抗体-免疫印迹方法检测肝癌甲胎蛋白异质体

目的:建立一种随访肝硬化患者早期发现肝细胞癌（HCC）的方法。方法:用生物素抗体亲和印迹方法检测慢性肝病患者血清甲胎蛋白异质体AFP-L3和AFP-P4+P5。结果:HCC患者AFP-L3和AFP-P4+P5水平分别为（49.57±18.09）％和（43.96±14.03）％,明显高于慢性肝病患者的（4.98±5.53）％和（10.0±11.0）％。其诊断肝癌敏感性分别为96.55％和93.75％,特异性为100％和88.24％。结论:该方法敏感性高,特异性强,更方便临床随访高发人群,早期发现HCC。

分子印迹聚合物微球合成方法研究进展

对近年来发展起来的分子印迹聚合物微球(MIPMs)合成方法的研究进展进行了综述。重点介绍了表面分子印迹聚合物合成法、核-壳型分子印迹聚合物合成法、基于β-环糊精分子印迹聚合物的合成法3种新型MIPMs制备方法。阐述了常用的沉淀聚合法、种子溶胀聚合法、悬浮聚合法合成MIPMs的发展现状。最后对MIPMs的发展趋势提出了展望。

用免疫印迹方法检测血清中抗幽门螺杆菌抗体IgG

上海市消化疾病研究所的潘志军等,为提高血清学方法诊断幽门螺杆菌(H_p)感染的敏感性和特异性,建立了检测人血清中抗H_p抗体IgG的免疫印迹方法。 对因消化道症状而行胃镜检查的连续137例患者采集活检粘膜进行H_p培养、涂片和尿素酶试验,同时收集其静脉血。

离子印迹材料的发展及在识别吸附重金属中的应用

金属离子的识别和选择性研究仍是当前水体金属离子污染分析中一大挑战。离子印迹材料具有制备简单、结构稳定、识别性强、吸附速率快、吸附容量大和易回收等特点,在离子分离、富集和传感识别等领域受到广泛的关注。在过去的研究中,有两方面重点内容始终贯穿离子印迹材料的发展历程。一是印迹材料的制备过程的优化,二是识别性能以及识别机理的研究。本文按照时间轴的顺序对离子印迹材料的发展进行综述,并重点归纳了制备过程和识别机理的研究进展。另外对现阶段离子印迹材料在识别吸附重金属中的应用进行了总结和展望。

通过血清蛋白组学和质谱分析的方法证实:新的白癜风抗原VIT75是黑素细胞核纤层蛋白

VIT75是一个新发现的白癜风自身抗原，是分子量为75kDa的表皮黑素细胞膜蛋白，但目前抗原的性质尚未证实，与白癜风的关联性尚不清楚。为证实VIT75的蛋白性质，本研究采用血清蛋白组学和免疫印迹方法，发现了三个差异显示的蛋白，分子量分别为75，60，45kDa，

氧化低密度脂蛋白对内皮细胞L-精氨酸-NO系统的影响及其机制

目的 探讨氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)对内皮L 精氨酸 NO系统的影响及其机制。方法 生化分析方法测定孵育液中亚硝酸盐含量及一氧化氮合酶活性 ,用Western印迹方法测定内皮一氧化氮合酶 (eNOS)的蛋白表达。结果 不同浓度的ox LDL呈剂量依赖性地降低eNOS的蛋白表达 ,抑制NOS活性及内皮产生的NO量 (11.4 4± 1.4 3vs 8.18± 1.0 ,6 .4 5± 0 .99,5 .83± 0 .95 ,P <0 .0 5 ) ,(1.94± 0 .12vs 1.73± 0 .14 ,1.5 7± 0 .11,1.4 6± 0 .12 ,P <0 .0 5 ) ,预先加入血凝素样氧化低密度脂蛋白受体 (LOX1)抑制剂阻断了ox LDL的上述作用。结论 ox LDL损伤内皮细胞 ,导致内皮L 精氨酸 NO系统的改变 ,LOX1介导了ox

屋尘螨变应原制剂质量标准的研究

目的对屋尘螨变应原制剂质量标准进行修订研究。方法除原注册标准的检测项目外,增加了以ImmunoCAP方法检测氢氧化铝吸附的螨变应原注射液制品的总生物学活性和游离过敏原生物活性测定,以Western-Blot法对其主要成分进行检测。结果10批制品的总特异性IgE测定的均值为20.58kUa·L-1,总过敏原对血清库抑制率均值为67.70%,批间变异系数为1.48%;游离特异性IgE测定的均值为58.24kUa·L-1,游离过敏原对血清库抑制率均值为9.0%,批间变异系数为35.49%。Western Blot结果显示各批制品均与内参有相同的图谱,并在25kD、14kD具有明显的条带。结论新增的的质控方法和质量标准可用于螨变应原注射液产品的常规检定,可以作为考察制品批间一致性的指标。

葡萄糖对血管内皮细胞小凹蛋白1和血管内皮生长因子表达的影响

为了探讨高浓度葡萄糖损伤血管内皮细胞及其对小凹蛋白 1和血管内皮生长因子表达的影响。将人脐静脉内皮细胞株ECV30 4分别培养在对照组和含 5 .5mmol/L、11.1mmol/L、2 2 .0mmol/L、33.0mmol/L葡萄糖的培养基中。经葡萄糖培养 2 4h后 ,噻唑蓝法测定细胞增殖活性 ,硝酸还原酶法测定培养上清液中一氧化氮浓度 ,免疫组织化学和免疫印迹方法检测细胞中小凹蛋白 1和血管内皮生长因子的表达。结果发现 ,随着葡萄糖浓度的增加 ,内皮细胞增殖活性呈浓度依赖性抑制 (r = 0 .776 ,P =0 .0 0 0 ) ;一氧化氮浓度呈浓度依赖性增加 (r=0 .6 98,P =0 .0 0 0 ) ;小凹蛋白 1和血管内皮生长因子为棕黄色颗粒 ,主要分布于胞浆中 ;血管内皮生长因子的表达呈浓度依赖性增加 (r =0 .6 4 5 ,P =0 .0 0 9) ;小凹蛋白 1的表达也呈浓度依赖性增加 (r=0 .80 8,P =0 .0 0 0 )。提示高糖可诱导血管内皮细胞的血管内皮生长因子和小凹蛋白 1的表达 ,此变化可能与糖尿病患者高糖致血管病变有关。

基质分解素1在实验性肝纤维化过程中的酶原表达变化

研究实验性肝纤维化过程中基质分解素 - 1(MMP - 3)酶原蛋白表达的动态变化。建立四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化模型 ,采用半定量Western免疫印迹方法 ,对肝纤维化不同阶段肝内MMP - 3的酶原蛋白的表达水平进行了检测。在正常大鼠肝组织中有MMP - 3的酶原表达。在肝纤维化发生发展过程中MMP - 3酶原蛋白表达水平逐渐增强 ,至肝纤维化中期到达最高峰 ,到肝纤维化晚期及肝硬化阶段其表达较中期下降 ,但仍高于正常对照水平。MMP - 3在肝纤维化的发生。

改进兔抗BCG血清的特异性以检测TB抗原

本研究以免疫印迹方法证实兔抗BCG与其它细菌抗原(金葡菌、表葡菌,克雷伯氏菌、大肠杆菌)的交叉反应,并以亲和吸附方法将金葡菌交叉反应抗体从市售抗BCG中加以去除。这样在检测脑脊液及其它样本中TB抗原时的假阳性率就可以降低,兔抗BCG的特异性将会增加。我们建立了竞争抑制的ELlSA方法,可以检测ng水平的分枝杆菌的抗原,

227例外源性哮喘过敏原检测结果分析

研究哮喘患者血清特异性IgE变化,了解哮喘患者过敏原分布,为其防治提供科学依据。敏筛过敏原检测系统采用免疫印迹方法,定量检测血清中过敏原特异性IgE抗体。

TGF-β1和CD_(31)在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨TGF-β1与CD31在甲状腺乳头状癌的表达及临床意义。方法分别应用免疫组织化学方法和Western-Blot法检测TGF-β1、CD31在甲状腺乳头状癌及癌旁正常组织中的表达变化。结果 TGF-β1甲状腺乳头状癌组织主要分布于胞浆和胞外基质中,在胞浆中表达明显降低,而在基质中表达升高;而CD31在肿瘤组织周围间质的血管内皮表达均较强;且与正常组织相比,TGF-β1与CD31蛋白表达均明显升高。结论 TGF-β1在细胞外基质的高表达,及CD31的过表达提示二者均与肿瘤的侵袭、转移有关,可能在甲状腺乳头状癌的临床诊治中具有重要意义。

蛋白表面分子印迹技术

蛋白印迹材料在生物分离、生物传感和医用生物材料等领域具有很强的应用价值并受到广泛关注。尽管小分子印迹技术已经成功应用于很多领域,但蛋白分子印迹仍然是挑战性研究课题。本文总结了蛋白表面印迹技术领域的研究进展,根据不同的蛋白表面印迹材料,详细叙述了蛋白表面分子印迹薄膜、核壳微球、纳米线、凝胶微粒、单层膜等印迹材料的制备过程、印迹方法和选择识别性能,讨论了蛋白表面分子印迹方法的优缺点,阐明了蛋白分子印迹未来发展的方向。

分子印迹聚合物的制备研究进展

分子印迹聚合物(MIP)是一种能特异性识别模板分子的聚合物,它具有选择性高、稳定性良好、使用寿命长、应用广泛等优点,MIP已经成为化学、材料等学科研究的热点。本文分类对MIP的制备方法进行了全面的综述,分析比较了各类合成制备方法的优缺点,并对不同方法的研究现状进行详细论述。同时,阐述了智能MIP的前沿进展,通过分析pH敏感性、光智能性和温敏性MIP等典型智能MIP的研究现状以及功能领域应用,较为全面地归纳总结智能MIP的制备合成特征,并基于文献基础展望智能MIP的未来的研究方向。