南极真菌红色素与红曲红色素稳定性比较

针对南极真菌Geomyces sp.WNF-15A所分泌的红色素与红曲霉红色素在色价、酸碱稳定性、金属离子稳定性、氧化剂与还原剂以及食品添加剂影响等方面进行了对比研究。结果表明,南极真菌Geomyces sp.WNF-15A所产红色素的色价(155.2)明显高于红曲红色素色价(86.4);该色素在抗氧化剂能力、酸度稳定性、部分金属离子与食品添加剂稳定性方面均优于红曲霉红色素。

南极真菌青霉(Penicillium sp.)S-3-88摇瓶发酵条件的初步优化

目的对南极来源的真菌青霉Penicillium sp.S-3-88进行细胞毒活性筛选及发酵条件优化。方法对菌株进行小量发酵及代谢产物提取,检测其粗提物对6种肿瘤细胞株的抑制活性;通过对培养基、培养温度、摇床转速和发酵时间的筛选,以细胞毒活性和次级代谢产物产量为指标对该菌株的培养条件进行初步优化。结果 Penicillium sp.S-3-88对6种肿瘤细胞株具有不同程度的抑制活性,其中对MCF-7和SGC-7901细胞的抑制率最高,分别达到78.79%和74.66%(初提物浓度为50μg/m L)。初步优化后,优选的发酵条件为:PDB培养基,温度20℃,发酵时间14d,转速180r/min。在此条件下进行发酵,Penicillium sp.S-3-88的次级代谢产物量和细胞毒活性分别比优化前高203.57%、48.32%(A549)和44.92%(SW-1990)。结论获得了一株具有强细胞毒活性的真菌Penicillium sp.S-3-88,优化了该菌株的发酵条件,有助于后期的活性次级代谢产物的分离纯化。

一株南极真菌的菌种鉴定及生长特性研究

对一株南极真菌进行菌种鉴定,并初步对其生长条件进行优化。采用形态学观察结合ITS rDNA基因序列鉴定菌株,将扩增片段测序并提交到美国国立生物技术信息中心网站进行BLAST序列比对,分析其序列并进行分子鉴定;通过测量不同温度、不同pH、不同无机盐离子在600nm处的吸光值,初步考察菌株的生长条件。该菌株在斜面培养基上形成黄色至橙黄色光滑菌落,具有多形态细胞;在不同温度,不同pH,不同无机盐离子的培养条件下,菌株的生长状态不同。该菌株为出芽短梗霉菌;菌株在30℃下生长较好,起始pH 5~9时,菌株生长情况差别不大,过多的无机盐离子不利于菌株生长,且易使液体培养基沉淀。

南极生境真菌Gliocladium catenulatum T31菌株杀虫活性的研究

本文对影响南极生境真菌Gliocladium catenulatum T31生长和杀虫活性的初始pH值、发酵时间、培养温度等影响因子进行了研究。并以小菜蛾为试虫,以校正死亡率为评价指标,利用微型平板法对真菌T31的杀虫活性进行测试,发酵液杀虫活性最高为60.42%。发酵物乙酸乙酯提取后,丙酮溶解0.33mg/mL浓度下,发酵液提取物杀虫活性最高为82.05%,菌体提取物杀虫活性为76.92%。盆栽试验证明该菌株发酵液对小菜蛾第7d的虫口减退率为54.2%。

南极真菌Penicillium sp. S-3-88次级代谢产物的研究

目的对源于南极（44.42°W,60.54°S,水温-1.16℃,水深239m）海参体内共附生真菌Penicillium sp.S-3-88的次级代谢产物进行研究。方法采用Sephadex LH-20色谱、反相ODS柱色谱、高效液相柱层析等色谱分析方法,对Penicillium sp.S-3-88发酵液的乙酸乙酯萃取部位进行系统分离,通过1 H和13 C NMR及质谱（LC-MS）等现代波谱解析手段,并与相关文献比对,鉴定化合物结构。结果分离得到9个单体化合物。结论鉴定化合物1～9分别为2-acetyl-4（3 H）-quinazolin-one（1）,benzo[d]thiazol-2（3 H）-one（2）,octadecyl phenylpropanoate（3）,diisobutyl phthalate（4）,butyl-isobutyl-phthalate（BIP）（5）,ergosterol peroxide（6）,melithasterol B（7）,22E,24R-5α,6α-epoxyergosta-8（14）,22-diene-3β,7α-diol（8）和cerevisterol（9）。

南极真菌Penicillium sp. S-2-10次级代谢产物的研究

目的对来源于南极海域海底沉积物真菌Penicilliumsp.S-2-10的次级代谢产物进行研究。方法对菌株进行规模发酵,并对所得发酵液的乙酸乙酯萃取浸膏进行系统分离纯化,据化学指征和生物学活性两方面特点,采用Sephadex LH-20凝胶色谱、正相硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、高效液相柱层析等色谱分析方法,通过核磁(~1 H-NMR和^(13) C-NMR等)及质谱(MS)等波谱分析方法,并与相关文献比较,鉴定化合物结构。结果分离得到7个单体化合物,经鉴定化合物1~7分别为benzoic acid,2-(2,6-dihydroxybenzoyl)-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-methyl,methyl ester(1),chrysophanol(2),volemolide(3),ergosta-6,8(14),22-trien-3-ol(4),2-aminophenoxazin-3-one(5),2-benzothiazolol(6),benzoic acid(7)。结论化合物3,4为首次从Penicillium属真菌中获得。

两株南极枝孢霉属真菌Cladosporium sp.NJF4和NJF6的次级代谢产物研究

南极因其独特的自然环境成为潜在、重要的微生物资源库,是产生新型生物活性物质和先导化合物菌株的潜在种源地,南极微生物正在成为创新药物研究新的重要资源。虽然近年来对南极微生物次级代谢产物的研究逐渐增加,但与温带和热带微生物研究相比仍处于初级阶段。对从南极普里兹湾海洋沉积物中获得的两株枝孢霉属真菌Cladosporium sp.NJF4和NJF6进行次级代谢产物分离及结构鉴定,获得20个化合物。化合物结构类型包括甾醇(1)、倍半萜类(7-8)、生物碱类(9-14)、二酮哌嗪(2-5、15-17)、芳香酸(6、18-19)等,其中倍半萜类(7-8)为首次从枝孢霉属真菌中分离得到,以上研究将为丰富南极微生物次级代谢产物库奠定一定的研究基础。

南极真菌Aspergillus sp. S-3-62次级代谢产物的研究

目的对源于南极真菌Aspergillus sp.S-3-62的次级代谢产物进行研究。方法采用Sephadex LH-20色谱、反相ODS柱色谱、高效液相柱层析等色谱分析方法,对Aspergillus sp.S-3-62发酵液的乙酸丁酯萃取部位进行系统分离。结果分离得到7个单体化合物。结论化合物1~7分别被鉴定为β-carboline(1),N-(2-Hydroxypropanoyl)-2-aminobenzoic acid amide(2),Cyclo-(Pro-8-hydroxy-Ile)(3),Cyclo-(Pro-Ile)(4),2-Acetyl-4(3H)-quinazolinone(5),4-Hydroxyben-zaldehyde(6)和Benzeneacetic acid,2-hydroxy-1-methylpropyl ester(7)。其中化合物7为新天然产物。

南极树粉孢属真菌胞外多糖的分离纯化及结构表征

研究南极树粉孢属(Oidiodendron truncatum)真菌所产胞外多糖的理化性质和结构特征。采用阴离子交换柱层析和凝胶柱层析对南极树粉孢属(Oidiodendron truncatum)真菌胞外多糖进行了系统的分离纯化,从中得到4个均一的组分(AFW1,AFW2,AFS1和AFS2),并结合红外、气质及核磁等技术对它们的结构进行了解析。结果表明:AFW1和AFW2为中性多糖,AFS1和AFS2中含有少量的蛋白;AFW1和AFS1是由甘露糖、葡萄糖和半乳糖3种单糖组成的结构复杂的杂多糖;AFW2和AFS2则仅由葡萄糖组成,其中AFW2属线性(-1,6-葡聚糖,而AFS2属于C-3位有分支的α-1,6-葡聚糖。

南极土壤嗜冷真菌Chrysosporium sp.C_(3438)活性代谢产物C_(3438)A的分离及结构鉴别

以对精原细胞法是否有活性作为筛选模型 ,对南极土壤嗜冷真菌 Chrysosporium sp. C3 4 3 8经低温发酵的活性产物进行了深入的化学研究 ,首次从南极土壤微生物代谢产物中分离得到

南极曲霉Aspergillus niger NJ49次级代谢产物的分离与鉴定

为挖掘南极真菌的资源应用潜力,对一株南极真菌进行了分子鉴定、次级代谢产物分离及结构鉴定。经ITS rDNA序列分析并构建系统发育进化树,鉴定该菌株为曲霉属真菌,命名为Aspergillus niger NJ49。综合运用Sephadex LH-20和G25凝胶柱层析、半制备高效液相色谱等方法对南极磷虾共附生微生物曲霉属真菌A.niger NJ49的发酵物进行分离和纯化,并利用核磁、质谱等现代波谱学方法进行结构鉴定。从南极曲霉A.niger NJ49中分离鉴定出12个化合物,分别鉴定为Trp-Val-Val(1)、Phe-Val-Val(2)、cyclo-(His, Leu)(3)、cyclo-(Pro, Arg)(4)、(3S,12aS)-3-(Isopropyl)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-pyrazino[1′,2′:1,6]-pyrido[3,4-b]-indole-1,4-dione(5)、cyclo-(Pro, Phe)(6)、cyclo-(Val, Phe)(7)、cyclo-(Pro, Tyr)(8)、cyclo-(Pro, Val)(9)、Phe-Val (10)、sclerin (11)、对羟基苯乙胺(12),其中化合物3、化合物9和化合物11为首次从南极曲霉属真菌中获得。研究结果可加深对南极海洋微生物资源的了解,丰富南极曲霉属真菌次级代谢产物库。

南极潮间带来源真菌Pseudeurotium sp.HDN17-894的次级代谢产物研究

目的研究南极潮间带来源真菌Pseudeurotium sp.HDN17-894的次级代谢产物及其抑菌活性。方法对目标菌株进行大量发酵获取粗提物,综合利用正相、反相柱层析、半制备高效液相色谱(HPLC)以及Sephadex LH-20凝胶柱层析等分离手段对粗浸膏进行分离纯化,通过核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)以及单晶衍射等现代波谱学方法,同时对照相关文献数据,确定化合物的结构,并筛选得到具有抑菌活性的化合物。结果从菌株HDN17-894中分离得到1对新的吲哚-3-酮螺环外消旋体化合物(±)-pseudeurdole(1),其为首次从天然产物中发现的含吲哚-3-酮螺环己二烯酮骨架的化合物;以及2个硫赭曲菌素类化合物(2~3),3个二苯醚类化合物(4~6)和1个聚酮类化合物(7)。对化合物进行抑菌活性测试,结果显示化合物3、7对不同致病菌展现出一定的抑菌活性,其中化合物3对蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的最小抑菌浓度(MIC)为16μg/mL。

南极大磷虾肠道曲霉菌Aspergillus sydowii NJF7的分离与代谢产物的研究

通过对2017年第34次“雪龙号”南极考察采集的南极大磷虾(Euphausia superba)共复生微生物进行分离,并对有价值菌株的次级代谢产物进行了研究。采用在3种选择性培养基中添加不同抗生素的稀释平板涂布法,从南极大磷虾中分离出一株有价值的真菌进行扩大培养,运用TLC、柱色谱(正相硅胶、C18硅胶、MCI、Sephadex LH-20凝胶)和半制备型HPLC等色谱方法对其代谢产物进行高效快速地分离纯化,结合现代波谱学手段(ESI HR MS、1H-NMR),鉴定次级代谢产物结构。首先经过形态学、18S rDNA-ITS序列分析,鉴定分离到一株真菌为曲霉Aspergillus sp.NJF7;从曲霉NJF7中分离到13个代谢产物,分别鉴定为环(脯氨酸-酪氨酸)(1)、环(色氨酸-酪氨酸)(2)、环(脯氨酸-苯丙氨酸)(3)、环(缬氨酸-脯氨酸)(4)、环(缬氨酸-色氨酸)(5)、环(异亮氨酸-色氨酸)(6)、环(谷氨酰胺-色氨酸)(7)、对羟基肉桂酸甲酯(8)、尿嘧啶(9)、对羟基苯乙胺(10)、苯乙胺(11)、N-甲基酪胺(12)、大麦芽碱(13),其中化合物7为新的天然产物。

南极青霉菌Penicillium sp.S-1-16摇瓶发酵条件的初步优化

对一株具有细胞毒活性的南极青霉属真菌Penicillium sp.S-1-16进行发酵条件的初步优化。通过对基础发酵培养基、发酵温度及培养基配制用水的筛选,以次级代谢产物量为主要指标,同时参考生物量及细胞毒活性指标来进行初步优化,获得一个较优的摇瓶发酵条件:酵母提取粉0.3%,蛋白胨0.5%,麦芽糖0.3%,葡萄糖1%,蔗糖5%,自来水,初始p H=7.0,接种量15%,18℃,180 r·min-1发酵15 d。采用初步优化后的条件进行发酵,与初始发酵条件相比,其次级代谢产物量提高到568.75%,对A549肿瘤细胞的抑制作用增强至265%,并且对He La肿瘤细胞和SGC-7901肿瘤细胞的抑制率分别从0提高到48.19%和69.18%,效果显著,为获得菌株中活性次级代谢产物奠定了基础。

南极来源真菌GW3-13产chetracin B发酵优化研究

目的提高菌株Oidiodendron truncatum GW3-13产chetracin B的产量。方法采用单因素及均匀设计方法,对菌株GW3-13产chetracin B的培养条件及培养基组成进行了优化。结果得到了菌株GW3-13产chetracin B最适培养基组成及最适发酵条件。结论在优化条件下,菌株GW3-13产chetracin B可达到(30.1±1.5)mg·L-1,比优化前提高了6.7倍。

1株南极来源真菌Arthrinium arundinis的次级代谢产物研究

目的对1株南极海泥来源真菌Arthrinium arundinis(FNJ20)的次级代谢产物进行研究。方法运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备高效液相色谱(HPLC)等方法对A.arundinis(FNJ20)的大米发酵提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)及质谱(MS)等波谱学方法进行结构解析,通过X射线单晶衍射实验确定化合物的绝对构型,并测定化合物的抗细菌及真菌活性。结果从A.arundinis(FNJ20)的大米发酵提取物中分离鉴定出6个二萜类化合物(1~6)及2个苯并色原酮类化合物(7~8),首次获得化合物1的单晶数据,并确证其绝对构型与文献相反。抗菌活性评价结果表明,化合物8对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌具有显著的抑制活性,其MIC值分别为6.25和12.50μmol/L。

南极海洋真菌Penicillium chrysogenum PR4-1-3的活性次级代谢产物研究

目的对一株具有明显细胞毒活性的南极海洋真菌Penicillium chrysogenum PR4-1-3的活性成分进行研究。方法采用溶剂萃取、柱色谱层析及制备HPLC等方法对菌株发酵产物进行活性追踪分离,通过理化性质及波谱学手段进行化学结构鉴定,以SRB法评价化合物的抗肿瘤活性,采用CPE方法对化合物1和2进行抗H1N1甲型流感病毒活性测试。结果从中分离得到5个芳香酚醌类化合物,其结构分别鉴定为secalonic acid D(1)s、ecalonic acid F(2)、chrysophanol(3)、emodin(4)和citreorosein(5)。这几个化合物均具有不同程度的细胞毒活性。化合物1在50μg.mL-1时,对H1N1病毒的抑制率为50%,具有一定的抗病毒活性。结论以上化合物均为首次从南极海洋微生物中分离得到,并初步发现secalonic acid D具有一定的抗H1N1病毒活性。

南极海洋丝状真菌多样性及其次级代谢产物的研究进展

海洋真菌由于能够产生结构新颖,活性独特的次级代谢产物,现已成为药物先导化合物的重要来源。南极海洋独特而严酷的自然环境使得真菌在生物物种、活性代谢产物等方面表现出明显的多样性和新颖性,正在成为微生物药物研究新的重要资源。本文对近年来国内外南极海洋丝状真菌多样性及其次级代谢产物的研究进展进行综述。