京津冀血站实验室核酸混样模式单阳性率分析

目的对京津冀各血站实验室核酸混样模式的单阳性率进行分析,对比各实验室混检单阳性率的差异,探讨各实验室在实验过程的差别和影响因素,为推进京津冀血站的同质化建设提供依据。方法根据15家血液中心/中心血站2018京津冀血液筛查实验室质量指标数据汇总分析,按不同检测系统、相同试剂不同实验室、进口试剂和国产试剂、不同国产检测系统和不同混样模式划分,对使用混样模式进行核酸检测14家实验室的HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA检出阳性率,运用统计学方法进行分析。结果京津冀14家实验室采用混样模式中,核酸检测实验室以试剂R1、R2和R3为主;试剂6种使用模式3个项目(依次HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA)检出率(/万)分别为6.201 vs 3.399 vs 4.909 vs 4.212 vs 3.592 vs 4.585、0.161 vs 0.078 vs 0.158 vs 0 vs 0.218 vs 0.955、0.032 vs 0.158 vs 0.158 vs 0.301 vs 0 vs 1.146,差别均具有统计学意义(P<0.05);3种(R1、R2、R4)国产试剂检测系统HBV DNA的检出率(/万)分别为6.201 vs 3.399 vs 4.212,差别具有统计学意义(P<0.05);使用2种试剂组合的2家实验室间,3个项目检出率(/万)分别为3.592 vs 4.585、0.218 vs 0.955、0 vs 1.146,差别均具有统计学意义(P<0.05);使用R1试剂的3家实验室间HBV DNA检出率(/万)分别为7.197 vs 7.590 vs 7.776,差别不具有统计学意义(P>0.05),而HCV RNA和HIV RNA检出率(/万)分别为0 vs 0.281 vs 0.933、0 vs 0.141 vs 0,差别具有统计学意义(P<0.05);使用R2试剂的5家实验室间3个项目的检出率(/万)分别为3.812 vs 3.849 vs 3.745 vs 1.557 vs 1.542、0 vs 0.367 vs 0 vs 0 vs 0、0 vs 0.183 vs 0.250 vs 0.311 vs 0,差别均具有统计学意义(P<0.05);使用R3试剂的实验室间3个项目的检出率,差别均不具有统计学意义(P>0.05);进口试剂R3混样模式为6混,国产试剂均为8混,两者的HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA检出率,差别均不具有统计学意义(P>0.05)。结论京津冀14家血站核酸检测实验室以国产试剂混样模式为主,血站核酸混样检测实验室的HBV DNA检出率明显高于HCV RNA和HIV RNA,且不同试剂间、相同试剂不同实验室存在不同程度差异。京津冀各血站需持续评估各自实验室单阳性率的差别,通过单阳性率比对分析,进一步提升血站实验室检测能力,促进血液检测同质化建设。

抗CD3mAb诱导TN细胞向过渡型CD8单阳性细胞分化

本实验观察了在IL-7维持TN细胞生长的体外细胞培养系统中,抗CD 3 mAb对TN细胞分化的作用。发现抗CD 3 mAb在体外能诱导TN细胞分化产生CD 4^-CD 8^+及部分CD 4^(lo)CD 8^+细胞。由于多数CD 8^+细胞为TCRβ^-,故抗CD 3 mAb诱导产生的CD 4^-CD 8^+细胞是DN向DP分化的不成熟过渡状态细胞。抗TCR βmAb也能诱导CD 4^-CD 8^+细胞产生,但其诱导分化能力弱于抗CD3 mAb。在体外细胞培养条件下,抗CD 3mAb诱导的DN→DP转化伴有IL-2 Rα表达下调,并且IL-7诱导的TCRβ分子表达也受到抑制。当TN细胞在IL-7条件下培养3天后,抗CD 3 mAb便失去诱导TN细胞分化的能力,表明抗CD 3 mAb诱导的TN细胞分化可能是通过细胞表面pre-TCR复合体进行的。

22例HIV抗体初筛单阳性样本的补充试验结果分析

比较金标法与酶联免疫吸附法( ELISA) 在人类免疫缺陷病毒( HIV) 抗体筛查中的应用价值。方法 对2020年1月至2021年12月期间就诊本院的共105359例受检人员同时使用酶联免疫吸附法(ELISA)及金标法进行HIV抗体初筛检测,两种方法出现单阳性则纳入本研究。单阳性样本利用WB确证试验和核酸定量试验来确定患者是否感染HIV。结果 单阳性样本共有22例,其中金标法单阳性15例,ELISA单阳性7例。金标法单阳性样本确证试验结果为不确定的有40%(6/15),结果为阴性的有60%(9/15),结果是阳性的为0%(0/15)。ELISA单阳性样本确证试验结果为不确定的有57.1%(4/7),结果为阴性的有42.9%(3/7),结果是阳性的为0%(0/7)。金标法单阳性样本HIV核酸检出率为0%(0/15),而ELISA单阳性样本HIV核酸检出率为28.6%(2/7)。结论 HIV抗体初筛单阳性样本存在较高的假阳性率,金标法的假阳性率高于ELISA。相比于WB确证试验,单阳性样本通过核酸定量试验来反应患者是否感染HIV可能是更好的策略。

4项血筛试剂单阳性献血者跟踪检测与处置策略

目的通过对4项血筛试剂单阳性献血者的跟踪检测,为献血者提供一个准确的结果,探讨单试剂阳性献血者继续献血的可行性,保证无偿献血队伍的稳定。方法对单试剂阳性献血者采取3个月、6个月各跟踪检测1次,对单试剂阳性项目进行重新采样检测。结果单试剂阳性样本中,永久屏蔽占49.2%,不建议献血占35.3%,有15.5%的献血者为假阳性,解除献血屏蔽信息。结论单试剂阳性样本的跟踪检测结果中不适宜献血情况居多。

实时荧光PCR法检测新型冠状病毒核酸单靶标阳性结果分析

目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测中出现的单靶标阳性结果,为临床实验室检测和结果判断提供参考。方法收集分析2021年5月至2023年4月在该院进行的新冠病毒核酸检测结果,对检出的单靶标阳性结果及双试剂复测情况进行统计分析,并进一步追踪出现单靶标阳性结果的样本后续新型冠状病毒核酸检测情况。结果使用核酸提取仪加PCR仪及全自动工作站两种检测系统出现单靶标阳性的比率差异无统计学意义,单采标本中单靶标阳性出现频率显著多于混采标本中单靶标阳性出现频率,单靶标阳性中N基因阳性显著多于ORF1ab基因阳性。ORF1ab基因单靶阳性组Ct值与N基因单靶阳性组Ct值差异无统计学意义,两组在双试剂复检结果表现上差异无统计学意义。初检单靶Ct值按照复检最终结果判定分为阴性和阳性组,两组间Ct值差异无统计学意义。追踪69例经双试剂复查后仍为单靶阳性的样本后续新型冠状病毒核酸检测情况,单采单靶阳性人员下一次新型冠状病毒核酸检测结果为双靶阳性的有41例,其中37例Ct值为35以下;下一次核酸检测结果为阴性的有16例,其中11例为之前一个月内感染过新型冠状病毒的患者。12例混采单靶阳性标本均为一人阳性混管,单采Ct值中位数ORF1ab基因为33.229,N基因为33.732。结论对新冠核酸检测中遇到的单靶标阳性结果需要谨慎对待,复测后方可报告。实验室应加强对不同试剂,不同检测系统的评估,准备1~2种备用试剂作为可疑结果的补充验证试剂以利于对新型冠状病毒核酸检测结果的合理分析,提高对异常检测结果的判断能力。

血站核酸实验室混样检测系统HBV DNA单阳性率分析

目的研究分析无偿献血者核酸检测(nucleic acid test,NAT)混样检测系统HBV DNA单阳性率在监控指标中的实际应用,为采供血机构保障血液安全的管理提供依据。方法回顾性分析邯郸市中心血站2018年1~12月无偿献血者血液标本核酸(定性)检测数据。结果2018年核酸检测标本为97975份,70份呈HBV DNA反应性。6月出现1个异常“高点”,混检阳性率为2.06%,单阳性率为9.81/万,均高于其他月份;不同试剂批号单阳性率:B批号试剂为8.17/万,与其他三批A、C、D单阳性率差异有统计学意义(B和A比较:χ^2=6.64,P<0.05;B和C比较:χ^2=4.77,P<0.05;B和D比较:χ^2=5.39,P<0.05);试剂检测室内质控情况,变异系数较小且均值比较差异无统计学意义;阳性标本再次确认单检时,在不同CT值分布上,CT值越大,与拆分检测的符合率越低。结论NAT实验室按月统计HBV DNA单阳性率出现异常时,应适时增加按批号阳性率统计情况和再检符合情况,同时关注室内质控变化情况,客观真实地进行分析评估,指导实验室的管理导向,提升实验室的日常管理水平。

前列腺穿刺活检单针阳性患者前列腺内癌灶分布特点

目的:通过对前列腺穿刺活检单针阳性并接受根治性手术治疗的前列腺癌患者的手术标本病理结果进行回顾分析,了解前列腺内癌灶的分布情况。方法:对我院37例经直肠前列腺穿刺活检,单针阳性确诊为前列腺癌并接受前列腺癌根治术的患者手术前后资料进行比较,评价活检与术后病理结果的非一致性,分析肿瘤总体被低估的可能危险因素。结果:多数患者(26/37)术后病理证实肿瘤呈多灶性分布;术后Gleason评分7～9分患者(21/37)所占比例明显升高;术前临床分期明显被低估;单针中癌组织比例大是术前临床分期被低估的可能危险因素;PSAD>0.2μg/L是肿瘤总体被低估的可能危险因素;前列腺体积较大(体积≥40 ml)时肿瘤多灶性分布的可能性增大。结论:前列腺穿刺活检单针阳性患者的肿瘤可能被低估;其前列腺癌灶的分布具有多灶性特点。

郑州市23例SARS-CoV-2核酸单靶标阳性标本的跟踪检测分析

目的对郑州市23例严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸单靶标阳性标本进行跟踪检测分析,为实验室检测提供参考。方法按照《新型冠状病毒肺炎防控方案》采集新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似患者的鼻拭子或咽拭子,提取SARS-CoV-2核酸并采用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测。对6例开放读码框1ab(ORF1ab)基因单靶标阳性和17例核壳蛋白(N)基因单靶标阳性患者进行重新采样检测。结果首检23例SARS-CoV-2核酸单靶标阳性的标本中有8例疑似病例在随后的重新采样检测中被确认为SARS-CoV-2核酸阳性,重新采样检测阳性率为34.78%。结论 COVID-19同种类型标本2次采样检测中均出现单靶标阳性的检测结果时,应该慎重对待,建议重新采样跟踪检测。

小鼠胚胎期注射抗CD4单克隆抗体对胸腺和脾脏CD4单阳性细胞的影响

胚胎期注射抗CD4 MAb后,通过FACS(流式细胞分选仪)分析出生后小鼠胸腺和脾脏中CD4单阳性细胞的变化,结果表明脾脏中CD4单阳性细胞比例非常显著地减少,而胸腺中CD4单阳性细胞比例几乎不受影响。

乙型肝炎、丙型肝炎单试剂检测阳性献血者的分析

目的探讨血站酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)灰区设置的必要性及单试剂阳性献血者淘汰与归队的相关问题。方法将2015年1月至2018年1月广元地区采集的无偿献血者标本进行ELISA双试剂检测,对ELISA检测HBV、HCV单试剂反应性及灰区标本再次进行核酸检测。结果 85 558例标本中共检出HBV阳性703例,HCV阳性362例,其中HBV单试剂阳性401例,占比57.04%,HCV单试剂阳性247例,占比68.23%,HBsAg灰区171例,抗-HCV灰区115例。对ELISA单试剂阳性及灰区标本进行核酸检测后,共检出HBV DNA反应性标本6例,未检出HCV DNA反应性标本。结论 ELISA检测HBV、HCV单试剂阳性,其假阳性率较高,采供血机构可结合自身实际情况,建立合理的献血者淘汰及归队机制。

对血液筛查单试剂阳性献血者保留献血资格的探讨

目的对血液ELISA筛查阳性献血者标本进行确认试验,探讨保留其献血资格的意义及合适方案,最大限度减少血源的流失,缓解供血压力。方法将娄底市2013年1月1日至2013年4月27日的血液ELISA筛查阳性无偿献血者分成单试剂阳性(S/CO≥1.0)、双试剂阳性(S/CO均≥1.0)二组,对其确认试验结果进行分析比较。结果单试剂阳性(S/CO≥1.0)的假阳性率为79.03%,双试剂阳性(S/CO均≥1.0)的假阳性率为38.95%,单试剂假阳性率显著高于双试剂假阳性率,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论保留单试剂阳性献血者的献血资格半年后召回复查,复查合格即可献血是一个切实可行的方案,可大大减少血源的不必要流失。

单试剂阳性的献血者追踪分析研究

目的对抗-HIV、HBsAg、抗-HCV和梅毒螺旋体抗体的ELISA单试剂阳性反应的献血者进行追踪研究,确定屏蔽献血者的解除屏蔽时间,避免误淘汰合格献血者,建立和加强固定献血者队伍。方法对检测结果异常的246名无偿献血者,包括血站血液常规检测项目:抗-HIV、HBsAg、抗-HCV、抗-TP等四项输血传染病标志物任何1项或1项以上单试剂检测阳性反应者,6个月后再抽取其血液标本,用两种不同试剂追踪检测研究,对检测结果统计分析。结果追踪研究各个检测传染病标志物项目的合格率分别为:HBsAg为35.5%、抗-HCV为39.4%、抗-HIV为33.3%、抗-TP为24.6%,总合格率为32.9%。经χ2检验,各项目追踪研究的合格率差异有显著统计学意义(P<0.05)。在追踪研究前、后单试剂阳性反应标本中,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV三者的进口试剂所占比率比国产试剂明显升高(P<0.05),显示进口试剂灵敏度较高。抗-TP两次检测均使用国产试剂,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过对单试剂检测不合格献血者四种输血传染病标志物的追踪检测和研究,排除检测方法学的误差,尽量消除因为试验假阳性等原因引起的献血者误淘汰,对无偿献血的宣传、招募和建立、保留固定献血者队伍具有重要意义。

湛江地区献血人群HIV的基因分型及ELISA单试剂阳性者追踪检测的研究

目的了解湛江市无偿献血人群中人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)基因分型,推测湛江市HIV病毒来源,为湛江市防控艾滋病和临床用血安全提供依据。方法从23例经湛江市CDC WB法确认的HIV无偿献血者血液中提取RNA,用RT-PCR进行gag基因扩增,并对扩增产物进行测序和序列分析。对68例ELISA单试剂阳性者献血后每2周采血1次再次检测,检测呈双试剂阳性者通过WB法确认。结果 23例阳性感染者均为HIV-1,其中12例(52.2%)为CRF01_AE重组亚型;10例(43.5%)为CRF07_BC重组亚型;1例(4.3%)为01B型。68例ELISA单试剂检测阳性者中有1例8周后确认为HIV-1 CRF01_AE重组亚型,1例10周后确认为HIV-1 CRF07_BC重组亚型,35例连续追踪6个月后依然为单试剂检测阳性,31例由于多方面的原因无法追踪,最后放弃。结论湛江地区献血人群中HIV-1亚型以CRF01_AE和CRF07_BC为主。35例单试剂阳性者可能与感染了弱病毒株或其体内病毒受体或其他病毒感染相关的基因存在变异有关,需要进一步追踪研究。

血液筛查单试剂阳性献血者可追溯性探讨

目的对血液ELISA筛查单试剂阳性献血者进行重复确认试验,探讨保留其献血资格的意义及合适方案。方法将綦江区2012年1月1日-2016年05月31日血液ELISA筛查单试剂阳性的献血者共计162例,电话回告其半年后到各献血点进行留样复查(第一次复查再次出现单试剂阳性的献血者,隔半年后再次通知留样复查),双试剂检测合格后可再次参加献血。结果单试剂阳性献血者162例经两次留样复查,合格118例,总体合格献血率为69.4%。结论保留单试剂ELISA阳性献血者的献血资格半年后召回复查,复查合格即可献血是一个切实可行的方案,可有效减少献血者的不必要流失。

12针前列腺穿刺活检中单针阳性的临床病理意义

目的探讨12针前列腺穿刺活检在前列腺癌临床诊断中的应用价值,结合单针阳性结果,分析其临床病理意义。方法选取2018年4月至2020年3月于龙岩市第二医院接受12针前列腺穿刺活检、腹腔镜下前列腺癌根治术的52例前列腺癌患者作为研究对象,对比分析术前穿刺活检和术后病理检查结果,判断肿瘤临床分期和病理分级结果的一致性。结果12针前列腺穿刺活检后,穿刺病理Gleason评分为(6.29±0.48)分,术前临床分期T_(1c)、T_(2a)、T_(2c)分别为23例、21例和7例,而术后病理Gleason评分为(6.63±0.44)分,术后病理分期T_(2a)、T_(2b)、T_(2c)、T_(3)分别为14例、2例、33例以及3例,外周神经侵犯阳性、切缘阳性分别为23例和17例。与术后病理检查结果相比,术前穿刺活检的Gleason评分存在低估18例,一致30例,高估4例。通过多因素logistic回归分析,肿瘤穿刺百分比是导致术前低估Gleason评分的主要危险因素,同时也是导致外周神经侵犯阳性的影响因素。结论在12针前列腺穿刺活检中,单针阳性可作为判断前列腺癌发生的依据,但往往会低估肿瘤负荷,无法准确判断癌灶分布及病理分级,还应针对单针阳性患者的临床和病理特征进行深入探讨,对于病情做出准确的判断。

江苏省血液检测阳性献血者保留和归队经验探讨

目的探讨献血者召回策略的合理性。方法2014年10月-2019年3月对2706名ELISA单试剂阳性、而NAT阴性献血者标本的阳性项目进行确认,确认结果为阴性者,保留献血资格;3109名被屏蔽至少6个月的献血者提出归队申请,归队检测合格者回归献血者队伍。比较参与保留和申请归队2种途径的检测合格率、再次献血比例、再次献血不合格率、再次献血的时间间隔。结果2390名(88.32%)献血者被成功保留献血资格,其中203人(8.49%)再次献血,再次献血不合格率12.32%,再次献血不合格者距离上一次不合格献血的时间间隔平均335 d,再次献血合格者的时间间隔为408 d。2066名(66.45%)献血者成功归队,其中882人(42.69%)再次献血,再次献血不合格率4.99%,不合格者距离归队申请平均157 d,合格者平均92 d。结论献血者归队的流程、检测方法比献血者保留更科学,再次献血比例高,献血不合格率低,建议取消献血者保留途径,并永久屏蔽体内反复出现干扰物的献血者。

穿刺活检单针阳性前列腺癌术后病理升级的危险因素分析及列线图模型构建

目的:对穿刺活检单针阳性前列腺癌术后病理升级的危险因素进行分析,并尝试构建预测穿刺单针阳性前列腺癌患者术后病理升级的数学模型。方法:回顾分析2015年1月至2020年8月期间于北京大学第一医院诊断为前列腺癌且接受根治性前列腺切除术的患者1 349例,选取其中穿刺活检单针阳性患者的临床资料,将其分为术后病理较穿刺病理升级组及未升级组,比较两组的年龄、体重指数、临床分期、前列腺影像报告和数据系统(prostate imaging reporting and data system, PI-RADS)评分、磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)报告的前列腺体积、前列腺穿刺活检的Gleason评分、穿刺前及术前血清前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA)、手术方式、术后病理分期的差异,将单因素分析中P<0.1的术前变量纳入多因素Logistic回归并绘制列线图,通过受试者工作特征曲线对模型进行评价。结果:共有71例患者符合纳入排除标准,其中术后病理升级组34例,未升级组37例,两组患者的年龄(P=0.585)、体重指数(P=0.165)、手术方式(P=0.08)、MRI前列腺体积(P=0.067)、临床分期(P=0.678)、PI-RADS评分(P=0.203)、穿刺前PSA(P=0.359)、术前PSA(P=0.739)、PSA密度差(P=0.063)、穿刺Gleason评分(P=0.068)差异均无统计学意义,两组患者穿刺阳性针中肿瘤组织占比(P=0.007)、术后病理分期(P<0.001)及术后Gleason评分(P<0.001)差异有统计学意义。将单因素分析中P<0.1的术前变量,即MRI前列腺体积、PSA密度差、穿刺阳性针中的肿瘤组织占比、穿刺Gleason评分纳入多因素Logistic回归分析,只有MRI前列腺体积组间差异有统计学意义。进一步根据多因素Logistic回归结果绘制列线图,受试者工作特征曲线的曲线下面积为0.773。结论:对于穿刺病理单针阳性的前列腺癌患者,若前列腺体积较小或穿刺阳性针中肿瘤组织占比较少,需警惕术后病理较穿刺病理升级的可能;对于可能出现病理升级的患者,需谨慎考虑术前的危险分层。本模型可初步用于预测穿刺活检单针阳性前列腺癌患者术后病理升级的可能性。

乙型肝炎表面抗原检测技术演变及对隐匿性乙型肝炎病毒感染实验室检测的思考

乙型病毒性肝炎（简称“乙肝”）的临床类型包括急性和慢性乙型肝炎，并与肝硬化、肝癌和肝衰竭等并发症的发生密切相关，严重危害人类健康[1]。我国曾为乙肝的高流行区。为控制乙肝，我国自1992年开始实施新生儿乙肝疫苗免疫策略，并于2009～2011年开展对15岁以下人群乙肝疫苗的查漏补种工作。根据中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会统计，1992～2009年，我国共有9200万人通过接种乙肝疫苗免受了乙型肝炎病毒（HBV）的感染，其中预防慢性HBV感染2400万人，减少肝硬化和肝癌等引起的死亡430万人。然而，最新统计数字显示，我国乙型肝炎表面抗原（HBsAg）携带者仍约有9300万人，且每年新发HBV感染者达10万之多。全球每年乙肝相关死亡的病例中，近半数来自于中国。因此，在未来相当长时间内，乙肝及其相关疾病仍是我国面临的主要健康问题之一。

乙型肝炎病毒血清标志物单独核心抗体阳性者中乙型肝炎病毒隐匿性感染的分子特性

目的探讨乙肝血清标志物单独抗核心抗体(HBcAb)阳性者中乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)隐匿性感染(occult HBV infection,OBI)流行状况和病毒分子特性。方法应用ELISA方法对本院乙肝标志物检测单独HBcAb阳性者进行复检,采用荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法对复检单独HBcAb阳性者的HBV-DNA进行荧光定量,对病毒核酸检测阳性者扩增Pre S/S基因区并进行直接测序分析。结果在总共复检的343列单独HBcAb阳性者中,有338例样本复测HBcAb单独阳性。定量PCR检测发现OBI者6例(1.8%),其中成功测序4例。序列结果分析发现2例B2基因型,2例C1基因型。4例样本均在Pre S/S基因区发生了变异,S基因区变异多在B细胞表位和T细胞表位区,其中有3例样本存在a决定簇变异。结论单独HBcAb阳性者确实存在OBI,HBV基因组S区a决定簇内存在变异,可能与OBI的发生相关。临床上要注意单独HBcAb阳性者HBV隐匿性感染的漏诊。

KIR2DL1基因多态性及其抗原表达关系的研究

目的本研究拟建立KIR2DL1基因分型和抗原分型技术,了解中国汉族人群KIR2DL1基因分布和抗原表达情况。方法收集166份新鲜外周血标本,分离单个核细胞,利用NK细胞特异性的CD56,和KIR2DL1特异性的CD158a抗体流式检测KIR2DL1抗原表达情况。提取标本的基因组,利用PCR-SSP技术检测KIR2DL1基因的有无,对于KIR2DL1基因阳性标本设计3对引物扩增1～9号外显子,并进行全长测序分析。结果1)166份标本中,164份标本KIR2DL1阳性,其中62份标本KIR2DL1和KIR2DS1双阳性,仅2份标本KIR2DS1单阳性。