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题名单链抗体2F3表达条件的优化及其提纯和性质研究
被引量:6
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作者
罗元明
牟颖
魏景艳
阎岗林
罗贵民
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机构
吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室
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出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期74-78,共5页
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基金
国家 8 6 3高技术研究发展计划项目 (No .10 3 13 0 1 0 5 )
国家自然科学基金项目 (No .2 0 0 72 0 10 )
吉林大学博士后人员科研启动基金资助~~
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文摘
将构建好的单链抗体 2F3表达载体pTMF2F3ScFv转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)。先挑选出表达量高的单克隆 ,然后让其在 37℃进行表达 ,并将表达时的培养条件进行优化。实验结果表明 :最佳诱导条件为开始诱导时的菌体密度OD590nm =1.0~ 1.8,所加异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)的浓度为 0 3~ 0 5mmol L ,诱导时间 7h ,优化后目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 2 0 % ,并用发酵罐成功地进行了扩大培养 ,筛选了洗涤包涵体的最佳条件。采用两步法对包涵体复性进行了研究 ,用Westernblotting及ELISA法检测了所表达的单链抗体及其生物活性 。
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关键词
单链抗体2f3
表达条件
优化
提纯
性质
包涵体
ELISA
抗体酶
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Keywords
Scfv, inclusion body, Western blotting, ELISA, abzyme
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分类号
Q813.2
[生物学—生物工程]
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