不对称PCR制备单链探针检测登革Ⅱ型病毒复制型RNA和复制中间体RNA

登革病毒是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒 ,病毒的复制过程发生在感染细胞胞浆 ,复制型 (RF)RNA是病毒半保留复制的循环模板 ,复制中间体 (RI)RNA的合成则是病毒复制所必需的。经RT PCR获得的DNA模板进行不对称PCR扩增 ,当限制性引物终浓度为 2 5 0nmol L ,两引物比例为 1 0 0∶1时 ,即得到不对称PCR的预计单链和双链DNA产物。此单链产物用于标记探针进行核酸杂交。

p53基因单链探针在RDPCR技术中的应用研究

目的 制备单链探针替代原有的双链探针 ,以解决RDPCR技术中存在的杂交效率较低及特异性较差的问题。方法 应用不对称PCR及单引物PCR技术制备大鼠p5 3基因外显子 7单链探针 ,再经RDPCR扩增比较单链与双链探针的杂交效果。结果 不对称PCR及单引物PCR技术制备单链探针均获得成功 ;目的基因单链探针杂交条带清晰且几乎无背景值。结论 与双链探针比较 ,单链探针的应用可以明显提高RDPCR技术杂交的敏感性及特异性。

高效单链DNA探针在β－珠蛋白基因表达调控研究中的应用

直接以克隆的逆病毒载体为模板，在反应管中加入适当比例的α－３２Ｐ－ｄＡＴＰ及其他三种ｄＮＴＰ，以单引物进行线性聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，标记与扩增同时进行，经过一轮ＰＣＲ（５０次循环），可得到高度特异及高效的单链ＤＮＡ探针。作者已将其成功地应用于人类β－珠蛋白基因表达调控的研究。

支原体DNA探针诊断药

中外制药公司5月10日获准引进以美国Gen-Probe公司制造的支原体为对象的放射性(125I标记)DNA探针诊断药.肺炎支原体DNA探针".这是继东的人乳头瘤病毒（HPV）、的乙型肝炎病毒的检查药之后被批准引进的第三种诊断试剂.预计作为体外诊断药9月份开始销售.

核酸探针技术

着重对核酸探针的标记物、种类、检测原理等作出总结,并对它的应用前景作出展望。

结核杆菌耐药性调查与基因突变分析

目的了解结核分支杆菌耐药性与基因突变情况,分析耐药表型与基因突变的相关性。方法从临床标本中分离培养、鉴定结核分支杆菌;应用药敏试验、单链探针反向杂交试验技术(LiPA)和基因测序分析结核分支杆菌耐药性与基因突变情况。结果50株结核分支杆菌中,12株耐异烟肼(INH),7株耐利福平(RFP),15株耐链霉素(SM),2株耐乙胺丁醇(EMB)。LiPA检测耐RFP菌株,4株rpoB基因531位TCG→TTG突变;耐INH菌株中5株KatG基因315位AGC→ACC突变;耐SM菌株中6株、SM敏感株1株rpsl基因43位AAG→AGG突变,1株耐SM菌株rpsl基因88位AAG→AGG突变;rrs基因未检测到突变;1株耐EMB菌株与1株EMB敏感株的embB基因306位发生ATG→GTG突变。结论本市结核分支杆菌的耐药性增加的趋势显著,加强监测与综合干预非常必要。

面向穿戴或植入式临床应用的ssDNAGFET纳米生物传感器发展现状

单链DNA探针-石墨烯场效应管(ssDNA-GFET)纳米生物传感器在可穿戴或可植入式临床应用领域有着广泛前景。介绍了现有ssDNA-GFET的应用、标志物检测性能提升方法、真实人体样本溶液中标志物检测,以及面向可穿戴或可植入式临床应用的柔性化研发现状,总结了ssDNA-GFET在投入实际可穿戴或可植入式临床应用前有待解决的问题。

Autonomous DNA walker： probing cell membrane dynamics

We are all familiar with DNA as the substance that encodes the genomes of all living things.In addition to genetic function,DNA is one of the smartest building blocks for innovative nanostructures.DNA walker is a kind of self-assembled molecular machine that mimics the movement of protein motors in living systems.Usually,DNA walker consists of three parts：a single stranded DNA track,