宋代昆山卫氏家族研究

卫氏自唐末由齐地迁入华亭,后再转迁至昆山,家世业儒,族人在科考、仕宦、文学等方面取得了一定的成就,是当时有名的望族。以《卫氏续修宗谱》作为主要参考对象,并对照墓志铭及宋人文集、地方志,详细考察卫氏家族在昆山的形成、发展、繁盛、凋敝的过程。从卫氏的发展来看,其早年就有了一定的积累,后来又致力于读书和科举,为官后在朝中扬名,而在地方社会中,又通过联姻和参加当地的公益事业来稳固其在当地的地位。对卫氏的研究为南宋昆山及苏州的士人家族研究聊备一例。

从“四世家风不坠”看河东卫氏的书学教育

河东卫氏在魏晋门阀混战的时期竟有四世书名,对“四世家风不坠”书法史现象进行重读,旨在发掘卫氏书学中存在的家族观念。“四世家风不坠”是对河东卫氏一种家族式的集体性评价。卫氏书名与家学教育模式中书法风格的稳定传递密切相关,家学教育模式有着对于自家面貌不断强化的内在要求,使得河东卫氏的书学声望绵延百年。在家学的传递模式中,卫夫人亦是被家学笼罩的受益人,也成为传递家学的重要力量。

文物建筑原状不详部位修缮设计研究——以卫氏宗祠为例

如何对文物建筑中已损毁且原状不详的部位进行修缮,是许多文物建筑保护工程设计的困惑,文章以严重损毁的卫氏宗祠为例研究此问题。首先介绍了该宗祠修缮前的损毁基本状况,列出已损毁且原状不详部位的清单;然后分析了对这些部位进行修缮的必要性与可行性;最后研究了对这些部位进行修缮的原状依据,讨论了其中无原状依据部位的修缮设计方法,对此类修缮设计具有较强的参考价值。

卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库的单抗筛选

目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。其中 3个克隆测定其DNA序列 ,用BLAST软件对所得DNA序列进行同源性比较。结果 得到 1,2 ,4三个不同阳性克隆 ,其长度分别为 1783bp、397bp和 1132bp ,分别与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白 (P wyolkferritin)基因、鞘脂激活蛋白A(DictyosterliumdiscoideumsaposinA)基因和曼氏血吸虫主要卵抗原 (Smmajoreggantigen -P4 0 )基因同源。 结论 本研究首次报道用抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库 ,所获克隆1、2。

三氯苯达唑对卫氏并殖吸虫体壁及卵黄细胞超微结构的影响

目的： 观察三氯苯达唑在体内外杀灭卫氏并殖吸虫后， 虫体体壁及卵黄细胞超微结构的变化。方法：将被药物在体内、外杀死的虫体及对照组正常虫体， 按常规方法制成电镜样品， 用扫描和透射电镜观察。结果： 在药物作用下， 体壁的外质膜及基质层裂解消失， 肌肉层有不同程度的坏死， 皮层细胞膜及卵黄细胞膜破坏消失，核膜部份破坏， 核内异染色质凝固、聚边、直至溶解。胞质内的高尔基体消失， 内质网扩张， 线粒体肿胀变性、直至溶解，但对糖原颗粒无明显影响。对体内虫体的破坏比体外严重。结论： 三氯苯达唑对卫氏并殖吸虫的体壁及卵黄细胞均有明显的破坏作用， 主要破坏细胞核、细胞的膜质结构以及微管系统， 并可使虫体皮层裂解消失。

卫氏肺吸虫重组抗原的制备及初步应用研究

目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液相层析纯化,比较前后两法的纯化效果。初步纯化产物经氧化/还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原)。用该重组抗原,以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体,并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较。结果经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高,快速液相层析进一步纯化效果不明显。以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清,敏感性为91.07%,与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应;粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100%,但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为血吸虫病11.43%,肝吸虫病4.84%,囊虫病3.22%,包虫病5.88%,正常人为2.5%。结论研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高。

江西省卫氏并殖吸虫病流行病学调查

目的 探讨江西省卫氏并殖吸虫病流行状况及其变化的原因。 方法 选择江西省靖安县、万载县 2个林场和玉山县 1个镇进行流行病学调查和回顾性分析 ,调查卫氏并殖吸虫病中间宿主放逸短沟蜷 (Semisulcospiralibertina)与华溪蟹 (Sinopotamonspp .)、保虫宿主 (猫、犬、果子狸、野猫等 )感染率 ,以及流行区生态环境变化和人群个体行为变化。 结果 卫氏并殖吸虫病流行区中间宿主放逸短沟蜷与华溪蟹平均感染率分别为 0 2 1%和5 4 3 % ,保虫宿主平均感染率为 5 6%。与 2 0年前比较 ,华溪蟹感染率明显下降。 结论 江西省原流行区仍有卫氏并殖吸虫病流行 ,生态环境改变可能导致华溪蟹的感染率下降。

三氯苯达唑治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的实验观察

目的 :观察三氯苯达唑治疗家犬卫氏并殖吸虫病的疗效。方法 :腹腔内注射感染囊蚴10 0个 /犬 ,共 6只。感染后 170 d,治疗组 3犬口服三氯苯达唑 10 0 mg/ kg· d× 2 d。治后逐日粪检以 Stoll法计数虫卵。治后 38d解剖观察犬肺部虫囊和虫体情况 ,并作病理切片检查。结果 :感染后60 d6只犬粪便中均发现卫氏并殖吸虫虫卵。治疗后 7— 14d,治疗组犬粪便中并殖吸虫卵阴转。对照组犬双肺虫囊数分别为 18、2 4和 2 4个 ,检获并殖吸虫成虫分别为 38、51和 4 2个 ;治疗组犬双肺虫囊数分别为 10、7和 4个 ,仅在 1犬中发现 2条较小的成虫 ,其余 2犬未检获并殖吸虫 ,减虫率平均为 98.5%。结论 :三氯苯达唑对卫氏并殖吸虫有良好杀虫作用。

二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫同工酶谱的发育变异及其分类学意义

采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳（ｖｅｒｔｉｃａｌＰＡＧＥ）法分析比较了二倍体（２ｎ）型与三倍体（３ｎ）型卫氏并殖吸虫童虫、成虫的醛缩酶（ＡＬＤ）、已糖激酶（ＨＫ）和葡萄糖６磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）的同工酶谱，结果显示２ｎ型与３ｎ型卫氏并殖吸虫在不同发育期之间及两型吸虫相应各发育期之间ＡＬＤ、ＨＫ及Ｇ６ＰＤ同工酶谱均显示变异，变异表现为两种方式，一种是在同一个基因座位区的同工酶的酶带数目、迁移位置及活性发生变异；另一种是两型吸虫在有的发育期整个基因座位区无酶带显示。两型吸虫发育同工酶谱的差异反映了两型吸虫在发育进程中编码同工酶的基因遗传背景的差异。这一结果支持了两型卫氏并殖吸虫可为两个独立虫种的观点。

卫氏并殖吸虫基因片段的克隆与鉴定

目的 从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载体pRESETB,并转化大肠杆菌BL-21细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。结果 所筛选的阳性克隆插入片段约800bp。DNA序列分析显示其为编码半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L的基因序列。Pw-2重组子特异性表达产物约为32kDa,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异地识别。结论 从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库筛选的重组质粒Pw-2编码属于半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L。

卫氏并殖吸虫染色体制备方法的改进

目的 改进卫氏并殖吸虫染色体的制备方法 ,以利于并殖吸虫染色体核型的分析。 方法 将浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫成虫通过秋水仙胺作用后分离睾丸 ,所用试剂均进行预温 ,通过低渗、固定、制片和染色等处理。 结果 浙江永嘉地区卫氏并殖吸虫染色体采用改进后的制备方法 ,效果好。该虫染色体数 2n =2 2 ,核型公式 :2m +6sm +1 4t。 结论 改进后的染色体制备方法操作简便 ,染色体清晰 ,可读性好 ,便于进行核型分析。

卫氏并殖吸虫童虫神经系统结构的胆碱酯酶组织化学定位

乙酰胆碱酯酶(AChE)的组织化学定位,被广泛用于显示动物神经组织中胆碱能神经细胞的存在。现已证明,多种蠕虫神经组织存在 AChE 活性。关于卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)神经系统结构的较完整资料尚未见报道。为此,我们用 AChE 整体组织化学定位的方法,对卫氏并殖吸虫童虫神经系统结构进行了研究,报告如下。

二倍体型与三倍体型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原的观察

用间接免疫荧光抗体法,对鼠体内两种类型卫氏并殖吸虫虫体抗原与宿主抗原做了检测。结果显示两类型童虫与感染同源卫氏并殖吸虫小鼠血清反应后,虫体抗原存在于体表皮层、肠管上皮细胞上;两类型童虫与兔抗鼠红细胞抗体血清反应后,主要在表皮层看到宿主抗原,荧光强度比虫体抗原所示为弱;三倍体型童虫的宿主抗原荧光反应有52.6～60％呈(++),而二倍体型大部只是(+)反应;这种荧光强度的差别在非免疫状态所获的童虫切片上也被看到。

卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的筛选和免疫反应性分析

目的 初步探讨卫氏并殖吸虫抗原模拟表位的免疫反应性。方法 应用卫氏并殖吸虫病患者血清免疫粗球蛋白(Pw-Ig)筛选噬菌体随机12肽库,对筛选到的抗原模拟表位用ELISA检测其免疫反应性,并与卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwA)进行比较。结果 获得的6个卫氏并殖吸虫抗原模拟表位(即P5、P6、P7、P8、P13、P16)特异性和敏感性与PwA相比差异均无显著性(P>0.05),其中P5、P6和P7交叉反应性明显较PwA低(x2=4.630,P<0.05),其余则与PwA无明显差异(P>0.05)。结论 卫氏并殖吸虫抗原模拟表位对卫氏并殖吸虫病的诊断具有潜在的应用价值,有望代替天然抗原用于卫氏并殖吸虫病的诊断。

卫氏肺吸虫成虫cDNA文库的多抗筛选

目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。选取插入片段不同的两个克隆测定其 DNA序列 ,用 BL AST软件对所得 DNA序列进行同源性比较。结果 :得到 P.w- 2 ,P.w- 4两个阳性克隆 ,长度分别为 80 1bp和 10 5 3 bp,分别与卫氏肺吸虫原组织蛋白酶 L和卫氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶基因同源 ,同源程度分别为 99%、86%。结论 :用卫氏肺吸虫成虫多抗筛选成虫 c DNA文库 ,所获 P.w- 2和 P.w-

卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究

目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Westernblotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中。其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。

卫氏并殖吸虫感染循环抗原检测方法的建立与应用

用CAg-dot-ELISA法和CAb-ELISA法分别对并殖吸虫病临床诊断患者、并殖吸虫病流行区人群、卫氏并殖吸虫早期感染者及其他寄生虫感染者进行循环抗原和抗体检测。用CAg-dot-ELISA检测70份卫氏并殖吸虫病临床诊断患者血清,阳性29份,敏感性为41.5%(29/70),与华支睾吸虫病和日本血吸虫病患者血清分别有25%(5/20)和20%(4/20)的交叉反应,与其他寄生虫感染者血清和健康人血清(60份)均为阴性,特异性为93.6%。CAb-ELISA检测70例卫氏并殖吸虫病临床诊断患者血清阳性67份,敏感性为95.7%(67/70),与华支睾吸虫病和日本血吸虫病患者血清分别有25%(5/20)和20%(4/20)的交叉反应,对其他寄生虫感染者血清和健康人血清的特异性为92.1%。CAg-dot-ELISA和CAb-ELISA分别检测并殖吸虫病流行区人群220份血清,阳性率分别为0和3.2%(7/220)。CAg-dot-ELISA法对辅助诊断并殖吸虫早期感染有一定价值。

六地卫氏并殖吸虫及斯氏狸殖吸虫种间和种内虫体重复DNA序列的比较

从湖南、广东两省六地采集卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫,分别制备各地虫体基因组DNA,用 BamHI、HaeⅢ及 HindⅢ 3种限制性内切酶消化,琼酯糖凝胶电泳后,比较酶切片段长度。结果显示两种虫种间重复 DNA序列带型有明显的差异,而同种虫种不同地区虫体的重复 DNA序列带型则多数相同或完全相同。