槲皮素在博来霉素诱导的雪貂肺纤维化中的治疗作用及机制研究

探讨槲皮素在博来霉素诱导的雪貂肺纤维化中的治疗作用及机制。方法:采用气管一次性注射博来霉素构建雪貂肺纤维化模型。将15只雪貂随机分为3组,每组5只:对照组(生理盐水处理),BLM组(BLM处理),BLM+QUE组。对照组:通过腹腔注射10%水合氯醛(3.5ml/kg)麻醉雪貂,然后气管内一次性注射生理盐水(5mg/kg),当日再腹腔内注射生理盐水3mg/kg,后连续每日一次,直至死亡。BLM组:通过腹腔注射10%水合氯醛(3.5ml/kg)麻醉雪貂,然后气管内一次性注射BLM(5mg/kg),当日再腹腔内注射生理盐水3mg/kg,后连续每日一次,直至死亡。BLM+QUE组:通过腹腔注射10%水合氯醛(3.5ml/kg)麻醉雪貂,然后气管内一次性注射BLM(5mg/kg),当日再腹腔内注射QUE3mg/kg,后连续每日给药一次,直至死亡。收集各组雪貂肺组织,HE染色观察肺组织病理变化,测定肺组织BALF白细胞分类计数,检测羟脯氨酸(HYP)含量。结果:与对照组相比,BLM组、BLM+QUE组肺组织病理损伤明显,BALF中性粒细胞和巨噬细胞水平、羟脯氨酸(HYP)含量显著升高(P<0.05)。与BLM组相比,BLM+QUE组肺组织病理损伤减轻,BALF中性粒细胞和巨噬细胞水平、羟脯氨酸(HYP)含量下降(P<0.05)。结论:槲皮素对博来霉素诱导的雪貂肺纤维化有治疗作用。

肺纤维化微环境中肺泡巨噬细胞的蛋白质组学分析

目的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)能够处理表面活性物质来维持肺泡膨胀开放,并充当防御病原体入侵的第一道免疫防线,对肺部微环境稳态的维持至关重要。已有研究表明,肺纤维化过程中,单核来源的AMs持续释放促炎因子和趋化因子,招募更多免疫细胞到受损区域,维持并加剧炎症,从而发挥负面作用。目前,大多数研究聚焦于肺纤维化微环境AMs的基因表达水平,而在蛋白质功能和调控方面的报道较少。本研究旨在探讨正常生理条件下与肺纤维化后AMs的差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs),以便更全面地理解AMs在肺纤维化发展过程中的作用。方法本研究建立博来霉素诱导肺纤维化小鼠模型,利用流式细胞分选技术收集来自生理盐水对照组和肺纤维化模型的AMs(每个样本2.5×105个细胞),通过无标记蛋白质组学方法获得蛋白质表达谱。结果通过将生理盐水组与已公开的生理AMs蛋白质组数据比对发现,本研究产出的蛋白质组数据质量较高,能够满足研究需求。综合分析结果显示,与对照组相比,博来霉素组AMs有778种蛋白质表达上调。此外,上调的DEPs中富集通路包括I-κB/NF-κB通路、炎症反应调节通路、吞噬调节通路、TGF-β通路和HIF-1通路,表明肺纤维化微环境中的AMs具有促炎和促纤维化功能。对DEPs的蛋白质-蛋白质相互作用网络分析表明,Tlr2和Pycard之间的相互作用是AMs促炎表型的控制节点,从而导致肺纤维化进展。结论本研究探讨了AMs在肺纤维化微环境中蛋白质表达谱的变化。结果发现,AMs显著上调多条与炎症和纤维化关联的通路蛋白,并提示Tlr2和Pycard的相互作用是AMs表现出高度促炎活性的控制节点。