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卡氏棘阿米巴肌动蛋白1的免疫学特性和细胞黏附功能
1
作者
李晶
杨舒越
+3 位作者
赵佳欣
孔繁利
郭思瑶
冯宪敏
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期308-314,共7页
目的:探讨卡氏棘阿米巴(Ac)肌动蛋白1 (Actin 1)(Ac-Actin 1)的免疫学特性,初步阐明Ac-Actin 1介导Ac虫体黏附宿主细胞并参与Ac虫体入侵的作用。方法:以Ac滋养体cDNA为模板,构建原核表达载体pET 22b (+)-Ac-Actin 1,转化大肠埃希菌感受...
目的:探讨卡氏棘阿米巴(Ac)肌动蛋白1 (Actin 1)(Ac-Actin 1)的免疫学特性,初步阐明Ac-Actin 1介导Ac虫体黏附宿主细胞并参与Ac虫体入侵的作用。方法:以Ac滋养体cDNA为模板,构建原核表达载体pET 22b (+)-Ac-Actin 1,转化大肠埃希菌感受态细胞BL21 (DE3);1 mmol·L^(-1)异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)体外诱导表达重组Ac-Actin 1蛋白(rAc-Actin 1),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对rAc-Actin 1进行可溶性分析,通过亲和层析方法纯化带有His标签的rAc-Actin 1。3只新西兰白兔随机分为对照组(1只)和实验组(2只);实验组兔以rAc-Actin 1为免疫原皮下注射400μg,对照组兔注入等量生理盐水,制备抗rAc-Actin 1多克隆兔血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体效价并测定IgG亚型,Western blotting法检测抗rAc-Actin 1多克隆兔血清与rAc-Actin 1的免疫反应性,间接免疫荧光实验(IFA)检测Ac-Actin 1在Ac滋养体中的定位。以正常滋养体为对照,抗rAc-Actin 1多克隆兔血清阻断Ac滋养体后与Vero细胞共孵育,显微镜观察Ac-Actin 1对Vero细胞的黏附作用。结果:SDSPAGE和BCA蛋白浓度检测,获得高浓度rAc-Actin 1 (1.7 g·L^(-1))蛋白。ELISA法检测,制备的兔抗rAc-Actin1特异性多克隆抗体效价为1∶6 400, IgG1和IgG2a浓度分别为116.76 g·L^(-1)和1 136.15 mg·L^(-1)。Western blotting法检测,兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体可与rAc-Actin 1发生特异性结合,具有良好的免疫反应性。IFA检测,rAc-Actin 1主要定位于Ac滋养体的细胞膜上。显微镜观察,与对照组比较,随着抗体与虫体孵育时间的延长,实验组Ac滋养体对Vero细胞的黏附率明显降低(P<0.01),抗rAc-Actin 1特异性多克隆抗体可有效阻断Ac滋养体与Vero细胞的黏附。结论:rAc-Actin 1具有良好的免疫原性和免疫反应性,参与Ac虫体与宿主细胞的黏附作用。
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关键词
卡氏棘阿米巴
滋养体
细胞黏附
免疫原性
免疫反应性
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职称材料
卡氏棘阿米巴线粒体tRNA编辑
2
作者
Lonergan KM
余新炳
《国外医学(寄生虫病分册)》
北大核心
1994年第4期159-160,共2页
以前所了解的RNA编辑系统主要作用于mRNA,其顺序改变引起密码成份的改变。本文描述了作用于tRNA的一种编辑系统。在卡氏棘阿米巴(Acanthamoeba castellanii)线粒体中含有的tRNA的顺序与其编码基因顺序不同,这种变化是单个核苷酸的差异(A...
以前所了解的RNA编辑系统主要作用于mRNA,其顺序改变引起密码成份的改变。本文描述了作用于tRNA的一种编辑系统。在卡氏棘阿米巴(Acanthamoeba castellanii)线粒体中含有的tRNA的顺序与其编码基因顺序不同,这种变化是单个核苷酸的差异(A→G,U→A,和U→G的改变),在转录后,发生在它的受体螺旋上(he acceptor stem),这种改变有纠正错配碱基对的作用,使该螺旋区减基对还原为正常状态。
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关键词
卡氏棘阿米巴
线粒体
RNA编辑
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职称材料
题名
卡氏棘阿米巴肌动蛋白1的免疫学特性和细胞黏附功能
1
作者
李晶
杨舒越
赵佳欣
孔繁利
郭思瑶
冯宪敏
机构
北华大学基础医学院病理生理教研室
吉林医药学院基础医学院病原生物学教研室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期308-314,共7页
基金
吉林省科技厅自然科学基金项目(20220101307JC)
吉林省卫健委卫生与健康技术重点创新项目(2020J012)
吉林省教育厅科学技术重点研究项目(JJKH20210053KJ)。
文摘
目的:探讨卡氏棘阿米巴(Ac)肌动蛋白1 (Actin 1)(Ac-Actin 1)的免疫学特性,初步阐明Ac-Actin 1介导Ac虫体黏附宿主细胞并参与Ac虫体入侵的作用。方法:以Ac滋养体cDNA为模板,构建原核表达载体pET 22b (+)-Ac-Actin 1,转化大肠埃希菌感受态细胞BL21 (DE3);1 mmol·L^(-1)异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)体外诱导表达重组Ac-Actin 1蛋白(rAc-Actin 1),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对rAc-Actin 1进行可溶性分析,通过亲和层析方法纯化带有His标签的rAc-Actin 1。3只新西兰白兔随机分为对照组(1只)和实验组(2只);实验组兔以rAc-Actin 1为免疫原皮下注射400μg,对照组兔注入等量生理盐水,制备抗rAc-Actin 1多克隆兔血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体效价并测定IgG亚型,Western blotting法检测抗rAc-Actin 1多克隆兔血清与rAc-Actin 1的免疫反应性,间接免疫荧光实验(IFA)检测Ac-Actin 1在Ac滋养体中的定位。以正常滋养体为对照,抗rAc-Actin 1多克隆兔血清阻断Ac滋养体后与Vero细胞共孵育,显微镜观察Ac-Actin 1对Vero细胞的黏附作用。结果:SDSPAGE和BCA蛋白浓度检测,获得高浓度rAc-Actin 1 (1.7 g·L^(-1))蛋白。ELISA法检测,制备的兔抗rAc-Actin1特异性多克隆抗体效价为1∶6 400, IgG1和IgG2a浓度分别为116.76 g·L^(-1)和1 136.15 mg·L^(-1)。Western blotting法检测,兔抗rAc-Actin 1多克隆抗体可与rAc-Actin 1发生特异性结合,具有良好的免疫反应性。IFA检测,rAc-Actin 1主要定位于Ac滋养体的细胞膜上。显微镜观察,与对照组比较,随着抗体与虫体孵育时间的延长,实验组Ac滋养体对Vero细胞的黏附率明显降低(P<0.01),抗rAc-Actin 1特异性多克隆抗体可有效阻断Ac滋养体与Vero细胞的黏附。结论:rAc-Actin 1具有良好的免疫原性和免疫反应性,参与Ac虫体与宿主细胞的黏附作用。
关键词
卡氏棘阿米巴
滋养体
细胞黏附
免疫原性
免疫反应性
Keywords
Acanthamoeba castellanii
Trophozoite
Cell adhesion
Immunogenicity
Immunoreactivity
分类号
R382.1 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
卡氏棘阿米巴线粒体tRNA编辑
2
作者
Lonergan KM
余新炳
出处
《国外医学(寄生虫病分册)》
北大核心
1994年第4期159-160,共2页
文摘
以前所了解的RNA编辑系统主要作用于mRNA,其顺序改变引起密码成份的改变。本文描述了作用于tRNA的一种编辑系统。在卡氏棘阿米巴(Acanthamoeba castellanii)线粒体中含有的tRNA的顺序与其编码基因顺序不同,这种变化是单个核苷酸的差异(A→G,U→A,和U→G的改变),在转录后,发生在它的受体螺旋上(he acceptor stem),这种改变有纠正错配碱基对的作用,使该螺旋区减基对还原为正常状态。
关键词
卡氏棘阿米巴
线粒体
RNA编辑
分类号
R382.1 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
卡氏棘阿米巴肌动蛋白1的免疫学特性和细胞黏附功能
李晶
杨舒越
赵佳欣
孔繁利
郭思瑶
冯宪敏
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
卡氏棘阿米巴线粒体tRNA编辑
Lonergan KM
余新炳
《国外医学(寄生虫病分册)》
北大核心
1994
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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