南极磷虾肽-亚铁螯合物的制备及理化性质分析

以南极磷虾肽(antarctic krill peptides,AKP)和FeCl2·4H2O为原料,以亚铁螯合率和螯合物得率为评价指标,在单因素试验基础上,利用正交试验优化制备出南极磷虾肽-亚铁螯合物(antarctic krill peptide-ferrous chelates,AKP-Fe),并对其理化性质进行分析。结果表明:AKP-Fe的最佳制备条件为:肽铁质量比3∶1,螯合温度40℃,螯合时间40 min,pH值5.5,肽浓度4%,乙醇体积倍数6。在此条件下测得亚铁螯合率为77.25%,螯合物得率为41.03%。傅里叶变换红外光谱分析显示AKP的氨基和羧基与Fe2+发生结合;扫描电镜分析显示AKP与Fe2+螯合后由松疏的片状结构变为颗粒状的聚集体。

南极磷虾肽对斑马鱼生长及生理生化指标的影响

评估在饲料中添加不同质量比的南极磷虾肽作为饵料添加剂,对斑马鱼的生长及生理生化指标的影响。将试验鱼分成3个试验组,在其饲料中添加南极磷虾肽分别为100、250和500 mg/kg,连续喂养56 d。喂养结束后检测斑马鱼的体增重率、特定增长率、内脏质量比、肥满度、繁殖力、红细胞及白细胞计数、血红蛋白含量、骨骼及肌肉氟含量和血浆及红细胞超氧化物岐化酶(SOD)等指标,并同时对饲料的转化率、饲料系数和蛋白质效率等指标进行检测。添加南极磷虾肽后,斑马鱼在增重率、特定增长率、红细胞及白细胞计数、骨骼氟含量和血浆及红细胞SOD均高于对照组;对于肌肉内氟含量无影响,但在繁殖力方面低于对照组。在饲料效率方面,添加南极磷虾肽100 mg/kg的试验组在饲料系数、饲料转化率和蛋白质效率均优于其他组。结果表明:添加南极磷虾肽后可促进斑马鱼的生长以及免疫,但需注意对亲鱼繁育的不利影响。

南极磷虾肽促进小鼠骨折愈合作用及其机制

目的:从南极磷虾粉中酶解分离出南极磷虾肽(peptides from Antarctic krill,AKP),探究其对小鼠骨折愈合的影响及机制。方法:对雌性C57BL/6小鼠进行右侧胫骨开放性骨折手术,术后随机分为骨折模型组、AKP低剂量组(200 mg/kg mb)、AKP高剂量组(400 mg/kg mb)。于小鼠骨折术后5、10、21 d进行取材,动态分析AKP对小鼠血清生化指标、骨痂组织形态学及软骨内骨化关键基因转录的影响。结果:AKP能显著上调血清转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、I型胶原蛋白(collagen type I,Col1α)水平(P<0.05);AKP能够剂量依赖性地促进纤维骨痂的形成、软骨性骨痂的形成与转变以及硬骨性骨痂的形成与改建;AKP可显著上调早期成软骨细胞分化因子(SOX9、Col10α)、中后期血管生成基因(VEGF、Ang1)及软骨基质降解因子MMP13和新骨生成相关基因(Col1α、OCN、TGF-β)的mRNA转录水平(P<0.05)。结论:AKP可通过加速软骨内骨化过程从而促进骨折愈合。

南极磷虾肽对高尿酸血症小鼠脂代谢的改善及作用机制

为探究南极磷虾肽(Peptides from Antarctic krill, AKP)对高尿酸血症(Hyperuricemia, HUA)引起的脂代谢紊乱的影响,本实验采用高嘌呤饮食和腹腔注射氧嗪酸钾联合建立HUA模型,灌胃阳性药(非不司他,7.5 mg·kg)或AKP(450和900 mg·kg),干预30 d。研究表明,AKP可显著降低血清尿酸含量和黄嘌呤氧化酶、腺苷脱氨酶活性。此外,AKP能通过下调炎症小体(NOD)样受体蛋白3(NLRP3)和半胱天冬酶-1的蛋白表达,抑制脂肪酸合成,促进脂肪酸β氧化,从而改善HUA小鼠的脂质水平,且AKP的治疗效果优于阳性药。本研究首次证实了AKP对HUA小鼠脂代谢的改善作用及作用机制,可为AKP高值化利用提供相关的理论依据。

南极磷虾肽抗皮肤光老化作用的研究

本文以昆明小鼠为对象,研究南极磷虾肽对光老化皮肤损伤的保护作用。将昆明小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、南极磷虾肽P-1组及P-2组,建立光老化小鼠模型,观察小鼠造模部位的表观特征并测定相关生化指标。结果显示,与模型对照组对比,P-1及P-2组小鼠皮肤较光滑,弹性大,红斑少,更接近正常组;P-1及P-2组可以极显著抑制光老化小鼠皮肤水分流失(P<0.01),糖胺聚糖(GAG)含量增高(P<0.01),胶原含量(P<0.05)及脂质含量(P<0.05)的降低;P-1及P-2组可以显著提高小鼠血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活力(P<0.05),显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05)。表明南极磷虾肽对小鼠光老化皮肤有显著的保护作用,为南极磷虾肽在化妆品领域的应用提供理论基础。

南极磷虾肽的功能活性与研究进展

南极磷虾是南极海域存储量丰富,以浮游动植物为食物的浮游动物。南极磷虾虾壳氟含量较高,虾肉含有丰富蛋白质,相对分子量在0.5~10000 Da之间的南极磷虾多肽具有降血压、抗疲劳、抗氧化性、抗菌性、降胆固醇等功能,现在已经被应用于药物和食品领域。本文综述了开发南极磷虾的目的、现存捕捞的技术难题及南极磷虾肽的生理活性,为开拓南极磷虾肽的应用范围提供参考。

南极磷虾肽对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用

目的观察南极磷虾肽(peptides from Antarctic krill,AKP)对去卵巢大鼠骨代谢、骨密度(BMD)及骨生物力学的影响,探讨其对骨质疏松症的改善作用。方法 32只雌性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、模型对照组、阳性对照组(阿伦磷酸钠1mg/(kg·d))和南极磷虾肽组(1 000mg/(kg·d)),大鼠摘除双侧卵巢后4周开始持续灌胃90d,分别检测血清雌二醇(E2)、血清骨代谢指标(骨源性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OCN)、I型前胶原羧基端前肽(PICP)、组织蛋白酶K(Cath-K)、I型胶原羧基端交联肽(CTX-I))和尿液中骨代谢指标(钙(Ca)、磷(P)、脱氧吡啶啉(DPD))含量,并测定大鼠骨密度和骨生物力学指标。结果南极磷虾肽能显著改善去卵巢大鼠血清中BALP、OCN和PICP的分泌(P<0.01),降低血清Cath-K、CTX-I和尿Ca、P、DPD水平(P<0.01),改善去卵巢大鼠骨代谢的高转换率;南极磷虾肽能显著增加去卵巢大鼠BMD(P<0.01),改善其骨生物力学性能(P<0.01)。结论南极磷虾肽具有改善去卵巢大鼠骨质疏松症的作用。

磷酸化南极磷虾肽调控Wnt/β-连接蛋白通路改善大鼠骨质疏松症

目的:研究磷酸化南极磷虾肽(PP-AK P)对双侧去卵巢骨质疏松症模型大鼠的改善作用及其机制。方法:采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松症大鼠模型,将SD大鼠随机分为5组:假手术组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性对照组【阿伦磷酸钠1 mg/(kg·d)】和磷酸化南极磷虾肽低、高剂量组【400,800 mg/(kg·d)】,灌胃12周后,分别检测血清骨代谢相关指标、骨密度及骨组织形态学;测定Wnt/β-连接蛋白信号通路关键基因m RNA和蛋白的表达。结果:磷酸化南极磷虾肽能显著下调去卵巢骨质疏松症大鼠血清中骨源性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OCN)和骨形态发生蛋白(BMP-2)的分泌(P<0.01),降低血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和I型胶原羧基端交联肽(CTX-I)水平(P<0.01),降低去卵巢大鼠骨代谢的高转换率;显著提高模型大鼠股骨骨密度(P<0.01),并能显著增加骨小梁厚度和面积,降低骨小梁间距,改善骨组织微观结构;q RT-PCR检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白、RUNX2、OSX m RNA的表达水平;免疫印迹检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白总蛋白、β-连接蛋白核蛋白及RUNX2蛋白的表达。结论:南极磷虾肽能显著改善双侧去卵巢大鼠骨质疏松症,其作用机制与下调Wnt/β-连接蛋白通路,降低骨质疏松症大鼠高骨转换速率有关。

南极磷虾肽对去卵巢骨质疏松症小鼠肠钙吸收的改善作用研究

目的研究南极磷虾肽(peptide from Antarctic krill,AKP)对双侧去卵巢骨质疏松症模型小鼠肠钙吸收的改善作用。方法对9周龄雌性健康C57BL/6J小鼠进行双侧卵巢摘除手术,建立骨质疏松症模型,术后12周,随机分为假手术组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性对照组(阿伦磷酸钠,1mg/kg)、南极磷虾肽组(800mg/kg)。每天灌胃1次,连续灌胃90d后,通过测定血清生化指标PTH、1,25(OH)_2D_3、血钙及血磷以及肠钙吸收通道基因Trpv6、CaBP-d9k、PMCA1b的mRNA表达水平。结果血清结果表明,AKP能够显著抑制血清中PTH的水平,增加1,25(OH)_2D_3的含量,维持血清中钙、磷稳定;qRT-PCR结果表明,AKP能显著上调十二指肠中1,25(OH)2D3的受体VDR以及肠钙吸收通道关键基因Trpv6、CaBP-d9k、PMCA1b的mRNA表达水平,增强去卵巢骨质疏松小鼠的肠钙吸收功能;并且AKP能够显著增加模型组小鼠的骨密度及骨钙、骨磷含量。结论 AKP能够改善去卵巢骨质疏松症小鼠的肠钙吸收作用,增加去卵巢小鼠的骨矿含量。

南极磷虾肽改善高尿酸血症机制研究

目的探究南极磷虾肽(AKP)对于高尿酸血症模型小鼠的降尿酸功效及其作用机制。方法采用高效液相色谱(HPLC)法体外筛选出具尿酸合成关键限速酶—黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XOD)抑制活性的AKP,体内动物实验验证AKP的降尿酸活性。雄性Balb/c小鼠采用高嘌呤饲料(25%酵母浸粉)喂养联合腹腔注射尿酸酶抑制剂(氧嗪酸钾,200 mg·kg^(-1)·BW^(-1))建立高尿酸血症小鼠模型,造模21 d后进行AKP干预。小鼠随机分为正常对照组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性药组(非布司他)、AKP低剂量组(450 mg·kg^(-1)·BW^(-1))、AKP高剂量组(900 mg·kg^(-1)·BW^(-1)),干预30 d后检测血清尿酸含量(Uric acid, UA)、肝脏尿酸合成关键酶酶活、肾脏及肠道尿酸转运蛋白m RNA的转录水平及形态学改变。结果 AKP体外XOD抑制率可达24.4%。动物实验验证表明AKP可显著降低高尿酸模型小鼠的UA,作用机制为通过抑制肝脏尿酸合成关键酶XOD及腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase, ADA)酶活,从而抑制肝脏尿酸生成;上调肾脏及肠道尿酸分泌转运体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ATP binding cassette superfamily G member 2, ABCG2)、有机阴离子转运体(organic anion transporter 1, OAT1)转录水平,并抑制尿酸重吸收转运体葡萄糖转运体9(glucose transporter 9, GLUT9)、尿酸转运体1(urate transporter 1, URAT1)转录水平,从而促进肾脏及肠道尿酸排泄。AKP可显著降低血清尿素氮(Bloodureanitrogen,BUN)含量,肾脏及肠道切片观察结果进一步表明,AKP可以显著改善高尿酸血症造成的肾脏及肠道损伤,维护肾脏及肠道尿酸排泄功能。结论 AKP可通过抑制肝脏尿酸生成,促进肾脏及肠道尿酸排泄,维护肾脏及肠道形态及功能,从而改善高尿酸血症。

蛋白水解酶联合自溶作用的南极磷虾多肽氨基酸分析

用正交实验方法研究水解酶联合自溶作用获得南极磷虾水溶性多肽的优化条件,通过SDS-PAGE、凯氏定氮、氨基酸分析了南极磷虾酶解液的多肽含量、多肽分子量以及氨基酸组成。结果显示,酶解的最佳条件为使用胰蛋白酶联合自溶作用在45℃的条件下水解12h;酶解液中分子量在11.1～49.3ku的多肽最高可占水溶性南极磷虾多肽的68.01%;南极磷虾多肽的氨基酸比例均衡,不同处理条件对南极磷虾多肽的氨基酸模式影响较小,EAA/TAA和EAA/NEAA分别在40以上和64以上,符合FAO/WHO推荐的理想蛋白质模式。

南极磷虾肽的脱氟工艺和体外抗氧化作用

以南极磷虾为原料,选取超声水洗时间、Ca(OH)2添加量、反应温度、反应时间进行单因素试验,利用正交试验法确定了南极磷虾酶解液脱氟的最佳工艺,即超声水洗时间20 min、Ca(OH)2添加量0.6%、反应温度40℃、反应时间60 min,此时酶解液氟含量为24.78 mg/kg;此外,分析了南极磷虾肽的分子量分布、氨基酸组成及抗氧化活性。结果表明:南极磷虾肽的分子质量小于1000 U的组分高达93.233%,氨基酸组成丰富,尤其富含谷氨酸、天冬氨酸及其酰胺;南极磷虾肽的抗氧化能力与其浓度呈现一定的依赖性,其清除DPPH·、·OH和O2^-·的IC50值分别是2.12,5.72和16.43 mg/mL,同时具有一定的还原力,说明南极磷虾肽具有良好的抗氧化能力,为南极磷虾肽应用于相应的保健食品、药品等领域奠定了理论和应用基础。

南极磷虾肽的制备与应用前景

南极磷虾具有典型的高蛋白、低脂肪以及矿物质含量丰富的特点。以南极磷虾蛋白为原料制成的南极磷虾肽,包含18种人体所需的氨基酸,营养全面,且分子量小,更容易被人体吸收,能快速补充人体所需的营养,在抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、预防骨质疏松和提高机体免疫力等方面有很好的作用。对有关南极磷虾肽的制备、活性及其应用进行了综述,以便为南极磷虾蛋白及肽的进一步研究提供参考。