双氢青蒿素治疗狼疮肾炎与SIGIRR诱导免疫负调控的相关性

目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C57BL/6小鼠为正常对照组,共给药12周。HE染色观察肾脏病理学改变,Western blot法检测肾脏SIGIRR,IRAK1和TRAF6蛋白表达变化。在体外,以10μg/ml LPS刺激人肾小管上皮细胞HK-2细胞,分别加入0.67、2.00、6.00μg/ml DHA,以Western Blotting法检测药物分别作用6、12和24 h后SIGIRR蛋白表达情况,ELISA方法检测上清IL-6、CCL2的分泌水平。结果:体内实验中,肾脏病理结果显示模型组小鼠肾脏受损,DHA 100 mg/kg治疗组肾脏损伤有所减轻。DHA 100 mg/kg组相比模型组,SIGIRR蛋白表达有一定的升高,且随DHA剂量增加该蛋白表达有升高趋势。体外实验中,不同浓度DHA能抑制CCL2的分泌,0.67μg/ml DHA作用24 h能显著增加SIGIRR的表达,且SIGIRR表达量随着时间延长有逐渐升高趋势。结论:DHA对狼疮肾炎有一定的治疗作用,且与肾脏SIGIRR表达升高抑制TLR4/NF-κB信号通路的过度活化有关;DHA对LPS诱导的HK-2炎症损伤的抑制与抑制CCL2分泌及增加SIGIRR表达有关。

Toll样受体4及其负调控因子在大鼠不同发育阶段肠组织表达的比较

目的:通过比较Toll样受体4(TLR4)及其负调控因子单Ig区IL-1相关受体(SIGIRR)和Toll作用蛋白(Tollip)在SD大鼠不同发育阶段肠段组织的表达,进一步了解新生儿坏死性小肠结肠炎的发病机制。方法:将孕20 d胎鼠剖腹产获得早产新生大鼠6只纳入早产组,顺产第1天新生大鼠6只纳入足月组,生后6周SD大鼠作为成年组。处死3组大鼠并解剖腹部,获得回肠末端肠道组织。通过荧光定量PCR的方法检测3组大鼠回肠末段组织的TLR4、SIGIRR、Tollip基因mRNA相对表达量,分别比较3个基因在3组SD大鼠肠组织中表达量。结果:早产组TLR4 mRNA的表达量是足月组的2.36倍,而成年组则是足月组的1/4,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组SIGIRR mRNA的表达量是足月组的1/7,而成年组则是足月组的1.37倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。早产组Tollip mRNA的表达量是足月组1/20,两组的差异有统计学意义(P<0.05),成年组的Tollip mRNA表达量未得到结果。结论:不成熟的肠道组织TLR4表达量多,TLR4负调控因子SIGIRR、Tollip表达下调。