MACT联合IDS治疗晚期卵巢上皮细胞癌的预后获益及影响因素分析

目的探讨新辅助化疗(Neoadjuvant Chemotherapy,NACT)联合间歇性肿瘤细胞灭减术(Interval Debulking Surgery,IDS)对晚期卵巢上皮细胞癌患者预后获益以及相关影响因素。方法回顾性分析2015年1月至2019年1月于我院行初次肿瘤细胞减灭术(Primary Debulking Surgery,PDS)和NACT联合IDS治疗的102例晚期卵巢上皮细胞癌患者的临床资料并进行生存随访。对影响患者预后的各项因素进行单因素、多因素和生存曲线分析。结果PDS组患者的中位无进展生存期(Progression-Free Survival,PFS)为15.2个月,NACT+IDS组患者的PFS为9.1个月,两组患者PFS差异具有统计学意义(P<0.05)。经单因素和Cox多因素分析,患者术后开始化疗时间、术后残留灶大小和体质指数是NACT+IDS组患者PFS的独立影响因素(P<0.05)。患者术后残留病灶大小、IDS前血清糖类抗原125(Carbohydrate Antigen 125,CA125)水平和手术病理分期是NACT+IDS组患者总生存期(Overall Survival,OS)的独立影响因素(P<0.05)。NACT+IDS组患者的不同术后残留灶大小、IDS前血清CA125水平是否正常以及Ⅲc期和Ⅳ期的中位OS比较差异存在统计学意义(P<0.05)。进行IDS后开始化疗时间是NACT+IDS组患者PFS的独立影响因素,IDS前血清CA125水平正常与否是NACT+IDS组患者OS的独立影响因素(P<0.05)。结论NACT+IDS组患者术后残留病灶大小、IDS前血清CA125水平和手术病理分期是NACT+IDS组患者PFS和OS的独立影响因素,对患者IDS前血清CA125水平进行检测并使其降低至正常水平,且在术后患者加强IDS围手术期管理,能够改善晚期卵巢上皮细胞癌患者预后。

β-catenin、Axin在卵巢上皮细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)和轴蛋白(Axin)在卵巢癌组织中表达情况及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色法检测42例卵巢上皮细胞癌、20例卵巢良性肿瘤组织标本中β-catenin和Axin蛋白的表达情况,分析β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床病理因素的关系。结果卵巢上皮细胞癌组织中β-catenin的异常表达率明显高于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05),Axin阳性表达率明显低于卵巢上皮性良性肿瘤组织(P<0.05);β-catenin和Axin在卵巢上皮细胞癌中的表达呈负相关性(r=-0.442,P<0.05);β-catenin异常表达率和Axin阳性表达率与卵巢上皮细胞癌临床分期、组织学分级、有无淋巴结转移密切相关(P均<0.05),而与病理类型无明显关系(P均>0.05)。结论β-catenin、Axin表达与卵巢癌临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关,β-catenin、Axin可作为预测卵巢癌侵袭转移及预后的指标。

卵巢上皮细胞肿瘤中凋亡调控因子Smac的表达及意义

目的:探讨上皮性卵巢肿瘤组织中Smac的表达及临床意义。方法:采用免疫组化技术分别检测20例正常卵巢、25例良性上皮性卵巢肿瘤及55例上皮性卵巢癌组织中Smac蛋白表达水平。结果:Smac蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率为45.45%,明显低于良性卵巢上皮性肿瘤组织76%和正常卵巢组织90%,且上皮性恶性卵巢肿瘤化疗患者组织中的Smac表达高于未化疗患者,经统计学分析差异具有显著性(P<0.05)。结论:Smac在上皮性卵巢癌的发生、发展中起重要作用;Smac有望成为治疗卵巢癌的新靶点。

血清激肽释放酶6在卵巢上皮细胞癌诊断和预后评价中的应用

目的探讨血清激肽释放酶6(hK6)在卵巢上皮细胞癌诊断和预后评价中的临床价值。方法用酶免疫吸附法测定30例卵巢上皮细胞癌患者、26例卵巢良性肿瘤患者及32例正常妇女血清hK6水平,比较分析hK6在3组间、卵巢上皮细胞癌患者不同临床分期和手术前后的变化。结果卵巢上皮细胞癌患者血清hK6水平[(7.76±4.61)μg/L]显著高于卵巢良性肿瘤组[(3.08±1.12)μg/L]和对照组[(2.66±1.16)μg/L](P<0.01),而卵巢良性肿瘤组和对照组之间差异无显著性(P>0.05)。Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期卵巢上皮细胞癌患者血清中hK6水平相比较,差异有显著性(P<0.01)。卵巢癌患者术后1周血清hK6水平低于术前水平(P<0.05);未能手术切除的卵巢癌患者血清hK6水平高于手术切除的患者(P<0.05)。结论血清hK6是一种新的卵巢上皮细胞癌的肿瘤标志物,其水平检测在卵巢上皮细胞癌的诊断、临床分期、预后评价方面均有较大的临床价值。

永生化正常小鼠卵巢上皮细胞系的建立

目的:探讨具有“永生化”特性的正常小鼠卵巢上皮细胞(MOSE)系建立的方法和可行性。方法:用胰酶消化法从温度敏感抗原(TsAg)转基因小鼠中分离MOSE,用4%血清培养液培养,通过细胞形态学特征的观察、细胞免疫组织化学染色检测CK-19和Vimentin来鉴别,体内成瘤实验观察有否恶性转化。结果:用胰酶消化法能迅速获得足够的MOSE,低血清(4%)培养可以有效去除可能污染的间质细胞,CK-19和Vimentin检测显示均符合上皮细胞的特性,细胞培养和体内成瘤实验均提示其符合具有“永生化”细胞的特性,没有自发发生恶性变,在体内没有成瘤能力。结论:用胰酶消化法,从转TsAg小鼠卵巢中获取的正常MOSE细胞具有“永生化”的特性,能够满足体外实验研究的需要,为卵巢癌的研究提供了可靠的细胞系。

Pokemon在卵巢上皮细胞肿瘤中的表达及意义

目的:探讨上皮性卵巢肿瘤组织中Pokemon的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤、30例卵巢上皮性癌组织中Pokemon蛋白表达水平,并分析其与卵巢癌临床病例特征的关系。结果:Pokemon在卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中表达,表达率分别为90%、30%、5%,差异有统计学意义(P<0.05)。Pokemon过表达与卵巢癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。结论:Pokemon在卵巢癌组织中高表达与卵巢癌组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有关,在卵巢癌的发生发展中起重要作用。

白细胞介素-1α对卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞11β类固醇脱氢酶基因表达的影响

目的探讨白细胞介素1α(IL1α)对正常人卵巢上皮细胞及卵巢癌细胞株11β类固醇脱氢酶(11βHSD)基因表达的影响。方法体外培养人卵巢上皮细胞(HOSE)及卵巢癌细胞株SKOV3、PEO4和PEO14,应用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(realtimePCR)方法比较上述4种细胞中11β类固醇脱氢酶1(11βHSD1)、11β类固醇脱氢酶2(11βHSD2)和白细胞介素1受体(IL1R)mRNA水平的表达及加入不同浓度的IL1α后,4种细胞中11βHSD1和11βHSD2mRNA表达水平的变化。结果正常卵巢上皮细胞中11βHSD1和IL1RmRNA表达水平较高,11βHSD2mRNA表达水平较低;而卵巢癌细胞株SKOV3和PEO4中11βHSD1和IL1RmRNA表达水平较低,11βHSD2mRNA表达水平较高。加入不同浓度的IL1α后,正常卵巢上皮细胞11βHSD1mRNA表达水平明显升高(P<0.01);PEO14细胞11βHSD1mRNA表达水平也升高(P<0.05);SKOV3和PEO411βHSD1mRNA表达水平无明显变化;正常卵巢上皮细胞11βHSD2mRNA表达水平无明显变化,卵巢癌细胞株PEO4、SKOV3及PEO1411βHSD2mRNA表达水平不同程度升高(P<0.05)。结论卵巢癌细胞丧失了对炎性细胞因子白细胞介素1反应的能力;11β类固醇脱氢酶异构体表达形式的不同是肿瘤细胞转化的一种特征,它可能与卵巢上皮细胞的恶性转化有关。

蛋白激酶Cα亚型在中国仓鼠卵巢上皮细胞中的表达

目的研究中国仓鼠卵巢上皮(CHO)细胞是否表达蛋白激酶C(PKC)α亚型。方法参照GenBank数据库PKCα亚型的cDNA序列,通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKCα亚型的特异引物,RT-PCR扩增CHO细胞PKCα亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKCα连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKCα亚型。结果RT-PCR和Western blotting方法均表明CHO细胞表达PKCα亚型,并经测序证实。结论CHO细胞中发现PKCα亚型的存在,为深入研究PKCα亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础。

比较两种化疗方案治疗卵巢上皮细胞癌的效果

目的:比较卵巢上皮细胞癌应用TP(紫杉醇+卡铂/顺铂)方案和PC(顺铂+环磷酰胺)方案的效果。方法:选择2004年1月～2011年6月有随访资料的卵巢癌患者48例,观察组24例采用TP方案,对照组24例采用PC方案。两组患者行卵巢癌分期手术或较为满意的肿瘤细胞减灭术,术后化疗次数在4次以上。结果:TP方案总有效率79.2%,与PC方案总有效率50%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:紫杉醇联合卡铂/顺铂化疗疗效优于PC方案。

整合素α3在卵巢上皮细胞癌中的表达及意义

目的:研究整合素α3(integrinα3,ITGA3)在卵巢上皮细胞癌组织和细胞系中的表达及其与卵巢上皮细胞癌发展的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学法分别检测卵巢上皮癌细胞系和癌组织以及良性组织中整合素α3 mRNA和蛋白的表达。结果:qRT-PCR检测结果显示,与正常卵巢上皮细胞相比,SKOV3和OVCAR-3卵巢癌细胞系中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与卵巢良性组织相比,癌组织中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。免疫组化结果显示,与卵巢良性组织相比,卵巢癌组织中整合素α3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。且晚期患者癌组织中整合素α3蛋白表达高于早期患者。结论:整合素α3在卵巢癌细胞系及癌组织中呈高表达,且与临床分期相关;其表达可能与卵巢癌的发生、发展和转移有一定相关性。

突变型P53蛋白在卵巢上皮细胞癌中过度表达的意义

探讨突变型P53蛋白在卵巢上皮细胞癌中的过度表达的意义。采用免疫组织化学染色方法 (S-P法 )检测 6 0例正常卵巢组织 ,6 0例良性卵巢上皮细胞肿瘤和 6 0例卵巢上皮细胞癌 (浆液性乳头状囊腺癌 2 9例 ,粘液性乳头状囊腺癌 17例 ,子宫内膜样癌 14例 )中突变型P53蛋白的表达情况。卵巢正常组织无突变型P53蛋白表达。P53蛋白表达阳性率在良性卵巢上皮细胞肿瘤为 5% (弱阳性 ) ,在恶性卵巢上皮细胞肿瘤为 4 6 .6 %。突变型P53蛋白强阳性表达多为细胞分化程度差和临床分期Ⅲ -Ⅳ期且有淋巴结转移的卵巢上皮细胞癌。

DC—CIK细胞免疫治疗联合化疗对中晚期卵巢上皮细胞癌患者免疫功能的影响

目的探讨树突状细胞（DC）-细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）细胞免疫治疗联合化疗对中晚期卵巢上皮细胞癌（OEC）患者外周血T细胞亚群、细胞因子分泌的影响，并评估其治疗效果。方法将49例中晚期OEC癌患者分为2组，其中23例采用DC—CIK联合Pc方案（紫杉醇＋卡铂）化疗为联合治疗组，26例同期采用单纯PC方案化疗为单纯化疗组。分别采用流式细胞术和液相多重蛋白定量（CBA）法检测患者治疗前后外周血淋巴细胞亚群和血清中细胞因子水平变化，并评价2组患者治疗后的不良反应、生活质量、生存期。结果3个周期治疗后，联合治疗组患者外周血中CD3＋T细胞、CIM＋T细胞、CD4＋／CD8＋比值、NK细胞比例及Thl细胞因子IFN-Y 、IL-2的水平与单纯化疗组比较，明显升高（P〈0．05），而CD8＋T细胞、CD4＋CD25＋Treg细胞比例及Th2细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的水平与单纯化疗组比较，明显下降（P〈0．05）；Karnofsky评分与单纯化疗组比较，明显升高（P〈0．05）。2组阃不良反应发生率以及治疗后1年生存率差异无统计学意义fP〉0．05）。结论DC—CIK细胞免疫治疗联合化疗能够提高OEC患者机体的免疫功能，提高患者的生活质量，且具有较高的安全性。

四物汤对永生化卵巢上皮细胞株IOSE的GnRH mRNA表现量的影响

目的:以四物汤萃取物处理卵巢上皮细胞株IOSE-80PC,探讨其对于卵巢细胞增殖及其GnRHmRNA的调节作用,盼能深入了解四物汤的作用及其机理,为临床应用四物汤经验提供分子生物层次的学理基础。方法:以四物汤萃取物处理卵巢上皮细胞株IOSE-80PC,分别利用不同萃取物浓度及作用时间,观察细胞生长增殖情况及进行反转录-聚合酶连锁反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR),了解四物汤影响细胞GnRHmRNA的表现情形。结果:使用不同浓度的四物汤萃取物,对IOSE-80PC细胞株的生长增殖情况与对照组比较皆无显着差异;四物汤萃取物可随作用时间增加而增加IOSE-80PC细胞株中GnRHmRNA的表现量,但不同浓度萃取物则对GnRHmRNA表现量呈现双向调节作用,低浓度增加GnRHmRNA的表现量,高浓度抑制GnRHmRNA的表现量。结论:四物汤萃取物可调节卵巢表面上皮细胞株IOSE-80PC的GnRHmRNA表现量,由此结果可推测四物汤在分子细胞学层次可调节GnRH的表现,藉以影响生殖内分泌系统。

紫杉醇联合铂类治疗老年晚期卵巢上皮细胞癌临床研究

目的对比分析紫杉醇(TAX)联合不同铂类药物治疗方案对老年、晚期卵巢上皮细胞癌(EOC)患者短期疗效、化疗毒副作用及CD4+CD25+Foxp3+细胞表达的影响。方法采用随机数表法,将该院肿瘤科收治的晚期EOC患者38例分为TP组[术后采用TAX+顺铂(DDP)方案实施化疗]和TC组[术后采用TAX+卡铂(CBP)方案实施化疗],每组各19例对比化疗前后两组疗效、化疗毒副作用情况及患者外周血中CD4+CD25+Foxp3+细胞表达水平。结果 (1)化疗治疗前,两组患者的CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比值比较差异无统计学意义(P>0.05),化疗治疗2周期后,TC组CD4+CD25+Foxp3+/CD4+比值明显低于TP组(P<0.05);(2)化疗期间,TP组消化道反应、骨髓抑制的发生率均明显高于TC组(P<0.05);(3)化疗2周期后,TC组、TP组的疾病控制率分别为94.74%和89.47%,两组疗效均高于85%,且对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于老年、晚期EOC患者,紫杉醇联合铂类化疗方案的近期疗效较为确切,而与TP方案相比,TC方案的毒副作用更小、更有助于下调CD4+CD25+Foxp3+细胞表达、改善患者免疫调节功能,值得在老年、晚期EOC患者术后的化疗治疗中加以推广和应用。

洛铂治疗晚期复发性卵巢上皮细胞癌疗效初探

目的探讨洛铂治疗晚期复发性卵巢上皮细胞癌的临床疗效及毒副反应。方法 2010年4月至2011年10月共20例晚期复发性卵巢上皮癌患者实施洛铂单药化疗或与其他药物联合化疗,50mg/m2,第1天静脉滴注,21天重复1次,至少1疗程,按WHO标准评价疗效及不良反应。结果 20例均能疗效评价,总有效率70.0%(14/20),其中完全缓解5例,部分缓解9例,稳定3例,进展3例中2例于随访中死亡。随访时间18月,中位无进展期5.1月,中位生存期9.3月。毒性反应主要是骨髓抑制、胃肠道反应和脱发,对症处理后缓解。结论洛铂治疗晚期复发性卵巢上皮细胞癌疗效可靠,毒副反应可逆,临床上值得推广。

哺乳与卵巢上皮细胞癌

已有少数人发现,随着哺乳时间的增加,卵巢上皮细胞癌和中间性上皮瘤发病的危险性降低.目前,许多发展中国家,妇女正在延长哺乳时间,因而为进一步研究哺乳是否预防卵巢癌提供了机会.有关学者于1979年10月～1988年,收集了澳大利亚、智利、中国、以色列、墨西哥、菲律宾和泰国等7国内的9个监测中心的资料,包括393例卵巢癌病人和经过年龄、医院和国籍等配对的2565例女性对照.

原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因敲除及其生物学特征变化

目的利用CRISPR/Cas9慢病毒载体系统建立小鼠原代卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,分析细胞增殖、细胞周期、克隆形成以及细胞转移侵袭能力的变化。方法构建Lenti CRISPRv2-sgRNA TP53基因敲除质粒,用293FT细胞进行慢病毒包装,转导小鼠原代卵巢上皮细胞,嘌呤霉素筛选出稳定敲除细胞系,进行PCR、蛋白免疫印迹以及免疫荧光鉴定。细胞增殖、细胞周期变化、克隆形成、细胞迁移侵袭能力分别用MTT、流式细胞分析、单层培养以及Transwell小室进行测定。结果 TP53基因敲除小鼠原代卵巢上皮细胞中P53表达缺失;TP53敲除引起细胞迅速增殖,DNA合成加速,克隆形成以及迁移侵袭能力增强。结论获得了原代小鼠卵巢上皮细胞TP53基因稳定敲除细胞系,细胞生物学特征明显改变。

激素替代治疗配方与卵巢上皮细胞癌的危险性

随着雌激素制品的增多,不同激素替代治疗(HRT)对绝经后妇女的影响成为重要问题。为评估特定HRT配方与上皮性卵巢癌(EOC)危险性的联系进行病例-对照研究。767例研究对象调查前均诊断为EOC 6个月以上,年龄20～69岁。对其中484例浸润性卵巢癌进行分析。对照组年龄20～65岁,经随机数字拨号纳入。研究组484例和926个社区对照按照年龄和居住地匹配。收集两组详细的人口统计学资料和妇产科病史,有无乳腺癌和卵巢癌家庭史。口服避孕药(OC)

双酚S经ERβ-MAPK信号通路介导对人正常卵巢上皮细胞的毒性作用

目的探讨模拟人体实际暴露水平的双酚S长期(7和14 d)染毒,通过ERβ-MAPK信号通路扰动,对人正常卵巢上皮细胞IOSE 80的毒性效应。方法使用基于生理的药代动力学模型结合中国长江沿岸地区女性血清双酚S水平确定给药浓度,同时设置溶剂对照和β-雌二醇(17β-estradiol,E_(2))对照,对IOSE 80细胞进行长期染毒(7和14 d),每2天更换一次相应浓度(0、6.79×10^(-6)、6.79×10^(-4)、6.79×10^(-2)、6.79μmol/L双酚S和10 nmol/L E_(2))完全培养基。通过qPCR检测雌激素受体(ERβ和GPR30)、MAPK信号通路(P38/JNK/ERK信号通路)关键基因和促性腺激素释放激素相关基因(GnRH-I、GnRH-II和GnRH-R)mRNA表达;在此基础上给予ERβ-MAPK信号通路抑制剂,采用流式细胞术检测细胞周期;同时进行剂量-反应关系分析,计算相关指标的基准剂量可信限下限值。结果与溶剂对照组相比,双酚S染毒7 d后,G_(2)/M期细胞比例显著增加(P<0.05),GnRH-I、GnRH-II和GnRH-R的mRNA表达量显著下调(P<0.05);双酚S染毒14 d后,ESR2、MAPK3、MAPK9的mRNA表达量显著上调(P<0.05),GnRH-II和GnRH-R的mRNA表达量显著下调(P<0.05)。双酚S染毒7 d的GnRH-II mRNA表达量,双酚S染毒14 d的G_(0)/G_(1)期比例、MAPK3和MAPK8 mRNA表达量,以及双酚S染毒7和14 d后的GnRH-I mRNA表达量,呈现较好的剂量-反应关系,但拟合结果较差。结论双酚S长期低剂量染毒可激活ERβ-MAPK信号通路引起IOSE 80细胞周期阻滞,也可导致IOSE 80细胞激素分泌变化。

年轻妇女卵巢上皮细胞癌预后因素分析

目的 探讨年轻妇女卵巢上皮细胞癌的临床特点、生存率和影响预后的因素。方法回顾分析 1985～ 1997年收治的 4 5 5例卵巢上皮细胞癌患者的临床资料。生存率采用Kaplan Meier方法计算 ,利用Cox风险比例回归模型分析比较影响患者预后的独立因素。结果 ≤ 4 0岁组92例 ,>4 0岁 36 3例。≤ 4 0岁组早期、高分化、黏液性癌所占比例明显高于 >4 0岁组 ,浆液性癌、腹水、肿瘤残存所占比例低于 >4 0岁患者 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。≤ 4 0岁组和 >4 0岁组的 5年生存率分别为 79.5 %和 2 8.2 % ,差异均有极显著性 (P <0 .0 0 1)。单因素分析两组间同一临床分期、组织类型、分级、肿瘤残存情况等显示 ,在相同情况下 ,≤ 4 0岁患者的生存率明显高于 >4 0岁者。多因素分析显示 ,临床分期、肿瘤残存情况和年龄为影响预后的独立因素。结论 ≤ 4 0岁的卵巢上皮细胞癌患者 ,其早期、Ⅰ级、黏液性囊腺癌所占比例高 ,肿瘤残存小 ,腹水少 ,总的 5年生存率高。临床分期、肿瘤残存情况、年龄是影响卵巢上皮细胞癌预后的独立因素。