侧脑室注射促性腺激素抑制激素/RF酰胺相关肽-3对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠子宫腔液影响的蛋白质组学分析

目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结合生物信息学分析侧脑室微量注射GnIH对OEP模型大鼠(n=30)子宫腔液蛋白的影响。比较侧脑室注射GnIH/RFRP-3实验组(n=15,给予2 g/L RFRP-3,16μl/kg)与生理盐水对照组(n=15,给予生理盐水16μl/kg) 6 h后子宫腔液的蛋白质组分,利用Uni Prot数据库筛选差异蛋白并对所得差异蛋白进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路分析。从STRING数据库获得蛋白相互作用数据,利用Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用网络(PPI)并筛选中心节点蛋白。结果应用LC-MS/MS技术所得质谱数据利用Uni Prot数据库进行搜索鉴定,筛选出差异蛋白419个,其中279个上调,138个下调;GO功能富集分析显示,差异蛋白主要富集于对有机物质的反应,对内源性刺激的反应,对含氧化合物的反应等生物过程;KEGG通路分析显示,差异蛋白在糖酵解、碳代谢、肌动蛋白骨架调节、甲状腺激素合成等代谢途径富集(P<0.05);分析蛋白相互作用网络获得5个中心节点蛋白:白蛋白(Alb)、α-烯醇化酶1(Eno1)、过氧化物酶6(Prdx6)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(Timp1)、Ras相关C3肉毒素底物1 (Rac1)。结论本实验结果提示,GnIH可能通过下丘脑-垂体生殖轴调节子宫腔液蛋白的分泌,并可能通过上调Alb、Eno1和Prdx6,下调Timp1和Rac1,调节子宫生理及病理过程。

雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞Bcl-2和Bax表达的影响

本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型,用免疫组织化学SABC法结合图象分析方法,观察大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax的变化,探讨雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax表达的影响。去卵巢(OVX)大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达较正常对照组明显减弱(P<0.05),雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),而较卵巢摘除组显著增高(P<0.05);卵巢摘除后同时给予特异性雌激素受体阻断剂(TAM)和17β-雌二醇(OVX+TAM+ERT)组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达较正常对照组显著减弱(P<0.05),但与OVX组无显著性差异(P>.05)。各组中Bax的表达无显著性差异(P>0.05)。实验结果提示雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达,但对Bax的表达无影响。

乌鳖口服液对卵巢摘除大鼠雌激素活性的影响

乌鳖口服液 ８．１ｇ／ｋｇ和 １６．２ｇ／ｋｇ每日１次灌胃，连续２０天，经ＴＴＣ还原实验结果表明，大鼠阴道角化上皮细胞数目明显增多，与模型组比较是显著差异（Ｐ＜０．０５）。经放射免疫ｒ计数器检测结果显示，１６．２ｇ／ｋｇ剂量组血清Ｅ２水平与模型组比较具显著性差异，各剂量组与正常组比较也具有增加趋势。

补充雌激素对卵巢切除大鼠血清皮质醇和IGF-Ⅰ的影响

目的研究成年雌性SD大鼠于卵巢切除后及再补充雌激素后血清皮质醇和类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的变化。方法成年雌性SD大鼠分为假手术对照组、去势组、去势+补充雌激素组。术后5个月处死,采取血清检测雌二醇、皮质醇及IGF-Ⅰ的水平。结果 大鼠卵巢切除后雌激素水平显著降低(P<0.01),而皮质醇水平明显升高(P<0.05),IGF-Ⅰ无明显变化;应用雌激素治疗,可以显著降低血清皮质醇(P<0.01)和IGF-Ⅰ(P<0.01)的水平。结论 卵巢切除及补充雌激素对大鼠血清皮质醇和IGF-Ⅰ有显著影响。

雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞胆碱乙酰基转移酶和一氧化氮合酶表达的影响

目的 :探讨雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中神经递质的影响。方法 :建立去卵巢 (OVX)和雌激素替代疗法动物模型 ,2个月后用免疫组化结合图象分析方法观察大鼠心内神经节细胞中胆碱乙酰基转移酶 (ChAT)和一氧化氮合酶 (NOS1)的变化。结果 :在OVX大鼠心内神经节细胞中ChAT和NOS1较正常对照组明显减少 ,雌激素 (E2 )替代治疗组与正常对照组相比无明显变化 ,OVX +雌激素受体拮抗剂 (TAM)组较正常对照组显著减少 ,但与OVX组无明显差异。结论 :雌激素能上调大鼠 (OVX)心内神经节细胞中ChAT和NOS1的表达 ,雌激素可能够通过对心内神经节细胞中神经递质的调节 。

补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失及血1,25(OH)_2D水平的影响

目的以卵巢摘除法建立大鼠雌激素缺乏型骨质疏松模型,研究补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失和维生素D代谢的影响,探讨血清1,25(OH)2D水平与骨量丢失的相关性。方法手术摘除雌性大鼠双侧卵巢,以子宫重、子宫重/体重、子宫内膜厚度和血E2判断卵巢摘除是否完整;以骨干重、灰重、骨密度等骨量指标和骨组织形态计量、骨代谢生化标志物等鉴定骨质疏松模型建立。将实验大鼠随机分为假手术组(SHAM)、卵巢摘除组(OVX)、卵巢摘除尼尔雌醇干预组(OVX+CEE3)和卵巢摘除补肾中药干预组(OVX+TCM),每组10只。手术后35天开始灌服药物,给药13周后处死,检测上述指标和血25(OH)D、1,25(OH)2D、Ca、P等指标,观察尼尔雌醇和补肾中药对切卵大鼠骨量和骨结构的改善作用。结果 OVX大鼠双侧卵巢摘除完整,雌激素缺乏诱发骨质疏松指标明显;OVX组血清钙较SHAM组明显降低(P<0.01),给予尼尔雌醇干预后血清钙明显恢复(P<0.01),而补肾中药组血清钙仍在低水平。各组血25(OH)D水平并无明显改变,而OVX组血清1,25(OH)2D水平明显升高,较SHAM组[(38.45±10.99)nmol/L]增加64.1%(P<0.01);OVX+CEE3组血清1,25(OH)2D水平明显回落,较OVX组降低60.8%(P<0.01);OVX+TCM组血清1,25(OH)2D仍处于OVX组水平,明显高于SHAM组(P<0.01)。结论与尼尔雌醇比较,补肾中药复方改善卵巢摘除大鼠骨量和骨结构的作用不明显,可能与其未有效改善血清低钙和代偿性高1,25(OH)2D水平有关。

雌激素对雌性SD大鼠学习记忆能力和海马突触蛋白的影响

阿尔茨海默病（Alzheimer′s Disease,AD）也称为老年性痴呆,是一种出现在老年前期或老年期的慢性进展性中枢神经系统退行性疾病。随着世界人口趋向老龄化,AD患者逐渐增多,给社会和家庭带来了严重的负担。雌激素是维持女性正常心理与生理功能所必须的内源性活性物质,其对生殖系统的影响已逐渐被人们所熟知。

雌二醇对卵巢摘除大鼠子宫组织结构的影响

雌激素对雌性动物的生殖和发育起决定性的作用,雌激素的重要生理作用之一就是调控生殖器官和一些外周组织的生长发育和功能。有研究表明过量的雌激素是一些疾病发生的可能诱因,大量流行病学的研究表明雌激素,主要是雌二醇与乳腺、子宫内膜和卵巢的癌变相关。近年来，子宫内膜癌的发病率呈持续上升趋势，

益肾填精法对摘除卵巢大鼠E_2、FSH水平的影响

目的：观察益肾填精中药对摘除卵巢的大鼠雌激素（E2）及促卵泡激素（FSH）水平的影响。方法：选择雌性成年未孕sD大鼠，3～4月龄，随机分为正常对照组、模型对照组、中药组。摘除模型对照组和中药组大鼠双侧卵巢，术后分组给予不同的药物，连续灌胃至术后2月处死动物，检测血清E2及FSH水平的变化。结果：模型对照组和正常对照组相比，E2水平下降，FSH水平升高，差别有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。中药组和正常对照组相比E2水平下降，差别有统计学意义（P〈n01），和模型对照组比较E2水平升高，FSH水平降低，但差别无统计学意义（P〉0．05）。结论：益肾填精中药有提高摘除卵巢大鼠体内E2水平，降低FSH水平的作用。

人胎盘埋植疗法对去卵巢大鼠雌二醇水平和脑胆碱酯酶活性的影响

目的探讨人胎盘埋植疗法对去卵巢大鼠雌二醇及脑内乙酰胆碱酯酶的影响。方法测定和比较以下四组3个月龄SD雌性大鼠的雌二醇、脑胆碱酯酶含量;(1)实验组摘除双侧卵巢,不同剂量胎盘皮下包埋;(2)阴性对照组去除卵巢,无治疗;(3)阳性对照组去除卵巢,用雌激素治疗;(4)假手术组不摘除卵巢。结果高、中剂量人胎盘组的雌二醇水平高于阴性对照组(P<0.01);脑胆碱酯酶活性低于阴性对照组(P<0.01)。低剂量组与阴性对照组比较无差异(P>0.05)。结论高、中剂量人胎盘能提高去卵巢大鼠的雌激素水平,并能抑制其脑内胆碱酯酶的活性。

侧脑室微量注射GnIH对OEP大鼠血浆GnRH、LH水平的影响

目的:观察侧脑室注射促性腺激素抑制激素(Gn IH)对OEP大鼠血浆促性腺激素释放激素(Gn RH)和黄体生成素(LH)水平的影响。方法:健康成年雌性SD大鼠40只,均建立卵巢摘除兼予雌激素注射(OEP)模型。随机分为Gn IH实验组和生理盐水对照组,每组20只,大鼠分别给予侧脑室注射Gn IH(5μl)和同等剂量生理盐水。采用ELISA法检测注射后1h、2h、4h、6h(n=5)大鼠血浆Gn RH和LH的水平。结果:与对照组相比,注射Gn IH1h、6h Gn RH、LH水平无明显变化(P>0.05);注射Gn IH 2h、4h Gn RH、LH水平明显降低(P<0.05)。结论:侧脑室注射Gn IH可影响OEP大鼠血浆Gn RH和LH的水平,且影响作用与时间有关。

瘦素经POMC神经元对神经内分泌-生殖轴的影响

目的:探讨瘦素(leptin)对神经内分泌-生殖轴的可能调节机制。方法:建立卵巢摘除补充雌激素(OEP)大鼠模型,动物随机分为leptin组、α-黑素细胞刺激素(α-MSH)组和生理盐水对照组,于侧脑室注射后1h、2h、4h和6h分别取血和脑组织。ELISA法检测血中促性腺释放激素(Gn-RH)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)浓度。Western印迹检测下丘脑组织中阿片促黑激素皮质素原(POMC)蛋白量的变化。结果:侧脑室注射leptin可促进GnRH、FSH、LH的分泌,而注射α-MSH则抑制GnRH、FSH和LH的分泌。注射leptin显著增加下丘脑中的POMC含量。结论:Leptin可能通过POMC神经元或与其他途径共同影响下丘脑-垂体生殖轴的分泌功能;POMC神经元发挥的调节作用可能晚于或弱于其它神经元。