姜黄素与博来霉素联用对A549细胞增殖抑制及细胞周期和凋亡的影响

目的:研究姜黄素和博来霉素联合应用对人肺泡Ⅱ型样细胞A549细胞增殖和细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨姜黄素抗博来霉素诱导的肺纤维化机制。方法:采用MTT法观察姜黄素和博来霉素对A549细胞的增殖抑制作用,并用流式检测细胞周期分布,凋亡试剂盒检测细胞凋亡。结果:姜黄素及博来霉素能抑制A549细胞的增殖,并呈浓度及时间依赖性。姜黄素(Cur)浓度为60μmol/L与博来霉素(BLM)2、4、6、8μg/mL联合24h的抑制率显著高于单用博来霉素组;姜黄素可引起体外培养的A549细胞G0/G1期阻滞;而且对G0/G1期阻滞随作用时间延长而增强。单用博来霉素刺激细胞,培养24h和48h,对细胞周期各个时期的影响没有统计学意义;姜黄素联合博来霉素诱导A549细胞凋亡,细胞核变的不规则皱缩,可见凋亡小体。结论:姜黄素联合博来霉素在体外对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,对细胞周期G0/G1期有显著阻滞作用,并可改变细胞凋亡;姜黄素和博来霉素联合应用可能通过改变肺泡上皮细胞细胞周期分布,并通过影响肺泡细胞凋亡从而起到抑制博来霉素治疗过程中肺纤维化的发生发展。

局部注射博来霉素建立硬皮病小鼠模型的实验研究

目的了解通过局部注射博来霉素(BLM)建立硬皮病小鼠模型的方法。方法选用C3H/He小鼠作为实验对象,对照组9只小鼠随机分成3组,分别在各组小鼠背部中央区皮下注射100μL0.01mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)1次/d连续1周,2周和3周。动物模型组12只小鼠,随机分成4组,每组3只,分别背部皮下注射100μL600μg/mLBLM1次/d连续1周,2周和3周,进行皮肤组织病理学以及血清自身抗体检测验证。结果与对照组相比,连续注射3周BLM的小鼠真皮均匀硬化,皮损区表真皮厚度增加(P<0.05),羟脯氨酸含量显著增高(P<0.05),肥大细胞数目显著增加(P<0.05)伴有脱颗粒现象,TGF-β表达显著高于对照组(P<0.05)。BLM连续注射1周和2周的小鼠皮损区上述改变不明显。该小鼠模型肺泡间隔增厚,伴单一核细胞浸润,并可见肺组织小血管壁增厚。小鼠模型血清中ANA阳性,结合ENA抗体测定提示存在Scl-70抗体。硬皮病小鼠停止注射BLM后继续观察6周,皮肤硬化仍然存在。结论在C3H/He小鼠背部每日皮下注射600μg/mLBLM,连续3周可以成功建立硬皮病小鼠模型。

纤维蛋白胶／博来霉素栓塞硬化治疗面颈部血管畸形彩色多普勒超声研究

目的:通过多普勒超声探索纤维蛋白胶复合博来霉素(FG/BLM)栓塞硬化面颈部血管畸形的作用机制。方法:纳入面颈部静脉畸形(VM)、动静脉畸形(AVM)患者各10例。在超声引导下进行FG/BLM栓塞硬化治疗,彩色多普勒超声记录FG/BLM注射到病变瘤(管)腔后的实时二维声像图及彩色血流变化,判断药物注射后的流向及范围。结果:二维声像图可见FG/BLM注射到VM瘤腔后即刻注射物瞬间呈团状或片状强回声,随后漂浮于畸形静脉腔内并弥散到瘤腔各处。后期可见病变区被大量絮状及网状低回声伴斑片状强回声充填,瘤腔体积显著膨胀,彩色血流显示病变区内血流信号明显减少。注射到AVM管腔后注射物瞬间呈团状或片状强回声,随后可见雪花状强回声大部分随血流快速充填或散落到注射血管腔的远端,后期病变区周边被大量蜂窝状中等回声及斑片状强回声充填,病变区彩色血流显著减少。结论:FG/BLM注射到VM瘤腔后对回流静脉有栓塞、阻断作用,对注射到瘤腔的硬化剂有贮存作用。FG/BLM注射不仅能够栓塞硬化局限性AVM的扩张血管,还能够栓塞其毛细血管网。