Cbl- b通过HOXA10调控miR-99a和miR-125b参与CD4^+T细胞活化的机制研究

目的:探讨卡西塔斯B细胞淋巴瘤谱系b(Cbl-b)调控CD4^+T细胞活化的机制。方法:用CCK8试剂盒检测过表达微小RNA(miR)-99a和miR-125b的小鼠淋巴瘤细胞(EL4)细胞增殖活性。取抗CD3和抗CD28抗体活化野生型(WT)和Cbl-b缺失型(Cbl^-b-/-)CD4^+T细胞,激光共聚焦观察WT和Cbl^-b-/-CD4^+T细胞中同源异型盒蛋白A10(HOXA10)的入核情况。用双荧光素酶报告系统检测HOXA10对miR-99a和miR-125b的表达调控作用。用蛋白质印迹法和双荧光素酶报告系统检测miR-99a和miR-125b对靶基因的表达水平影响。结果:在Cbl^-b-/-CD4^+T细胞中,HOXA10在抗CD3抗体单独刺激时即可入核。HOXA10入核后促进miR-99a和miR-125b表达,而过表达miR-99a和miR-125b则抑制蛋白激酶B2和3(AKT2、AKT3)、磷酸肌醇-3-激酶催化亚基A和D(PIK3CA、PIK3CD)的表达。结论:Cbl-b通过阻止HOXA10核转位来抑制miR-99a和miR-125b表达,导致AKT2、AKT3、PIK3CA、PIK3CD(AKT/PI3K)表达增加,最终抑制CD4^+T细胞活化。

乳腺癌中Casitas B细胞淋巴瘤谱系B、受体酪氨酸激酶、整合素β2的表达及其与MRI特征的相关性研究

目的本研究旨在通过探究乳腺癌磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)特征与Casitas B细胞淋巴瘤谱系B(B cell tymphoma B,CBL-B)、受体酪氨酸激酶(recombinant AXL receptor tyrosine kinase,AXL)、整合素β2(integrin beta 2,ITGB2)表达间的相关性,以期为乳腺癌的早期诊断、治疗方案的制订及术前无创评估乳腺癌预后提供影像学新思路。方法选择2017年9月至2020年9月于临沂市中心医院就诊并行手术治疗的204例乳腺癌女性患者作为研究对象,采用飞利浦全数字Ingenia3.0 T MRI进行扫描。记录肿瘤直径、形状、边缘、强化方式、时间-信号强度曲线(time-signal intensity curve,TIC)曲线类型、早期强化率和ADC值。采用免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织和癌旁组织中的CBL-B、AXL、ITGB2表达水平。结果乳腺癌组织中CBL-B低表达、AXL高表达和ITGB2高表达者所占比例显著高于癌旁组织(χ^(2)=19.663、12.711、10.180,P均<0.05)。单因素分析结果显示,MRI特征中的肿瘤直径、形状、早期强化率、ADC值与乳腺癌CBL-B蛋白表达有关(χ^(2)=8.904、7.184、9.330,8.706,P均<0.05);MRI特征中的肿瘤直径、形状和TIC分型与乳腺癌AXL蛋白表达有关(χ^(2)=11.397、21.951、12.718,P均<0.05);MRI特征中的肿瘤直径、TIC分型、早期强化率和ADC值与ITGB2蛋白表达有关(χ^(2)=8.703、10.271、4.193、4.490,P均<0.05)。二元Logistic回归分析结果显示,肿瘤直径≥3 cm和早期强化率≥100%是乳腺癌CBL-B低表达的独立危险因素(P均<0.05);肿瘤直径≥3 cm、形状不规则或毛刺是AXL高表达的独立危险因素(P均<0.05);肿瘤直径≥3 cm、早期强化率≥100%、ADC值≥1.12×10^(-3) mm^(2)/s是乳腺癌ITGB2高表达的独立危险因素(P均<0.05)。结论乳腺癌MRI特征有助于预测CBL-B、AXL、ITGB2的表达,从而为疾病的临床诊治和预后评估提供参考依据。