响应面法优化南强菌素发酵培养基

从海洋真菌Phomopsis sp.A123分离得到的南强菌素(Deacetylmycoepoxydiene)是2003年新发现的具有抗肿瘤活性化合物.采用单因素筛选方法,筛选得到影响该化合物产生的4个因素,分别为葡萄糖、维生素B1、马铃薯和甘露醇.在此基础上,采用响应面法对4个因素最佳水平范围进行研究,利用Design-Expert软件进行2次回归分析,在培养基中葡萄糖、维生素B1、马铃薯和甘露醇的含量分别为87,0.005,170和14 g/L时,南强菌素的产量从35 mg/L提高到200 mg/L.

海洋真菌Phomopsis sp.产抗肿瘤药物南强菌素发酵培养基的优化

从海洋真菌Phomopsis sp.分离得到的南强菌素是新发现的高抗肿瘤活性化合物,为新颖罕见的去乙酰真菌环氧二烯类化合物(Deacety Mycoepoxydiene)。以Phomopsis sp.A123经诱变后获得的818菌株为出发菌株,对其进行液体发酵培养。考察了几种常见培养基对南强菌素发酵生产的影响,确定出较适的培养基。同时以该培养基为基础培养基,探讨了碳源、氮源以及几种维生素对南强菌素积累的影响。培养条件的初步优化结果表明:最佳的培养基为PD培养基;最适碳源和氮源分别为麦芽糖及马铃薯煮汁;生物素的添加有利于南强菌素的积累,产量提高了25%。

新骨架小分子南强菌素对紫杉醇耐药性的逆转作用及其机制

目的研究南强菌素(DM)对肿瘤细胞紫杉醇耐药性的逆转作用并探讨其逆转机制。方法 MTT法检测南强菌素对A549/T耐药细胞与A549敏感细胞的毒性及其对紫杉醇敏感性的影响,以Annexin V法检测细胞凋亡率和Rh123在耐药细胞中的积累,HPLC测定细胞内紫杉醇的蓄积量,Western blotting检测Ⅲ型β微管蛋白的表达水平。结果南强菌素可显著提高A549/T细胞对紫杉醇的敏感性,增加紫杉醇诱导耐药细胞凋亡率,增强A549/T细胞中紫杉醇和Rh123的蓄积能力,同时,亦可明显抑制A549/T细胞中Ⅲ型β微管蛋白的表达水平。结论南强菌素可有效提高耐药细胞对紫杉醇的敏感性,逆转A549/T细胞对紫杉醇的耐药作用,其逆转机制可能与南强菌素抑制耐药肿瘤细胞膜上耐药蛋白P-糖蛋白的外泵转运功能和干扰Ⅲ型β微管蛋白的表达水平有关。

南强菌素在大鼠体内的药动学、组织分布及排泄研究

目的研究海洋新骨架小分子南强菌素经单次静脉注射后在Wistar大鼠体内的药动学、组织分布及排泄特征。方法48只Wistar大鼠（雌雄各半）分为8组（每组雌雄各三只），3组分别尾静脉注射南强菌素10、20、30mg·kg^-1，液相色谱-串联质谱法（LC—MS／MS）测定其血药浓度，DAS2．0计算药动学参数；其余5组单次尾静脉给予南强菌素20mg·kg^-1，其中3组大鼠给药后0．5、2、3h麻醉处死、解剖测定南强菌素组织分布，1组给药后收集0—2h、〉2—4h、〉4～8h、〉8～24h的尿液粪便评价南强菌素的排泄过程，1组麻醉后插管收取0～2h、〉2～16h、〉16～24h胆汁评价胆汁排泄。结果大鼠分别静脉单次注射10、20、30mg·kg。南强菌素后，t1/2 2分别为（2．09±0．68）、（2．44±0．35）、（2．57±1．33）h，AUCo-8h分别为（3378±544）、（3492±460）、（4451±573）μg·h·L^-1；单次静脉给药20mg·kg^-1，0．5h后肾脏组织中的南强菌素含量最高（1736．8ng·^g-1），肺脏及脾脏次之；给药2h后，多数组织中已经检测不到或仅能检测到极少量南强菌素；原型药物经尿样和胆汁的排泄率分别为1．87％和0．91％，粪便的排泄率极低，低于总给药量的0．01％。结论单次给予南强菌素，各剂量组的AUC0-8h、ρmax和t1/2 2.用SPSS进行相关检验，无显著差异（P〉0．05），表明在置信度（单双侧）0．05水平上剂量与AUC0-8h、和t1/22均不相关；原型药物经粪便和尿样排泄率较低，1～24h内仅有1．87％从尿液中排出。