转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞迁移、侵袭能力及EGFR表达变化

目的观察转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞迁移、侵袭能力及表皮生长因子受体(EGFR)表达变化。方法将卵巢癌ES-2细胞分为观察组和对照组,观察组转染miR-7类似物,对照组转染无关序列,继续培养24 h,用real-time PCR法检测两组细胞miR-7,用细胞划痕实验检测两组细胞迁移能力,用Transwell细胞侵袭实验检测两组细胞侵袭能力,用Western blotting法检测两组细胞中EGFR蛋白,用real-time PCR法检测两组细胞中EGFR mRNA。结果观察组、对照组miR-7相对表达量分别为1.57±0.21、0.13±0.02,划痕愈合率分别为35.32%±5.43%、84.21%±4.35%,穿膜细胞数分别为(149±28)、(532±54)个,EGFR蛋白相对表达量分别为1.27±0.31、3.65±0.67,EGFR mRNA相对表达量分别为0.13±0.04、0.57±0.15,两组比较,P均<0.05。结论转染miR-7类似物的卵巢癌ES-2细胞miR-7表达上调,同时细胞迁移及侵袭能力下降、EGFR蛋白及mRNA表达降低;推测miR-7表达上调导致了细胞迁移及侵袭能力的下降,miR-7的这一作用是通过下调EGFR表达实现的。

MDM2、p53在卵巢肿瘤组织及细胞系的表达和意义

目的 研究MDM 2 (murinedoubleminute 2 )和 p5 3在卵巢肿瘤组织、细胞系表达及与卵巢癌发生关系。 方法 ①用细胞培养、蛋白质提取、Western免疫印迹法检测 17个卵巢癌细胞系MDM 2、p5 3蛋白表达。②用免疫组化SP法检测卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中MDM 2、p5 3蛋白的表达。结果 ① 17个卵巢癌细胞系MDM 2蛋白p90表达阳性率为 11 8% (2 / 17) ;p5 3的阳性表达率为 3 5 3 % (6/ 17) ,2例MDM 2表达阳性出现在野生型卵巢癌细胞株。②在卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤和卵巢癌中MDM 2的阳性表达率分别为 :2 0 % (2 / 10 )、2 5 % (2 / 8)和 2 5 % (5 / 2 0 ) ;p5 3的阳性表达率分别为 2 0 % (2 / 10 )、3 7 5 % (3 / 8)和 60 % (12 / 2 0 )。 3组中 ,MDM 2阳性表达率无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,而 p5 3在卵巢癌中的阳性表达率显著高于卵巢良性上皮性肿瘤和交界性上皮性肿瘤 (P <0 0 5 )。结论 p5 3的异常表达与卵巢肿瘤的恶性表型相关。在卵巢癌的发生发展过程中 ,p5 3的异常表达比MDM 2更有意义。MDM 2表达阳性可能在无 p5 3基因突变的卵巢癌细胞发生。

抗HER-2嵌合抗体chA21对SKOV3细胞增殖的抑制及诱导其凋亡的作用

目的探讨抗HER-2嵌合抗体chA21在体外抑制高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡的作用。方法采用MTT比色法、HE染色、透射电镜、流式细胞术及TUNEL染色法等观察和检测chA21对人卵巢癌细胞SKOV3增殖抑制和凋亡的诱导作用。结果chA21(0.2mg/L^5.4mg/L)可显著抑制SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性。结论chA21在体外可显著抑制SKOV3细胞的增殖,诱导凋亡可能是其主要的作用途径。

MCM2S27位点的磷酸化水平对卵巢癌侵袭、转移和凋亡的影响及其分子机制探究

微小染色体维持蛋白2(MCM2)在DNA复制、修复过程中发挥重要作用,同时也与多种肿瘤的发生密切相关。MCM2包含多个磷酸化位点,其生物学功能的发挥可通过自身的磷酸化和去磷酸化进行调节。我们首先在淋巴道高低转移的细胞系中发现其转移能力与MCM2S27位点的磷酸化程度有关,这一点同时在卵巢癌临床样本中得到了验证。我们通过在卵巢癌细胞系H08910pm和SKOV3中引入MCM2S27位点去磷酸化突变后发现,该位点去磷酸化后可抑制细胞在Transwell、划痕实验中的侵袭、迁移能力,并通过Westernblot实验发现去磷酸化组EMT过程受到抑制。

lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中的表达及其对卵巢癌生物学行为的影响

目的探讨lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中相对表达情况,评估其对卵巢癌生物学行为的影响。方法将2017年4月-2019年4月宁波市鄞州人民医院治疗的112例卵巢癌患者纳入研究,分析卵巢癌及卵巢癌旁组织、卵巢癌细胞系lncRNA SOX2OT表达情况,并测试其影响增殖及周期、迁移状况。结果卵巢癌组织内SOX2OT mRNA表达(3.50±0.13)高于癌旁组织(1.59±0.21,t=81.045,P<0.01);HO-8910PM细胞株内lncRNA SOX2OT表达(5.78±0.04)高于HO-8910细胞株(1.05±0.11,t=405.918,P<0.05)。空白对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1组、siSOX2OT-2组;阴性对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1、siSOX2OT-2组(均P<0.01)。子宫内膜样癌、浆液性卵巢癌、黏液性卵巢癌lncRNA SOX2OT表达分别为4.12±0.25、3.68±0.42、3.44±0.31,组间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中呈异常高表达,敲低lncRNA SOX2OT表达可对卵巢癌细胞的增殖及迁移、侵袭进行抑制,加快卵巢癌细胞凋亡。