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基于DNAzyme的单链核酸酶活性研究
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作者 刘卓靓 李旺 +1 位作者 黄燕 姚守拙 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期502-506,共5页
本文报道了一种基于DNAzyme的可视检测单链核酸酶活性的新方法。DNAzyme是一种具有类过氧化物酶活性的单链DNA分子,在H2O2存在下能够催化无色底物2,2′-连氮基-双-(3-乙基并二氢噻唑啉-6-磺酸)二价阴离子(ABTS^2-)氧化成蓝绿色物质A... 本文报道了一种基于DNAzyme的可视检测单链核酸酶活性的新方法。DNAzyme是一种具有类过氧化物酶活性的单链DNA分子,在H2O2存在下能够催化无色底物2,2′-连氮基-双-(3-乙基并二氢噻唑啉-6-磺酸)二价阴离子(ABTS^2-)氧化成蓝绿色物质ABTS^-.自由基。催化体系中单链核酸酶的加入能水解DNAzyme,导致被DNAzyme催化的ABTS^-.减少,从而可以通过颜色变化和紫外-可见吸收光谱检测相应的单链核酸酶活性。以DNase I和S1核酸酶作为单链核酸酶代表进行实验,实验结果表明对DNase I检测的线性范围为0.5-5 U/mL,检出限为0.15 U/mL;对S1核酸酶检测的线性范围为1-10 U/mL,检出限为0.11 U/mL。该方法还能用于单链核酸酶抑制剂的检测,结果表明:Zn2+对DNase I的半数抑制浓度(Ic50)为56.4 mol/L,焦磷酸盐对S1核酸酶的Ic50为1.17 mmol/L。 展开更多
关键词 DNAZYME 单链核酸 DNASEI S1 抑制剂
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基于双重猝灭分子信标及核酸染料Hoechst 33258对单链核酸的双色定量检测 被引量:2
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作者 鲁子敬 熊威威 +2 位作者 翟琨 向东山 谭志斗 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1014-1020,共7页
利用鸟嘌呤(G)碱基和有机猝灭基团Black Hole Quencher1(BHQ-1)对荧光基团6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein group,FAM)的双重猝灭作用构建了一种结构简单的双重猝灭分子信标,结合核酸染料Hoechst 33258,以艾滋病毒RNA片段的反转录序... 利用鸟嘌呤(G)碱基和有机猝灭基团Black Hole Quencher1(BHQ-1)对荧光基团6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein group,FAM)的双重猝灭作用构建了一种结构简单的双重猝灭分子信标,结合核酸染料Hoechst 33258,以艾滋病毒RNA片段的反转录序列(33个碱基)为目标DNA,建立了一种高灵敏单链核酸(ssDNA)的双色荧光定量检测方法。此分子信标中,荧光基团及有机猝灭基团分别设计为FAM和BHQ-1,分子信标的茎的碱基全部设计为C-G碱基对,环的碱基序列设计为目标DNA的互补序列,与BHQ-1相连接的为3个带有G碱基的核苷酸。没有目标DNA时,分子信标呈茎-环结构,荧光基团FAM与有机猝灭基团BHQ-1及G碱基距离很近,在BHQ-1及G碱基的双重猝灭下,FAM的荧光很弱;另外,分子信标的茎的碱基全部是C-G碱基对,不能与核酸染料Hoechst 33258相结合,因此Hoechst 33258的荧光也很弱。当有目标DNA存在时,分子信标的环与目标DNA杂交形成双链,茎-环结构被破坏,FAM远离猝灭基团BHQ-1及G碱基,其荧光得到恢复;同时,核酸染料Hoechst 33258与双链DNA中的A-T碱基对相结合,其荧光显著增强。根据荧光基团FAM及核酸染料Hoechst 33258荧光增强的程度可实现对ssDNA的定量检测。在优化的条件下,目标DNA的浓度在0.05~8.0nmol/L范围内时,FAM和Hoechst 33258的总荧光强度(ΔIT)与目标DNA的浓度(C)具有良好的线性关系,回归方程为ΔIT=192.2C+115.08(R^2=0.9938),检出限为20pmol/L(3σ,n=9)。此方法操作简单、灵敏度高、选择性好、检出限低。 展开更多
关键词 双重猝灭分子信标 单链核酸 Hoechst 33258 双色荧光 定量检测
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金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法 被引量:8
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作者 孟祥贤 羊小海 +2 位作者 王柯敏 郭秋平 黄青山 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第9期917-920,共4页
单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.... 单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.1~0.5nmol/L金纳米颗粒可显著改善PCR扩增特异性,提高扩增效率.在不对称PCR扩增中,加入合适浓度的金纳米颗粒方便快捷得到单链核酸产物,不需要进行复杂的条件优化等操作步骤.通过快速制备地中海遗传病两个点突变CD17(A→T)和IVS-2-654(C→T)位点的单链DNA靶序列,证实该方法是一种简便、有效的获得单链核酸的方法,有望在单链核酸技术领域发挥重要作用. 展开更多
关键词 金纳米颗粒 不对称PCR 单链核酸 地中海贫血病
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具不同碱基数单链核酸的光致发光特性 被引量:1
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作者 梁昌能 张杰 +3 位作者 徐文 丁岚 钱伟 李旋 《激光与光电子学进展》 CSCD 北大核心 2018年第3期448-453,共6页
采用标准光荧光方法,在不加入探针或荧光、磷光染料的情况下,测量了具有56个和29个碱基的两种核酸单链样品的光致发光特性;该方法不会对样品造成破坏或污染。结果表明:当激发波长在310~410nm之间时,能够在410~480nm波长区间观测到样品... 采用标准光荧光方法,在不加入探针或荧光、磷光染料的情况下,测量了具有56个和29个碱基的两种核酸单链样品的光致发光特性;该方法不会对样品造成破坏或污染。结果表明:当激发波长在310~410nm之间时,能够在410~480nm波长区间观测到样品明显的发光峰;两种样品的发光峰随着抽运波长的红移而红移,且发光峰的强度随激发波长的增加而先增强后减弱;具有两种不同碱基数和序列的核酸样品由于具有不同的电子能级结构而显示出了不同的光致发光特性,原理上可以用于甄别两种不同的核酸材料,有助于单链核酸样品的无损、无标记检测和鉴别。 展开更多
关键词 光谱学 光致发光 荧光 单链核酸 无损检测
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三种单链特异性核酸酶检测桉树ESTP的酶切条件优化 被引量:1
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作者 郭勇 李发根 +3 位作者 王宇 张晓红 李梅 甘四明 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第3期608-614,共7页
单链特异性(SSS)核酸酶是基因组学研究的有效工具。本研究对绿豆芽核酸酶、S1和芹菜汁提取物三种SSS核酸酶检测桉树ESTP检测的酶切条件进行了优化,优化因子依次包括Mg2+浓度、酶切温度、酶用量和/或pH值等因子。三种酶的最适酶切温度均... 单链特异性(SSS)核酸酶是基因组学研究的有效工具。本研究对绿豆芽核酸酶、S1和芹菜汁提取物三种SSS核酸酶检测桉树ESTP检测的酶切条件进行了优化,优化因子依次包括Mg2+浓度、酶切温度、酶用量和/或pH值等因子。三种酶的最适酶切温度均为60℃。绿豆芽核酸酶优化后的酶切反应体系为:10×Buffer(pH5.56)1.0μL(NaAc300mmol/L,Nacl1.0mol/L,ZnAc210mmol/L,甘油50%,MgCl2100mmol/L),PCR产物5μL,酶4.5U,超纯水补至10μL;S1的优化酶切体系为:10×Buffer(pH5.46-5.67)1.0μL(MgCl2100mmol/L,ZnAc22mmol/L,Bis-Tris200mmol/L,TritonX1000.02%,BSA0.002mg/mL),PCR产物5μL,S1酶5U,超纯水补至10μL;CJE的优化酶切体系为:10×Buffer(pH7.5)1.0μL(MgCl2100mmol/L,Hepes100mmol/L,KCl100mmol/L,TritonX1000.02%,BSA0.002mg/mL),PCR产物5.0μL,CJE酶1.0μL,超纯水3.0μL。综合考虑酶切效果和成本,推荐S1为检测桉树ESTP的经济、有效的SSS核酸酶。 展开更多
关键词 单链特异性核酸 条件优化 ESTP 桉树
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指数线性聚合酶链式反应法制备焦磷酸测序反应的单链模板 被引量:8
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作者 杨会勇 奚涛 +3 位作者 梁超 陈之遥 徐定邦 周国华 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第4期489-494,共6页
建立了一种简单的焦磷酸测序用单链模板制备方法,以包含SNP6位点一段78bp序列为对象,采用非热启动Taq酶进行指数线性PCR扩增,通过加入甘油、BSA等PCR增强剂增加反应的效率和特异性,设计反应液A和B处理PCR产物中干扰焦测序的限制性引物... 建立了一种简单的焦磷酸测序用单链模板制备方法,以包含SNP6位点一段78bp序列为对象,采用非热启动Taq酶进行指数线性PCR扩增,通过加入甘油、BSA等PCR增强剂增加反应的效率和特异性,设计反应液A和B处理PCR产物中干扰焦测序的限制性引物、未完全反应的产物、焦磷酸和dNTPs等杂质,处理后1~2μLPCR产物就可直接用于焦测序检测。测定了BRCA1基因中5个乳腺癌相关的SNP位点,获得的图谱无非特异性信号,测得序列与参考序列一致,能够进行SNP分析,表明本方法可以制备高质量焦测序单链模板,且使焦测序的成本显著降低,操作更为简便,减少了操作过程中样本间的交叉污染,有利于焦测序样品预处理的自动化。 展开更多
关键词 焦测序 指数线性扩增 单链核酸模板的制备 单核苷酸多态性
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利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258检测特定序列核酸 被引量:1
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作者 向东山 翟琨 +1 位作者 向文军 王联芝 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1210-1214,共5页
利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法,并以野生型乙型肝炎病毒的一段寡核苷酸序列为目标DNA,对这种方法进行了验证。在此体系中,分子信标的茎完全设计成C/G碱基对。在没有目... 利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法,并以野生型乙型肝炎病毒的一段寡核苷酸序列为目标DNA,对这种方法进行了验证。在此体系中,分子信标的茎完全设计成C/G碱基对。在没有目标DNA时,Hoechst 33258与分子信标作用较弱,其荧光信号很弱;当有目标DNA存在时,分子信标与目标DNA杂交形成双链,Hoechst 33258与双链DNA作用后荧光信号显著增强。在优化条件下,目标DNA浓度在2×10-10~2×10-8mol/L范围内时,Hoechst 33258的荧光强度(ΔI)与目标DNA的浓度(C)之间具有良好的线性关系,回归方程为ΔI=3.3439C+18.6949(R2=0.9982),方法检出限(3σ)为9×10-11mol/L。此方法操作简单、检测速度快、灵敏度高、重现性好、检出限低。 展开更多
关键词 无标记分子信标 Hoechst 33258 单链核酸 荧光
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金电极上巯基修饰单链DNA对[Fe(CN)_6]^(3-/4-)的电催化作用 被引量:1
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作者 郝青丽 王安子 +3 位作者 程荣恩 杨绪杰 陆路德 汪信 《南京理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期388-392,398,共6页
为研制简易非标记脱氧核糖核酸(DNA)电化学传感器,制备了固定在金电极上的DNA探针。研究了铁氰化钾在裸金电极、巯基化单、双链DNA(HS-ssDNA,HS-dsDNA)修饰金电极上的电化学行为,探讨了铁氰化钾浓度和离子强度对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学... 为研制简易非标记脱氧核糖核酸(DNA)电化学传感器,制备了固定在金电极上的DNA探针。研究了铁氰化钾在裸金电极、巯基化单、双链DNA(HS-ssDNA,HS-dsDNA)修饰金电极上的电化学行为,探讨了铁氰化钾浓度和离子强度对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为的影响。结果发现:在低离子强度下,HS-ssDNA对[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为有电催化作用,导致[Fe(CN)6]3-/4-在HS-ssDNA修饰的金电极(HS-ssDNA/Au)上的峰电流远远大于在裸电极上的峰电流;而HS-dsDNA则没有这种电催化活性;电极上的DNA杂交后阻碍了电子的传递,导致HS-dsDNA修饰金电极(HS-dsDNA/Au)上的[Fe(CN)6]3-/4-的电化学行为消失;巯基修饰的单链DNA对[Fe(CN)6]3-/4-的电催化具有特异性。 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸 金电极 巯基化单链脱氧核糖核酸 [Fe(CN)6]3-/4- 电催化 电化学
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同位素标记核酸探针技术在法医学中的应用
9
作者 叶健 《中国法医学杂志》 CSCD 1990年第4期250-252,共3页
核酸分子杂交法是当今分子生物学研究中应用最广泛的一项技术。其基本原理是利用放射性同位素标记的核酸探针,与固定在硝酸纤维素膜或尼龙膜上的单链核酸中的同源序列进行杂交。通过放射自显影,即可在X 光片上看到特定的核酸片段,利用... 核酸分子杂交法是当今分子生物学研究中应用最广泛的一项技术。其基本原理是利用放射性同位素标记的核酸探针,与固定在硝酸纤维素膜或尼龙膜上的单链核酸中的同源序列进行杂交。通过放射自显影,即可在X 光片上看到特定的核酸片段,利用该法对DNA 展开更多
关键词 核酸探针技术 核酸分子杂交法 同位素标记 核酸片段 单链核酸 DNA 硝酸纤维素膜 放射自显影 尼龙膜 标记探针
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胃癌患者血浆p53、K-ras基因突变及临床意义 被引量:3
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作者 陈积贤 张洁 +7 位作者 豆长明 黄建武 李红智 陈永康 张仁虎 张洪勤 李佩珍 林峰 《中国肿瘤》 CAS 2006年第7期478-480,共3页
[目的]研究胃癌患者血浆中基因表达检测的可行性,探讨基因p53和K-ras突变与临床病理间的关系。[方法]应用PCR-SSCP分析技术,检测62例胃癌患者血浆中K-ras癌基因的突变情况。[结果]62例胃癌患者外周血和门静脉血中的p53、K-ras突变阳性... [目的]研究胃癌患者血浆中基因表达检测的可行性,探讨基因p53和K-ras突变与临床病理间的关系。[方法]应用PCR-SSCP分析技术,检测62例胃癌患者血浆中K-ras癌基因的突变情况。[结果]62例胃癌患者外周血和门静脉血中的p53、K-ras突变阳性率分别为8.06%、4.83%和38.71%、33.87%;无、有肝转移患者p53、K-ras突变阳性率分别为24.49%、22.45%和92.30%、76.92%;门静脉血p53、K-ras突变阳性率分别为38.71%、33.87%和56.45%、62.90%。[结论]胃癌的发生发展与血浆中癌基因K-ras与抑癌基因p53的突变有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 单链核酸构像多态性 基因 p53 基因 K—ras
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引言
11
作者 屈峰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期360-360,共1页
核酸适配体特指具有分子识别功能的短序列的单链核酸,也被称为"化学抗体"。它既有可与抗体相当的亲和力和特异性,又有明显优于抗体的特点:可通过化学合成制备,无需动物免疫,成本低;分子性质稳定,能可逆变性与复性,易储存运输;分子量... 核酸适配体特指具有分子识别功能的短序列的单链核酸,也被称为"化学抗体"。它既有可与抗体相当的亲和力和特异性,又有明显优于抗体的特点:可通过化学合成制备,无需动物免疫,成本低;分子性质稳定,能可逆变性与复性,易储存运输;分子量小,易穿过细胞膜,免疫原性低,无明显的毒副作用;靶标范围广泛,包括金属离子、小分子、蛋白质、细胞和微生物等。 展开更多
关键词 单链核酸 适配体 分子识别 免疫原性 合成制备 毒副作用 动物免疫 储存运输 特异性 短序列
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铈离子及其配合物对寡聚脱氧核苷酸的水解断裂作用 被引量:1
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作者 沈鹤柏 夏静芬 +1 位作者 吴庆锋 康玉专 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期381-384,共4页
报道了铈离子及其配合物对人工设计合成的 2 6个碱基的单链寡聚脱氧核糖核酸 (ODN)的水解断裂作用。Ce3+ 需要有氧气存在的条件下 ,氧化生成Ce4 + 后才能切断ODN。研究了各种条件下Ce4 + 与ODN的切断反应 ,在酸性和弱碱性条件下都能水... 报道了铈离子及其配合物对人工设计合成的 2 6个碱基的单链寡聚脱氧核糖核酸 (ODN)的水解断裂作用。Ce3+ 需要有氧气存在的条件下 ,氧化生成Ce4 + 后才能切断ODN。研究了各种条件下Ce4 + 与ODN的切断反应 ,在酸性和弱碱性条件下都能水解切断ODN ,在近中性时切断作用最强。随着反应温度的升高 ,Ce4 + 浓度的增大 ,反应时间的延长 ,切断反应越来越明显。Ce4 + 与氮三乙酸生成配合物以后也能切断ODN。Ce4 + 可作为切断ODN的分子剪刀。 展开更多
关键词 稀土 单链寡聚脱氧核糖核酸 水解切断反应 电泳 DNA
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脱氧核糖核酸单链序列的预测 被引量:4
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作者 江绍钏 章林溪 +1 位作者 夏阿根 陈宏平 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第6期4337-4342,共6页
利用Langevin动力学方法模拟了脱氧核糖核酸(DNA)单链在电场力作用下穿越纳米孔道的动力学过程.研究表明,不同种类的单体对应着不同的居留时间,相邻单体的居留时间随着孔道长度的增大而减小.在简化模型的基础上,可以从居留时间图中一次... 利用Langevin动力学方法模拟了脱氧核糖核酸(DNA)单链在电场力作用下穿越纳米孔道的动力学过程.研究表明,不同种类的单体对应着不同的居留时间,相邻单体的居留时间随着孔道长度的增大而减小.在简化模型的基础上,可以从居留时间图中一次性地推测出一条DNA链的嘌呤和嘧啶的分布.应用该方法对17条不同序列的DNA链进行了预测,平均准确率为95.1%.在此方法的基础上做一些改进,可以为DNA链的测序提供一种高效的低成本方法. 展开更多
关键词 Langevin动力学 脱氧核糖核酸单链 序列预测
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AD患者lncRNA BACE-AS BDNF及miR-193b水平与认知功能的关系
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作者 陈卫 杨传松 刘英 《中国实用神经疾病杂志》 2023年第9期1108-1112,共5页
目的分析联合检测血浆和脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平在阿尔茨海默病中的诊断价值及与认知功能的相关性。方法选取50例AD患者及100例健康体检的健康者为对象,检测受试者血浆lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平并分析各指... 目的分析联合检测血浆和脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平在阿尔茨海默病中的诊断价值及与认知功能的相关性。方法选取50例AD患者及100例健康体检的健康者为对象,检测受试者血浆lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平并分析各指标的诊断价值;检测AD患者脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平,并分析脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平与认知功能的相关性。结果AD组患者血浆lncRNA BACE-AS及BDNF水平显著高于对照组(P<0.05),且AD组患者血浆miR-193b水平显著低于对照组(P<0.05)。lncRNA BACE-AS、BDNF及miR-193b三指标联合检测诊断AD的敏感度、特异度及AUC均明显高于各单个指标,差异有统计学意义(P<0.05)。随着AD患者认知功能障碍加重,脑脊液lncRNA BACE-AS及BDNF水平显著升高(P<0.05),miR-193b水平显著降低(P<0.05),lncRNA BACE-AS、BDNF与AD患者认知功能障碍呈显著正相关(P<0.05),miR-193b与认知功能障碍呈显著负相关(P<0.05)。血浆和脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平均呈正相关(P<0.05)。结论联合检测血浆lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平可显著提高AD的诊断效果,且脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF水平与AD认知功能呈正相关,miR-193b水平与AD认知功能呈负相关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 长链非编码核糖核酸淀粉蛋白前β-分解酶 脑源性神经营养因子 非编单链码核糖核酸193b 认知功能 血浆 脑脊液
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Antisoma公司的研发产品
15
作者 景新 《国外药讯》 2005年第6期48-49,共2页
英国Antisoma生物技术公司已摆脱去年R1549(pemtumomab)Ⅲ期开发阶段失利的阴影,集中在收购一新药物种类。
关键词 Antisoma公司 研发产品 新药 单链核酸 适体 Vitravene 福米韦生
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中肾因子Midkine对卵巢癌中非编码RNA表达的影响 被引量:1
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作者 江玫娜 袁婷 +2 位作者 张静云 谢静燕 赵树立 《临床检验杂志》 CAS 2019年第12期897-900,共4页
目的探讨肿瘤相关抗原中肾因子(midkine,MK)调控的长链非编码RNA(lncRNAs)和微小RNA(miRNAs)对卵巢癌的临床应用价值。方法采用基因芯片(miRNAs芯片和lncRNAs芯片)分析MK过表达的SKOV3-MK细胞及其SKOV3-Con对照细胞中差异的miRNAs和lncR... 目的探讨肿瘤相关抗原中肾因子(midkine,MK)调控的长链非编码RNA(lncRNAs)和微小RNA(miRNAs)对卵巢癌的临床应用价值。方法采用基因芯片(miRNAs芯片和lncRNAs芯片)分析MK过表达的SKOV3-MK细胞及其SKOV3-Con对照细胞中差异的miRNAs和lncRNAs,筛选卵巢癌潜在的生物学标志物,并在卵巢癌患者血清和卵巢癌组织中用RT-qPCR进一步验证,结合临床数据,分析其临床应用价值。结果与对照SKOV3-Con细胞相比,MK过表达可以显著促进SKOV3细胞中11个miRNAs和7个lncRNAs的表达(比值>3倍,P<0.01),下调8个miRNAs和13个lncRNAs的表达(比值<0.3,P<0.01)。RT-qPCR验证结果表明,相对于对侧良性卵巢组织,卵巢癌组织中miR489的表达水平显著降低,而HOTAIR则显著升高(P<0.05);卵巢癌患者血清中HOTAIR的表达水平显著高于同年龄段健康人对照组(0.036±0.024 vs 0.019±0.020,P=0.002)。此外,当cut-off值为0.0176时,HOTAIR作为卵巢癌血清筛查指标的AUC ROC为0.749,特异性为66.7%,敏感性为75.6%。结论长链非编码RNA HOTAIR可以作为卵巢癌血清的筛查标志物之一。 展开更多
关键词 中肾因子 卵巢癌 长链非编码核糖核酸 单链小分子核糖核酸 基因芯片
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大分子拥挤下核酸单链的结构性质
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作者 刘凯吉 王凤华 谭志杰 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期95-101,共7页
通过粗粒化模型构建核酸单链,采用Monte Carlo方法系统地研究了拥挤大分子体积比和尺寸对中性核酸单链结构性质的影响,得到了核酸单链端-端距离Ree与大分子体积比Φc和半径Rc的关系曲线.实验结果表明,大分子拥挤可导致核酸单链形成更加... 通过粗粒化模型构建核酸单链,采用Monte Carlo方法系统地研究了拥挤大分子体积比和尺寸对中性核酸单链结构性质的影响,得到了核酸单链端-端距离Ree与大分子体积比Φc和半径Rc的关系曲线.实验结果表明,大分子拥挤可导致核酸单链形成更加紧凑的结构,拥挤分子的体积分数越大、尺寸越小,核酸单链的结构越紧凑,而且大分子拥挤对较长的核酸单链影响更大,并进一步通过分析拥挤大分子的分布,揭示了大分子拥挤效应产生的机制. 展开更多
关键词 核酸单链 MONTE CARLO模拟 拥挤大分子 结构塌缩 偶分布函数
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Probiotic Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris and Streptococcus thermophilus induce IL-12 and IFN-γ production 被引量:9
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作者 Riina A Kekkonen Elina Kajasto +3 位作者 Minja Miettinen Ville Veckman Riitta Korpela Ilkka Julkunen 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第8期1192-1203,共12页
AIM: To investigate the capacity of potentially probiotic strains from six bacterial genera to induce cytokine production alone or in combinations in order to identify potential enhancing or synergistic effects in or... AIM: To investigate the capacity of potentially probiotic strains from six bacterial genera to induce cytokine production alone or in combinations in order to identify potential enhancing or synergistic effects in order to select probiotic bacteria for in vivo purposes.METHODS: Cytokine production in human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in response to stimulation with eleven different potentially probiotic bacterial strains from Streptococcus, Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactococcus, L euconostoc a n d Propionibacterium genera was analysed. Production and mRNA expression of TNF-α, IL-12, IFN-y and IL-10 were determined by ELISA and Northern blotting, respectively.RESULTS: All tested bacteria induced TNF-α production. The best inducers of Thl type cytokines IL-12 and IFN-y were Streptococcus and Leuconostoc strains. All BiHdobacterium and Propionibacterium strains induced higher IL-IO production than other studied bacteria. Stimulation of PBMC with any bacterial combinations did not result in enhanced cytokine production suggesting that different bacteria whether gram-positive or gram- negative compete with each other during host cell interactions.CONCLUSION: The probiotic S. thermophilus and Leuconostoc strains are more potent inducers of Thl type cytokines IL-12 and IFN-γ than the probiotic Lactobacillus strains. Bacterial combinations did not result in enhanced cytokine production. 展开更多
关键词 Probiotics STREPTOCOCCUS LACTOBACILLUS BIFIDOBACTERIUM LACTOCOCCUS LEUCONOSTOC PROPIONIBACTERIUM Immune response Cytokines Mononuclear cells
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IL28B polymorphisms associated with therapy response in Chilean chronic hepatitis C patients 被引量:13
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作者 Mauricio Venegas Rodrigo A Villanueva +1 位作者 Katherine González Javier Brahm 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第31期3636-3639,共4页
AIM:To analyze the association of three IL28B single nucleotide polymorphisms with response to therapy in Chilean patients infected with hepatitis C virus CV.METHODS:We studied two groups of patients with chronic CV i... AIM:To analyze the association of three IL28B single nucleotide polymorphisms with response to therapy in Chilean patients infected with hepatitis C virus CV.METHODS:We studied two groups of patients with chronic CV infection genotype 1,under standard combined treatment with pegylated interferon plus ribavirin.One group consisted of 50 patients with sustained virological response,whereas the second group consisted of 49 null responders.In order to analyze the IL28B single nucleotide polymorphisms rs12979860,rs12980275 and rs8099917,samples were used for polymerase chain reaction amplification,and the genotyping was performed by restriction fragment lengthpolymorphism.RESULTS:The IL28B rs12979860 CC,rs12980275 AA and rs8099917 TT genotypes were much more frequently found in patients with sustained virological response compared to null responders 38%,44% and 50% vs 2%,8.2% and 8.2%,respectively.These differences were highly significant in all three cases(P < 0.0001.CONCLUSION:The three IL28B polymorphisms studied are strongly associated with sustained virological response to therapy in Chilean patients with chronic CV genotype 1. 展开更多
关键词 IL28B Hepatitis C virus Chile Pegylated interferon RIBAVIRIN
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Mutations in Exons of the CYP17-Ⅱ Gene Affect Sex Steroid Concentration in Male Japanese Flounder(Paralichthys olivaceus)
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作者 MA Ruiqin HE Feng +12 位作者 WEN Haishen LI Jifang SHI Bao SHI Dan LIU Miao MU Weijie ZHANG Yuanqing HU Jian HAN Weiguo ZHANG Jianan WANG Qingqing YUAN Yuren LIU Qun 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2012年第1期99-104,共6页
As a specific gene of fish,cytochrome P450c17-Ⅱ(CYP17-Ⅱ) gene plays a key role in the growth,development and reproduction level of fish.In this study,the single-stranded conformational polymorphism(SSCP) technique w... As a specific gene of fish,cytochrome P450c17-Ⅱ(CYP17-Ⅱ) gene plays a key role in the growth,development and reproduction level of fish.In this study,the single-stranded conformational polymorphism(SSCP) technique was used to characterize polymorphisms within the coding region of CYP17-Ⅱ gene in a population of 75 male Japanese flounder(Paralichthys olivaceus).Three single nucleotide polymorphisms(SNPs) were identified in CYP17-Ⅱ gene of Japanese flounder.They were c.G594A(p.G188R),c.G939A and c.G1502A(p.G490D).SNP1(c.G594A),located in exon 4 of CYP17-Ⅱ gene,was significantly associated with gonadosomatic index(GSI).Individuals with genotype GG of SNP1 had significantly lower GSI(P < 0.05) than those with geno-type AA or AG.SNP2(c.G939A) located at the CpG island of CYP17-Ⅱ gene.The mutation changed the methylation of exon 6.Indi-viduals with genotype AA of SNP2 had significantly lower serum testosterone(T) level and hepatosomatic index(HSI) compared to those with genotype GG.The results suggested that SNP2 could influence the reproductive endocrine of male Japanese flounder.How-ever,the SNP3(c.G1502A) located in exon 9 did not affect the four measured reproductive traits.This study showed that CYP17-Ⅱ gene could be a potentially useful candidate gene for the research of genetic breeding and physiological aspects of Japanese flounder. 展开更多
关键词 CYP17-Ⅱ gene SNPs sex steroid Japanese flounder
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