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弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备
1
作者
白宇
李培德
+4 位作者
胡景炎
何杰
陈欢利
吴春琴
金俊杰
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2016年第3期60-65,共6页
为研究制备弓形虫卵囊壁蛋白和特异性单克隆抗体,以弓形虫弱毒株ME49株DNA为模板,应用PCR技术扩增卵囊壁蛋白OWP1基因,将其克隆至原核表达载体构建重组表达质粒p ET-28a-OWP1,经过IPTG诱导表达和His纯化树脂纯化重组蛋白His-OWP1。重组...
为研究制备弓形虫卵囊壁蛋白和特异性单克隆抗体,以弓形虫弱毒株ME49株DNA为模板,应用PCR技术扩增卵囊壁蛋白OWP1基因,将其克隆至原核表达载体构建重组表达质粒p ET-28a-OWP1,经过IPTG诱导表达和His纯化树脂纯化重组蛋白His-OWP1。重组蛋白His-OWP1作为免疫原,免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,重组蛋白GST-OWP1作为检测筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的单克隆抗体。结果表明,获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(4A2和2C10)。Western blot结果表明研究制备的单克隆抗体能够识别重组表达蛋白。制备获得的2株稳定性好、效价高的单克隆抗体,可为今后研究特异敏感的弓形虫病血清学检测方法提供材料。
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关键词
弓形虫
卵囊壁蛋白1
重组表达
单克隆抗体
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职称材料
题名
弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备
1
作者
白宇
李培德
胡景炎
何杰
陈欢利
吴春琴
金俊杰
机构
温州科技职业学院
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2016年第3期60-65,共6页
基金
温州市公益性技术研究项目(N20150027)
浙江省公益性技术研究农业项目(2014C32046)
文摘
为研究制备弓形虫卵囊壁蛋白和特异性单克隆抗体,以弓形虫弱毒株ME49株DNA为模板,应用PCR技术扩增卵囊壁蛋白OWP1基因,将其克隆至原核表达载体构建重组表达质粒p ET-28a-OWP1,经过IPTG诱导表达和His纯化树脂纯化重组蛋白His-OWP1。重组蛋白His-OWP1作为免疫原,免疫7周龄雌性BALB/c小鼠,重组蛋白GST-OWP1作为检测筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的单克隆抗体。结果表明,获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(4A2和2C10)。Western blot结果表明研究制备的单克隆抗体能够识别重组表达蛋白。制备获得的2株稳定性好、效价高的单克隆抗体,可为今后研究特异敏感的弓形虫病血清学检测方法提供材料。
关键词
弓形虫
卵囊壁蛋白1
重组表达
单克隆抗体
Keywords
Toxoplasma gondii
ocyst wall protein
1
(owp
1
)
recombinant expression
monoclonal antibody
分类号
S852.723 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫卵囊壁蛋白OWP1的重组表达和特异性单克隆抗体制备
白宇
李培德
胡景炎
何杰
陈欢利
吴春琴
金俊杰
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2016
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