均匀设计在印楝粗提物提取工艺研究中的应用

用均匀设计试验方法研究印楝粗提物的提取。选择石油醚Ⅰ萃取的用量和时间、甲醇萃取的用量和时间、乙酸乙酯萃取的用量和时间作为主要影响因子,以乙酸乙酯粗提物质量作为试验检测指标,通过国际通用统计软件SAS对试验结果进行分析,得出最佳提取工艺:石油醚Ⅰ萃取的用量80mL、时间348min,甲醇萃取的用量360mL、时间720min,乙酸乙酯萃取的用量110mL、时间20min。在此工艺条件下,20g印楝种仁得到印楝粗提物产品1.6041g,产品提取率为8.02%。

印楝种子粗提物诱导烟草炭疽病抗性的生理效应

【目的】研究印楝诱抗烟草炭疽病的机理,为烟草炭疽病的生物防治提供理论依据。【方法】测定根施印楝种子粉末对烟草炭疽病的防效,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测印楝种子粉末处理后烟草的NTF6、NtLox、NtSGT1、NtPAL、NtPDF、NPR1、NtRar1和PR1a等8个相关抗病基因的表达变化;对比叶面喷施不同印楝种子提取物(甲醇、乙酸乙酯和石油醚)溶液对烟草抗氧化酶活性的影响,并测定叶面喷施印楝种子甲醇提取物不同分离流分处理的烟叶总酚含量及抗炭疽病效果。【结果】根施印楝种子粉末可使烟草炭疽病的病情指数(26.67%)较对照(74.17%)显著降低(P<0.05,下同)。qRT-PCR检测结果表明,NPR1、NtRar1、NtSGT1和PR1a等4个抗病基因的相对表达量与印楝诱导烟草抗炭疽病相关。印楝种子甲醇提取物对烟草抗氧化酶活性的影响最大,其丙酮流分段在处理后6和96 h诱导烟草的总酚含量较对照明显提高,分别为对照的2.52和3.34倍,且其诱导烟草抗炭疽病的能力最强,病情指数(25.00%)显著低于对照(69.17%)。【结论】印楝种子提取物通过诱导提高PPO和POD抗病相关酶活性及诱导NPR1、NtRar1、NtSGT1和PR1a等抗病相关基因的表达产生抗炭疽病作用,且诱导活性成分主要存在于甲醇提取物的丙酮流分,其可作为烟草炭疽病的诱抗剂推广应用于烟草生产。