动物组织中卡巴氧和喹乙醇以及相关代谢产物的液相色谱-串联质谱检测方法

建立了牛、猪肌肉和肝脏组织中卡巴氧（CBX）和喹乙醇（OQX）以及相关代谢产物——脱氧卡巴氧（DCBX）、喹嗯啉-2-羧酸（QCA）和3-甲基喹嗯啉-2-羧酸（MQCA）残留的LC—MS／MS的检测方法。组织样品中的卡巴氧用乙腈-乙酸乙酯（体积比1：1）溶液提取；代谢产物的提取则是经适当处理后的样品加入Protease蛋白酶进行酶解，后采用阴离子交换固相萃取柱Oasis MAX进行净化和富集。分析样品以甲酸溶液（体积分数为0．1％）-甲醇-乙腈为流动相，经Inertsil ODS-3色谱柱分离，在LC—MS／MS多反应监测模式下进行定性、定量分析，采用正离子扫描。CBX、DCBX、QCA和MQCA的定量下限均为0．5μg／kg，猪、牛肌肉和肝脏在0．5～5．0μg/kg添加水平的平均回收率在76％～97％之间，相对标准偏差（n=10）在2．9％～16．9％之间。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸡肉、鸡蛋中喹乙醇和卡巴氧及代谢物残留

目的建立高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱法测定鸡肉、鸡蛋中喹乙醇、卡巴氧及其代谢物残留量的分析方法。方法组织样品中的卡巴氧和喹乙醇用乙腈-乙酸乙酯(1:1, V:V)溶液提取;代谢物的提取用蛋白酶酶解后经盐酸溶液酸化,采用阴离子交换固相萃取柱净化和富集。分析样品以0.1%甲酸溶液-甲醇进行梯度洗脱,经Waters Xbridge C_(18)色谱柱分离,以液相色谱串联质谱多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)正离子模式进行检测。结果 5种喹喔啉类药物在0.5～50ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数r^2为0.9956～0.9988;该方法的检出限和定量限分别为0.1～0.5μg/kg和1.0～2.0μg/kg;鸡蛋和鸡肉样品中,喹乙醇、卡巴氧、脱氧卡巴氧、喹喔啉-2-羧酸和3-甲基喹喔啉-2-羧酸在0.2～2.0μg/kg加标水平的平均回收率为85.1%～108.2%,日内精密度为4.9%～8.7%,日间精密度为6.2%～11.7%。结论该方法简单有效、回收率好、灵敏度高、特异性好,能满足日常检测的需求。

液相色谱-串联质谱法测定牛奶和奶粉中卡巴氧和喹乙醇代谢物的残留量

建立了牛奶和奶粉中卡巴氧代谢物喹喔啉-2．羧酸（QCA）和喹乙醇代谢物3-甲基喹喔啉-2-总羧酸（MQCA）残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。将样品经0．6％（体积分数）的甲酸溶液进行消化，用Tris缓冲溶液调节pH后，加入Protease蛋白酶进行酶解，样品溶液用0．3mol／LHCl溶液酸化后，采用阴离子交换固相萃取柱OasisMAX进行净化和富集。分析样品以0．1％（体积分数）的甲酸溶液-甲醇-乙腈为流动相，经Inertsil ODS-3色谱柱分离，采用负离子扫描，在LC．MS／MS多反应监测模式下进行定性及定量分析。喹吧啉-2-羧酸和3-甲基喹嘿啉-2-羧酸的方法测定下限牛奶为0．5μg／kg，奶粉为4．0μ/Kg。对牛奶在0．5～5．0μg／kg，奶粉在4．0～40．0μg/kg添加水平的平均回收率为68．2％～82．5％，RSD为3．4％～12％。

超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中的卡巴氧、喹烯酮、乙酰甲喹及其代谢物

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中卡巴氧(CBX)、喹烯酮(QCT)、乙酰甲喹(MEQ)、喹啉-2-羧酸(QCA)、3-甲基喹啉-2-羧酸(MQCA)5种化合物残留的分析方法。样品分别采用乙酸乙酯-乙腈(50∶50)混合溶液、磷酸盐缓冲液分步提取,正己烷净化,以甲醇-乙腈(11∶3)混合溶液和0.1%甲酸溶液为流动相,经ACQUITYTM BEH C18色谱柱分离后进行LC-MS/MS多反应监测模式分析,外标法定量。结果表明,5种喹啉类化合物的响应值与其质量浓度在5～50μg/L范围内呈良好线性,相关系数均大于0.998,方法的定量下限为1.0μg/kg。在加标水平1.0～10μg/kg范围内,回收率为70%～108%,相对标准偏差(RSD)为2.5%～11%。该方法前处理过程简便快捷,回收率高,可满足实验室大量、快速分析的需求。

高效液相串联质谱法测定动物源食品中喹赛多、卡巴氧残留

本试验建立了动物源食品中喹喔啉类药物喹赛多、卡巴氧残留量的液相色谱—电喷雾串联质谱测定方法.采用酸性乙腈—甲醇混合溶剂提取样品中的残留物,提取液浓缩后经HLB固相萃取小柱净化,以液相色谱—串联质谱仪测定,外标法定量.结果表明:喹赛多、卡巴氧质量浓度为1-50μg.L-1时具有良好的线性范围,相关系数>0.999;在5-20μg.kg-13个添加水平范围内的回收率为69.10%-93.54%,相对标准偏差为2.49%-14.45%,方法检出限分别为3和2μg.kg-1.可见,本方法适用于动物源性样品中喹喔啉类药物残留的定量测定.

液相色谱-串联高分辨质谱测定鸡肉中卡巴氧、喹乙醇的代谢物残留

本研究建立了鸡肉中卡巴氧、喹乙醇的代谢物残留的液相色谱-串联高分辨质谱测定方法。鸡肉样品经酸解后,固相萃取净化,液相色谱-串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱测定,稳定同位素内标定量。卡巴氧、喹乙醇的代谢物喹喔啉-2-羧酸、3-甲基-喹喔啉-2-羧酸在0.5μg/kg^10 g/kg范围内线性关系良好,最低定量限0.5μg/kg,检测限0.2μg/kg。高中低浓度精密度<20%(RSD%),平均回收率70%~120%。经实际样品的测定,本方法简便、实用,适宜于大批量样品的测定。

可食性动物组织中卡巴氧残留标示物ELISA检测方法的建立

将卡巴氧残留标示物喹喔啉-2-羧酸(QCA)与γ-氨基丁酸(ABA)衍生成喹喔啉-2-甲酰胺丁酸(QCA-ABA),再与牛血清白蛋白(BSA)偶联作为免疫原(QCA-ABA-BSA),将QCA与卵清白蛋白(OVA)偶联作为包被原(QCA-OVA),建立了猪可食性组织中QCA的间接竞争ELISA检测方法。结果表明,最优的QCA-OVA包被抗原浓度为4μg/mL,抗体稀释倍数为1∶3.2×104,最适检测范围为0.2~51.2 ng/mL,最低检测限为0.6μg/kg,对猪肌肉和猪肝脏的添加回收率为47.4%~87.7%。

液质联用法测定饲料中卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇

应用液质联用仪对饲料中同时测定卡巴氧、乙酰甲喹、喹烯酮和喹乙醇的方法,从线性、灵敏度、准确度和精密度等方面进行考察,发现试验方法设计合理,实用有效,检测限和定量限能很好的达到标准规定的数值。经试验:采用乙腈-0.1%甲酸水(60+40,v/v)提取试料中的喹噁啉类药物,经HLB固相萃取柱净化后液相色谱-串联质谱检测法测定,基质匹配标准曲线校正,外标法定量。在仪器最佳工作条件下,对基质匹配标准溶液进样,以峰面积为纵坐标,基质匹配标准溶液浓度为横坐标绘制工作曲线,用单点或多点校正对样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。用流动相稀释喹噁啉类药物标准贮备液,配制成浓度为20、50、100、200、500、1 000、2 000ng/m L的系列标准工作液,以药物浓度为横坐标,喹噁啉类药物峰面积为纵坐标绘制标准曲线,相关系数均大于0.99。各饲料中喹噁啉类药物的平均回收率均满足70%~120%;日内变异系数范围均小于15%,日间变异系数均小于15%,方法回收率高,精密度好。

卡巴氧的单扫示波极谱测定

在 ｐＨ＝６．８的磷酸盐缓冲溶液中，卡巴氧有良好的单扫极谱吸附波．Ｐ_１波的一阶导数波高在 ８ × １０^（－８）～４ ×１０^（－６）ｍｏｌ／Ｌ以及１× １０^（－５）～６×１０^（－５）ｍｏｌ／Ｌ范围内与浓度成直线关系，检测下限可达５×１０^（－９）ｍｏｌ／Ｌ．Ｐ３波的一阶导数波高在 ２ × １０^（－８）～８ × １０^（－６）ｍｏｌ／Ｌ范围内与浓度成直线关系，都可用于对卡巴氧的分析测定．本文对极谱波的电化学行为进行了研究，并对极谱波的电极反应进行了研究和推断．

卡巴氧的代谢物喹喔啉-2-羧酸人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备

实验采用碳二亚胺法将卡巴氧代谢物喹喔啉-2-羧酸(QCA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,采用用混合酸酐法将其与卵清白蛋白(OVA)偶联,分别将其作为免疫原(QCA-BSA)和包被原(QCA-OVA)进行抗血清的制备及ELISA实验。经过多次动物免疫及EILSA实验,结果表明,获得了高效价的特异性抗体。

QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定动物肌肉组织中喹乙醇及卡巴氧代谢物

目的建立QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱测定动物肌肉组织中喹乙醇及卡巴氧代谢物的方法。方法样品经盐酸酸解,乙酸乙酯提取,无水硫酸镁和氯化钠盐析,正己烷除脂净化。经Waters ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm, 1.8?m)色谱柱分离,以0.1%甲酸(A)和0.1%甲酸-甲醇(B)作为流动相,梯度洗脱。质谱(ESI+)多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM),内标法定量。结果该方法在1~400 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数(r2)大于0.99。2种代谢物在0.5、1.0、5.0μg/kg的添加水平下,回收率为88.9%~109.2%,相对标准偏差值在2.18%~8.57%(n=6)。方法检出限为0.5μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,可用于动物肌肉组织中的喹乙醇及卡巴氧代谢物的快速检测。

高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中喹乙醇与卡巴氧残留量

建立了动物源食品猪肉、鸡肉和鱼肉中喹喔啉类兽药喹乙醇（OLQ）、卡巴氧（CBX）的高效液相色谱-串联质谱测定方法.样品经0.1 mol/L磷酸二氢钠（pH 6.0）溶液提取,Oasis HLB固相萃取柱净化,流动相定容后,采用Waters Xterra MS C18柱（5μm,150 mm×2.1mm）分离,以乙腈-0.2％甲酸为流动相进行梯度洗脱,以串联质谱在多反应监测（MRM）正离子模式下检测,基质外标法定量.结果表明,喹乙醇和卡巴氧在质量浓度为1～20 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.998 1 ～0.999 9;各基质在0.2、0.4、2.0μg/kg 3个加标水平下,喹乙醇和卡巴氧的回收率为70％～93％,相对标准偏差为1.9％～16.7％,定量下限（S/N≥10）均为0.2 μg/kg.应用建立的方法对猪肉、鸡肉、鱼肉样品各20个进行检测,并与国标方法进行比较,结果满意.该方法简单、灵敏、稳定,可满足猪肉、鸡肉和鱼肉中喹乙醇、卡巴氧残留的检测与确证需要.

液相色谱-串联质谱法测定水产品中喹乙醇和卡巴氧的代谢物残留量

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)测定水产品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(3-methyl-quinoxaline-2-carboxylic acid,MQCA)和卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸(quinoxaline-carboxylic acid,QCA)的残留量的分析方法。方法样品在0.2 mol/L Tris/HCL缓冲溶液作用下,47℃水浴振荡进行酶解,将与组织以结合态形式存在的MQCA和QCA转变为游离态,酶解液经盐酸酸化,乙酸乙酯提取,提取液吹干后加入20%甲醇水溶解,过PAX固相萃取柱净化,浓缩定容,采用ACQUITY UPLC HSS T_3色谱柱分离,以乙腈、0.1%甲酸溶液为流动相,多反应离子监测(multiplereaction reaction monitoring,MRM)模式测定,内标法定量。结果 MQCA和QCA在2.5~100 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^2)均大于0.99。在0.5、2.5和10μg/kg加标水平下(n=6),MQCA和QCA的平均回收率为75.6%~92.4%,相对标准偏差为3.81%~9.73%。MQCA和QCA的检出限均为0.25μg/kg,定量限均为0.5μg/kg。结论该方法灵敏、准确,重复性好,适用于水产品中MQCA和QCA残留量的同时测定。

液相色谱串联质谱法测定动物组织中卡巴氧和喹乙醇代谢物残留量

本文建立了猪肉中卡脱氧巴氧和喹乙醇代谢物的液质联用检测方法,样品经甲酸溶液消化,蛋白酶溶液酶解后经盐酸溶液酸化,用waters混合阴离子固相萃取柱净化处理。脱氧卡巴氧用二氯甲烷洗脱,喹乙醇代谢物用甲酸-乙酸乙酯溶液洗脱,收集液经氮气吹干后用甲酸-甲醇溶液定容,用液相色谱-串联质谱仪测定,内标法定量。结果显示:该方法 0~100μg/L范围内线性良好,3种残留的回收率在80%~110%,相对偏差在2.03%~4.94%。

阿斯匹林和卡巴氧有助于断奶猪生长并减轻其下痢

美国弗吉尼亚理工学院的研究人员发现,在断奶仔猪日粮中加入阿斯匹林可有效地减少仔猪下痢和改善仔猪的生长.研究人员还测定了添加阿斯匹林对断奶仔猪血液特性和消化器官的影响.