL-6和IFN-γmRNA在肾脏表达率与M组比较均明显增加,24 h尿蛋白漏出量增多,血清白蛋白显著降低;光镜下可见病理改变明显加重,MCs弥漫性中、重度增生,部分肾小球有细胞性新月体形成,多处粘连,毛细血管襻开放受限,系膜区可见单核巨噬细胞浸润。结论:TLR9介导的趋化因子和趋化因子受体表达加重肾小球肾炎的生化及病理改变,TLR9介导的免疫反应是引起肾小球肾炎不断进展的机制之一。 展开更多
关键词 TOLL样受体-9 系膜增生性肾小球肾炎 寡聚脱氧核糖核酸
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铈氨基酸配合物对Oliogo DNA的切断 被引量:1
12
作者 蒯丽衡 沈鹤柏 +1 位作者 冯旦 周文骏 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期530-532,共3页
Cyclic voltammetry(CV)and ultravioletvisible spectroscopy(UV) were used to study cerium amino acid complexes.The amino acids are Phenylananine,Histidine,Serine,Threonine and Glutamicacid.These amino acids can coor... Cyclic voltammetry(CV)and ultravioletvisible spectroscopy(UV) were used to study cerium amino acid complexes.The amino acids are Phenylananine,Histidine,Serine,Threonine and Glutamicacid.These amino acids can coordinate with cerium ion(Ⅳ) to form complexes at near neutral condition(pH=7).At the same time,the denaturing ployacrylamidegel electrophoresissilver dye method was used to analyze the hydrolysis of 26mers oligodeoxyribonucleotide by cerium amino acid complexes around the neutral condition(pH=7).The results show that these cerium amino acid complexes can cleavage DNA at different degree.We also analyze the possible mechanism of the different hydrolysis effects. 展开更多
关键词 铈氨基酸配合物 OliogoDNA 切断DNA 差示UV CU 电泳 单链寡聚脱氧核苷酸
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盐酸小檗碱与DNA作用的序列特异性研究 被引量:3
13
作者 赵小辉 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期567-571,共5页
基于分子吸收和发射测量,研究了盐酸小檗碱与特定序列DNA间的相互作用。结果发现双链DNA中含有不配对G碱基时,其与盐酸小檗碱作用后产生的光谱特征将明显不同于完全互补的双链DNA。该特征可被用于检测1个错配碱基的双链DNA。利用Hyperch... 基于分子吸收和发射测量,研究了盐酸小檗碱与特定序列DNA间的相互作用。结果发现双链DNA中含有不配对G碱基时,其与盐酸小檗碱作用后产生的光谱特征将明显不同于完全互补的双链DNA。该特征可被用于检测1个错配碱基的双链DNA。利用Hyperchem Professional软件包计算了4种寡聚核苷酸的电荷分布情况,并在此基础上进一步探讨了盐酸小檗碱与寡聚核苷酸之间的作用机理。 展开更多
关键词 盐酸小檗碱 脱氧核糖核酸(DNA) 序列特异性 寡聚核苷酸 电荷分布
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三链DNA稳定性的影响因素
14
作者 刘定燮 王昌才 《生物技术通讯》 CAS 1998年第2期121-124,共4页
介绍了碱基组成、碱基修饰或替代、DNA骨架的修饰、DNA配体的结合及反应体系中的盐离子和pH值等因素对三链DNA稳定性的影响。对三链DNA稳定性研究中应注意的几个问题也作了讨论。
关键词 三链DNA 稳定性 寡聚脱氧核糖核酸
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反义药物的开发与研究进展 被引量:1
15
作者 杜海洲 宋金燕 崔淑艳 《医药世界》 2006年第8期34-35,共2页
反义药物是近20多年来发展起来的一种以反义核酸技术为基础开发的以治疗为目的安全有效的新型药物。反义药物(Antisense drugs)指的是反义脱氧寡核苷酸类药物,主要包括反义DNA(AS-ODN),反义RNA(AS-ON),多肽核酸(PNA),核酶(ribozymer)等... 反义药物是近20多年来发展起来的一种以反义核酸技术为基础开发的以治疗为目的安全有效的新型药物。反义药物(Antisense drugs)指的是反义脱氧寡核苷酸类药物,主要包括反义DNA(AS-ODN),反义RNA(AS-ON),多肽核酸(PNA),核酶(ribozymer)等。其主要是根据碱基互补配时原则和核酸杂交原理,利用人工合成、天然存在的互补寡核苷酸片段,以反向互补方式特异性地与目的基因(单链、双链)或信使核糖核酸(mRNA)的特定序列相结合,从基因复制、特录、剪接、转运翻译等水平上调节靶基因的表达,干托遗传信息从核酸向蛋白质的传递,从而达到抑制、封闭或破坏靶基因表达,达到治疗疾病的目的。因此,反义药物是对多种疾病都有潜在治疗价值的新型药物。自1978年Stephenson和Zamenick首次报道与病毒核酸序列互补的13met反义寡聚脱氧核苷酸能够抑制Rous病毒复制,提出了反义寡聚脱氧核糖核酸能够抑制特定基因表达的概念,并预测了在活疗病毒性疾病和癌症方面的前景。 展开更多
关键词 反义药物 反义寡聚脱氧核苷酸 ANTISENSE 靶基因表达 治疗价值 核苷酸类药物 信使核糖核酸 脱氧核糖核酸 新型药物 基因复制
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医学遗传学
16
《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 1997年第6期17-17,共1页
9719496 确定基因表达量变的特异性/Spanakis E//J Nat Cancer Inst.-1995,87(15).-1179-1180 重医图9719497 转移:机制、路径和连锁反应/Morgan Parkes J H//Am J Roentgenol.-1995,164(5).-1075~1082
关键词 基因表达量 单链构象多态性 医学遗传学 特异性 连锁反应 路径 转移 线粒体脱氧核糖核酸 机制 确定
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科学家破译植物开花时间之谜
17
《农家致富顾问》 2013年第6期13-13,共1页
英国研究人员发现一种名为COO LAIR核糖核酸是植物在不同季节开花的原因。 研究人员以拟南芥作为研究对象,通过遗传筛选和基因克隆等手段,发现COOLAIR受到一种叫做R环的特殊结构的影响。R环是由一条脱氧核糖核酸(DNA)与核糖核酸杂... 英国研究人员发现一种名为COO LAIR核糖核酸是植物在不同季节开花的原因。 研究人员以拟南芥作为研究对象,通过遗传筛选和基因克隆等手段,发现COOLAIR受到一种叫做R环的特殊结构的影响。R环是由一条脱氧核糖核酸(DNA)与核糖核酸杂合链以及一条单链DNA所形成的特殊基因组结构,一般在基因表达转录核糖核酸时可以形成瞬时的R环,但很快会被去除。R环能够通过抑制COOLAIR发挥作用,从而让拟南芥提前开花。研究人员称虽然以拟南芥作为研究对象,但发现的调控机制存在普遍性,可为相应的研究领域提供借鉴。 展开更多
关键词 开花时间 植物 脱氧核糖核酸 科学家 基因组结构 单链DNA 破译 研究人员
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