雷帕霉素联合顺铂对卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用

目的探讨雷帕霉素单独及联合顺铂应用对人卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响及可能的分子机制。方法体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞,实验组分别采用不同浓度的雷帕霉素、顺铂及40nmol/L雷帕霉素+10μmol/L顺铂作用,MTT法检测上述药物对细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测分析细胞凋亡率及细胞周期分布变化。结果雷帕霉素单独及联合顺铂应用均可显著抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,其作用呈现时间-剂量依赖性,且两药联合作用时抑制率显著增高(P<0.05),显示两药有协同作用;流式细胞仪检测显示雷帕霉素能使卵巢癌SKOV-3发生G1期阻滞,同时可诱导细胞凋亡,其凋亡率随用药浓度增加而增加。结论雷帕霉素和顺铂可显著地抑制人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,且两药联合应用时呈现协同作用。

姜黄素联合顺铂对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用

目的探讨姜黄素及其联合顺铂对体外培养人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制作用。方法将SKOV-3细胞培养并分别单独加入不同浓度姜黄素(5、10、20、40、80μmol/L)、顺铂(10μmol/L)及联合作用后,用MTT法检测SK-OV-3细胞增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布。结果 MTT法检测结果显示,不同浓度姜黄素组,随着药物浓度增加,作用时间延长,细胞的增殖抑制率上升(P<0.05);联合用药组明显高于单一用药组(P<0.05)。流式细胞术结果显示,姜黄素能使卵巢癌SKOV-3细胞发生G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡;随着姜黄素用药浓度增加,细胞凋亡率增高。结论姜黄素对卵巢癌SKOV-3细胞增殖具有抑制作用,在一定范围内,这种抑制作用呈剂量-时间依赖性;姜黄素、顺铂联合应用具有协同作用。

体外稳定转染的重组质粒pEgr-hp53联合辐射对人卵巢癌SKOV-3细胞周期进程及增殖的影响

目的：探讨体外稳定转染的pEgr-hp53重组质粒联合辐射对人卵巢癌SKOV-3细胞周期及增殖的影响，阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法：脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53和pcDNA3.1体外转染SKOV-3细胞所表达的SKOV-3-hp53和SKOV-3-vect分别接受0、0．5、2．0和5．0 GyX射线照射，即8个实验组，通过绘制生长陆线评价肿瘤细胞增殖速度，流式细胞术检测肿瘤细胞周期进程的变化。结果：与0 Gy组比较，体外稳定转染的SKOV-3-hp53经不同剂量x射线（0．5、2．0和5．0 Gy）照射后2d细胞数均明显降低（P〈0．05或P〈0．01），并随照射剂量的加大和照后时间的延长下降更为明显；与0 Gy组比较，G0／G1期细胞百分数均明显增高（P〈O．001），G2／M期不同程度降低。SKOV-3-hp53照射组细胞数均明显低于其相应的SKOV-3-vect照射组，0．5 Gy照后4～8d、2．0 Gy照后2d和5．0 Gy照后6d细胞数均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）；G0／G1期细胞百分数明显增高（P〈O．01），G2／M期明显下降（P〈0．01）。结论：体外稳定转染的pEgr-hp53联合辐射可使人卵巢癌SKOV-3细胞周期阻滞于G1期，并抑制肿瘤细胞增殖。电离辐射激活Egr-1启动子，使p53基因表达增强，加强了对肿瘤细胞生长的抑制作用。

2-脱氧-D-葡萄糖对人卵巢癌SKOV-3增殖的影响

目的探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对人卵巢癌SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将不同浓度2-DG(2.5 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L)作用人卵巢癌SKOV-3细胞不同时间后,MTT检测各组细胞生长抑制率;Hoechst33258染色后,荧光显微镜下观察细胞形态变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期。结果不同浓度2-DG对SKOV-3细胞均有增殖抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并且呈现剂量和时间依赖性;结果还显示2-DG可使细胞周期阻滞在G0/G1期;流式细胞仪凋亡检测结果显示2-DG可诱导人卵巢癌坏死或凋亡。结论体外试验中,2-DG对SKOV-3细胞增殖有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。

毛叶香茶菜提取物体内外对人卵巢癌Skov-3细胞作用的研究

目的探讨毛叶香茶菜提取物乙酸乙酯部分(IJE)在体内外对人卵巢癌Skov-3细胞的作用。方法采用MTT法检测IJE对人卵巢癌Skov-3细胞增殖的抑制作用;应用裸鼠Skov-3卵巢癌移植瘤模型,以移植瘤生长曲线,计算腹腔注射IJE后的移植瘤瘤重抑制率。结果 MTT检测显示,IJE对卵巢癌Skov-3细胞有较强增殖抑制作用,其48和72 h的IC_50分别为48.17和34.75μg/ml;IJE的3个剂量组(100,200,300 mg/kg)对Skov-3裸鼠肿瘤抑制率分别为24.71%、59.92%和64.61%,且呈浓度依赖性。结论 IJE在体内体外对Skov-3细胞的生长增殖均有抑制作用,相关机制及有效成分仍有待进一步研究。

蟾毒灵对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖的影响

目的:探讨蟾毒灵对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖抑制和凋亡的影响,为卵巢癌临床治疗提供依据和分子基础。方法:不同浓度蟾毒灵处理卵巢癌SKOV-3细胞后,MTT法检测细胞增殖抑制作用,细胞免疫化学染色法检测细胞的凋亡,Western Blot法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白以及计算Bax/Bcl-2的比值。结果:蟾毒灵能够抑制SKOV-3细胞的增殖,且成时间和剂量依赖性,免疫荧光显示蟾毒灵对SKOV-3细胞具有凋亡作用,Western Blot检测发现蟾毒灵能够促进Caspase-3蛋白的活化,提高Bax/Bcl-2的比值。结论:蟾毒灵在体外能够抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖和促进卵巢癌SKOV-3细胞的凋亡。

白皮杉醇对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其诱导凋亡作用的实验研究

目的:探究白皮杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及相关的作用机制。方法:采用CCK8法检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞迁移能力的影响;采用Transwell侵袭实验检测不同浓度的白皮杉醇对SKOV-3细胞侵袭能力的影响;采用DAPI染色法检测不同浓度白皮杉醇对SKOV-3细胞凋亡的影响;采用Western blot实验检测SKOV-3细胞核增殖抗原(Ki67)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved caspase-3)的表达水平。结果:白皮杉醇能够明显抑制SKOV-3细胞的增殖能力,明显降低SKOV-3细胞的迁移能力和侵袭能力;明显提高SKOV-3细胞的凋亡水平;白皮杉醇干预后,SKOV-3细胞Ki67和Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达显著升高。结论:白皮杉醇能够有效抑制SKOV-3细胞的增殖、迁移和侵袭,并能够诱导SKOV-3细胞凋亡。

细胞毒素-1对人卵巢癌细胞体外增殖、凋亡的影响

目的探讨细胞毒素-1(Cytotoxin-1,CTX-1)对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖凋亡的影响。方法利用0、4、8、12μg/mL浓度CTX-1处理SKOV-3细胞6、12、24 h,MTS法检测细胞活性,8μg/mL CTX-1处理SKOV-3细胞24、48 h,Hoechst-33258荧光染色观察细胞核染色质形态。取处理6、12 h后细胞,利用流式细胞仪检测SKOV-3细胞的凋亡率。结果4、8、12μg/mL的CTX-1可抑制SKOV-3细胞活性及增殖,呈时间-剂量依赖。Hoechst-33258染色观察可见细胞染色质呈固缩或碎裂状、染色质着色不均、核形态各异,随时间增加而更趋明显。8μg/mL CTX-1处理细胞,6 h细胞坏死率为(1.90±0.27)%,晚期凋亡率为(10.96±1.56)%,而早期凋亡率为(1.52±0.39)%;12 h细胞坏死率为(10.62±0.96)%,晚期凋亡率(15.07±1.23)%,而早期凋亡率为(1.88±0.17)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CTX-1可以抑制人卵巢癌细胞活性、抑制其体外增殖、诱导其发生凋亡,该作用呈剂量依赖和时间依赖,主要引起细胞晚期凋亡和坏死。

姜黄素对卵巢癌细胞SKOV-3增值抑制作用

目的研究姜黄素对SKOV-3细胞的抑制作用。方法实验设模型组(加正常生长的SKOV-3细胞)、空白组(加等量培养液)和实验组。实验组又分为7组[5个浓度(5,10,20,40,80μmol·L^(-1))姜黄素组,即C_1-C_5组,顺铂组(10μmol·L^(-1)),20μmol·L^(-1)姜黄素+10μmol·L^(-1)顺铂组(联合组),每组设6个复孔;用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测姜黄素对SKOV-3细胞的增殖抑制作用,用Annexin V-FITC/碘化吡啶(PI)双染法检测细胞凋亡情况,PI单染法检测药品对细胞周期的影响,用酶联免疫法测定细胞Bcl-2蛋白表达情况。结果姜黄素对SKOV3抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性;模型组凋亡率为0.15%,实验-C1、C2、C3、C4、C5组凋亡率分别为3.86%,26.98%,33.76%,47.75%,68.86%,顺铂组凋亡率为53.91%,联合组凋亡率为77.96%。随着姜黄素浓度增加,SKOV-3细胞在G0-G1期细胞数量逐渐增加,G2-M期和S期细胞数量在逐渐减少(P<0.05);姜黄素能抑制SKOV-3细胞Bcl-2蛋白的表达,并呈浓度依赖性。结论姜黄素能抑制SKOV-3的增殖,主要是诱导细胞凋亡率并使细胞周期停滞的共同作用结果。

7-乙基-10-羟基喜树碱脂质体的抗肿瘤作用

目的探索7-乙基-10-羟基喜树碱(7-ethyl-10-hydroxy camptothecin,SN-38)脂质体的体内外抗肿瘤作用。方法体外实验采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,M TT]法检测SN-38脂质体对9种人源肿瘤细胞的抑制作用;体内实验利用A549非小细胞肺癌和SKOV-3卵巢癌荷瘤裸鼠模型,以伊立替康为阳性对照药,统计裸鼠体质量、瘤体积、抑瘤率、相对肿瘤增殖率等指标,考察不同剂量的SN-38脂质体对肿瘤的生长抑制作用。结果体外实验表明SN-38脂质体能抑制多种肿瘤细胞增殖;体内实验表明SN-38脂质体高、中、低剂量(4、2、1 mg·kg-1)对A549荷瘤裸鼠的抑瘤率分别为69.75%、52.08%和29.78%,SN-38脂质体高、中、低剂量(8、4、2 mg·kg-1)对SKOV-3荷瘤裸鼠的抑瘤率分别为54.19%、38.91%、23.71%。结论 SN-38脂质体体外对多种肿瘤细胞有较好的抗增殖作用,体内对A549非小细胞肺癌及SKOV-3卵巢癌荷瘤裸鼠有较好的治疗作用。

促黄体激素释放激素-甲氨蝶呤的合成及抗肿瘤活性

目的:合成促黄体激素释放激素-甲氨蝶呤(LH-RH-MTX)并研究其抗肿瘤活性。方法:将APA与[D-Lys6]LH-RH共价连接合成LH-RH-MTX;用半制备型反相HPLC进行纯化与定量,用ESI-MS进行结构确证;应用MTT法检测其对人卵巢癌SKOV-3细胞的抗肿瘤活性。结果:LH-RH-MTX的纯度为98.00%,产率为61.96%;ESI-MS分析得产物分子量为1 268.15。MTT实验结果表明LH-RH-MTX对人卵巢癌SKOV-3细胞具有明显的抗肿瘤活性。结论:LH-RH-MTX可与表达有LH-RH受体的肿瘤细胞特异性结合并发挥作用,作用优于游离MTX。